[摘要]目的：使用CBX01-15型兔下頜骨專用牽引器，建立兔雙側(cè)下頜骨牽引成骨動物模型，并評價其牽引效果。方法：新西蘭大白兔8只，行雙側(cè)下頜骨截骨術(shù)，安置牽引器。延遲5天后，兩側(cè)下頜骨均以0.5mm/次，2次/天的速度牽引15天，牽引結(jié)束后固定8周，新骨分別行大體、放射學(xué)和組織學(xué)檢查。結(jié)果：所有動物均良好耐受牽引及固定，未發(fā)生死亡，雙側(cè)下頜體均顯著延長。固定8周時，兩側(cè)新骨均接近正常骨。結(jié)論：兔雙側(cè)下頜骨牽引成骨動物模型牽引效果可靠，新骨再生良好。

[關(guān)鍵詞]雙側(cè)下頜骨；牽引成骨；動物模型

[中圖分類號]R782 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A [文章編號]1008-6455（2013）12-01299-03

牽引成骨（distraction osteogenesis， DO）是一種通過一定頻率和速度緩慢牽引骨裂隙，獲得新骨再生的臨床技術(shù)[1]。建立有效的動物模型是進(jìn)行牽引成骨臨床研究的基礎(chǔ)。本研究應(yīng)用自行設(shè)計的CBX01-15型兔下頜骨專用牽引器，進(jìn)行兔雙側(cè)下頜骨截骨 ，并安置牽引器，對稱性牽引，獲得了良好的骨再生，未發(fā)生動物死亡，現(xiàn)報道如下。

1 材料和方法

1.1 新西蘭白兔8只，由徐州醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供，全身骨骼系統(tǒng)發(fā)育良好，口頜系統(tǒng)無異常，體重2.8～3.2kg。

1.2 牽引器：為自行設(shè)計，由浙江省慈溪市慈北口腔器械有限公司生產(chǎn)的純鈦CBX01-15型兔下頜骨專用牽引器?？蔂恳嚯x20mm， 螺桿每旋轉(zhuǎn)360°牽開0.4mm。

1.3 動物手術(shù)及牽引過程：予2%戊巴比妥鈉，30mg/kg，經(jīng)兔耳緣靜脈注射行全身麻醉。頜下備皮，碘伏消毒鋪無菌巾。切開皮膚、皮下、肌層，分離達(dá)下頜骨下緣，貼骨面翻開骨膜，顯露下頜骨體部及頦孔，在下頜第一臼齒與頦孔之間，裂鉆垂直于下頜骨下緣行雙側(cè)下頜骨皮質(zhì)骨截骨，折斷下頜骨，注意保護下牙槽血管神經(jīng)束，避讓近下頜骨下緣骨內(nèi)段下牙槽神經(jīng)，使用直徑1.6mm鉆頭鉆孔，直徑2.0mm鈦釘固定牽引器。嚴(yán)密縫合皮下及皮膚術(shù)創(chuàng)，牽引桿由皮下引流口伸出。術(shù)后每天予慶大霉素4萬單位肌注，連續(xù)5天。術(shù)創(chuàng)局部用碘伏每天清洗3次到4次。并予精細(xì)顆粒飼料喂養(yǎng)，注意觀察兔術(shù)后生命體征變化。延遲5天后，雙側(cè)下頜骨以0.5mm/次，2次/天的速度牽引15天，兩側(cè)均牽引15mm，固定8周。

1.4 觀察方法：固定8周時處死全部動物。切取下頜骨，觀察牽引區(qū)新骨外觀、色澤、質(zhì)地、骨斷端移動性等；攝垂直位X線片，檢查新骨礦化情況。攝片機為Sirona牙片機，攝片條件：電壓60kV，曝光時間0.3s。然后將牽引區(qū)及相鄰骨組織置入10%EDTA脫鈣液，經(jīng)2周到3周脫鈣，骨組織已變軟后，常規(guī)脫水、透明、石蠟包埋，行8μm切片，HE染色，光鏡觀察。

2 結(jié)果

2.1 所有動物均順利耐受牽引及固定。截骨術(shù)后動物頜下術(shù)創(chuàng)腫脹觸痛，但引流通暢未發(fā)生窒息。3天到5天后，腫脹消退，未發(fā)生明顯化膿感染。牽引過程中，動物均能耐受牽引，牽引器螺紋旋動正常。由于進(jìn)行了雙側(cè)下頜骨對稱牽引，其上下頜臼齒咬合正常，故動物進(jìn)食始終良好。牽引結(jié)束時動物明顯反合，體重基本恢復(fù)到術(shù)前狀態(tài)。固定期間動物牽引器始終保持穩(wěn)定，未發(fā)生明顯松動。頜下術(shù)創(chuàng)術(shù)后10天拆除縫線，軟組織愈合良好，少數(shù)動物頜下形成血痂，下頜骨質(zhì)未發(fā)生外露。

2.2 新骨標(biāo)本大體檢查：固定8周時，新骨色澤較周圍正常骨質(zhì)紅潤，局部可見截骨線痕跡，新骨表面有新生條束狀皮質(zhì)骨，與牽引方向平行，新骨表面骨孔較為豐富；骨斷端無移動性，新骨質(zhì)地較為堅韌，但沒有周圍正常骨光滑和致密。

2.3 平片放射學(xué)觀察：近牽引區(qū)臼齒牙根向前移位，牙冠向后移位，牽引區(qū)出現(xiàn)明顯阻射，骨斷端界限模糊，與周圍正常骨阻射仍有區(qū)別。

2.4 組織病理學(xué)觀察：新骨內(nèi)有大量與牽引方向平行的骨小梁，骨小梁之間出現(xiàn)聯(lián)合，形成層板樣排列，新生血管豐富，骨小梁周圍有較多成骨細(xì)胞及破骨細(xì)胞，新骨改建活躍。

3 討論

建立成功率高而且穩(wěn)定可重復(fù)的動物模型是開展?fàn)恳晒桥R床研究的基礎(chǔ)。目前用于開展顱面部牽引成骨的動物主要有兔[2]、狗[3]、羊[4]、豬、大鼠[5]等，少量使用恒河猴[6]。牽引成骨動物模型要求盡量來源廣泛，價格適中，能夠成功構(gòu)建所要模擬研究的骨骼、血管、肌肉、神經(jīng)等對象及所在內(nèi)環(huán)境。狗性格兇猛，價格較高，需要一些特殊麻醉，現(xiàn)主要用來研究腭裂、牙槽嵴裂[7]及正畸擴弓；羊價格合適，來源廣泛，是較好的動物來源，可以用來研究顳下頜關(guān)節(jié)、下頜體及升支缺損重建等；豬下頜骨比較接近人體，價格亦較高，應(yīng)用較少，可以用來研究下頜重建；大鼠頜骨較小，但來源廣泛，可以用來研究下頜骨牽張相關(guān)因子表達(dá)等[8]；兔性格溫順，體型適中，來源廣泛，適合研究下頜骨重建及下牙槽神經(jīng)損傷[9]等。本研究中，筆者選擇了兔作為實驗對象，主要用于研究下頜骨再生及對下牙槽神經(jīng)的影響，其經(jīng)濟成本及下頜骨體積均合適，具有良好的性價比。

牽引器是由筆者自行設(shè)計，由浙江省慈溪市慈北口腔器械公司加工的CBX01-15型兔專用牽引器。可牽引距離20mm，牽引器前部固定桿2孔，后部固定桿3孔，前部2孔主要平行固定在頦孔前方下頜體，后部3孔主要固定在頦孔后方較為堅實的下頜體部，并形成穩(wěn)定的三角形平面，螺孔內(nèi)徑2mm，固定效果可靠。筆者認(rèn)為兔下頜骨菲薄的下頜升支及下頜角部不是合適的螺釘固定部位，因此筆者設(shè)計的該CBX01-15型牽引器主要用于兔下頜體前部截骨牽引。

手術(shù)方式上，筆者采取了雙側(cè)頦孔前截骨術(shù)式，主要是考慮了在兔較小的下頜骨上進(jìn)行較大距離牽引時動物的耐受性，即如何保證動物正常進(jìn)食，并能夠長期存活。兔下頜頦孔前部為門齒及其牙根，而頦孔后部為臼齒，保證動物上下后部臼齒的正常咀嚼是保證動物存活的關(guān)鍵。筆者曾經(jīng)進(jìn)行過兔單側(cè)頦孔前截骨牽引，根據(jù)筆者的經(jīng)驗[10]，一般牽引距離在10mm以內(nèi)，兔由于臼齒代償性移位，仍可以正常進(jìn)食，但距離較大時，如牽引達(dá)15mm時，則出現(xiàn)失代償，雙側(cè)上下臼齒咬合障礙，顳下頜關(guān)節(jié)紊亂，進(jìn)食受限，動物出現(xiàn)消瘦，死亡率較高。在具體截骨方式上，筆者主要采用分離下頜骨頰側(cè)骨膜，截開頰側(cè)皮質(zhì)骨及上下緣少許舌側(cè)皮質(zhì)骨，并折斷下頜骨的方法，這樣可以保留舌側(cè)骨膜血運，有利于骨折的早期抗感染及成骨細(xì)胞再生。關(guān)創(chuàng)縫合骨膜及肌層后，在縫合皮膚時，可以將前部固定桿前部皮膚向后部固定桿拉攏10mm后縫合，這樣在前后固定桿之間有一段較為松弛的皮膚，可以在延遲5天開始牽引時，避免前后固定桿之間較大張力影響皮膚愈合，保證了術(shù)創(chuàng)軟組織的完整性。

筆者通過雙側(cè)下頜骨截骨牽引，成功較大幅度地延長了兔較小的下頜骨，并保證了家兔牽引及固定期間雙側(cè)上下臼齒的咬合關(guān)系，保證了動物的存活。牽引后，兔上下門齒出現(xiàn)反合，作為嚙齒類動物的兔，其牙齒生長很快，需要每周進(jìn)行一次調(diào)磨，截除過長的門牙，避免出現(xiàn)咬合干擾及口腔內(nèi)軟組織創(chuàng)傷性潰瘍，保證動物的正常進(jìn)食。

最后，筆者認(rèn)為，應(yīng)用CBX01-15型下頜骨專用牽引器，在兔雙側(cè)頦孔前截骨，建立雙側(cè)下頜骨牽引成骨動物模型，可以獲得良好的骨再生，牽引器穩(wěn)定可靠，動物來源廣泛，可以長期生存，整體模型穩(wěn)定性、可重復(fù)性好，性價比高。

[參考文獻(xiàn)]

[1]Ilizarov GA. The tension-stress effect on the genesis and growth of tissues：Part II.The influence of the rate and frequency of distraction [J]. Clin Orthop，1989，239：263-285.

[2]黎德平，胡純兵，何小川，等.電穿孔介導(dǎo)的基因治療對下頜骨牽引新骨生成影響的組織形態(tài)計量學(xué)研究[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2010，19（11）：1632-1635.

[3]常世民，柳春明，姚玉勝. 內(nèi)置式牽引器經(jīng)腭橫縫牽引成骨對上頜骨及腭骨形態(tài)的研究[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2011，20（3）：387-390.

[4]李艷，施澤宏，尹寧北，等.上頜骨內(nèi)置式持續(xù)等張縫牽引成骨機制的實驗研究[J].中國美容醫(yī)學(xué)， 2010，19（6）：852-856.

[5]吳鏑，王新剛，趙振民.大鼠顱骨矢狀縫牽引成骨的體外研究[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2008，17（7）：1015-1018.

[6]王曉霞，王興，李自力，等.下頜骨牽引成骨術(shù)對下牙槽神經(jīng)功能影響的實驗研究[J].中華口腔醫(yī)學(xué)雜志，2002，37（1）：50-53.

[7]丁宇翔，劉彥普，敖建華. 牽張成骨關(guān)閉牙槽突裂的實驗研究及組織學(xué)觀察[J].中國美容醫(yī)學(xué)，2005，14（2）：161-163.

[8]祝為橋，王興，王曉霞，等.大鼠下頜骨牽引成骨過程中骨改建機制的探討[J].中華口腔醫(yī)學(xué)雜志，2007，42（12）：729-732.

[9]李剛，宋曉萌，高興亞，等.變速牽引成骨對兔下牙槽神經(jīng)的影響[J].口腔醫(yī)學(xué)，2005，25（2）：93-95.

[10]李剛，吳煜農(nóng)，宋曉萌，等.變速牽引提高牽引成骨效率的實驗研究[J].口腔頜面外科雜志，2006，16（1）：16-18.

[收稿日期]2013-04-13 [修回日期]2013-05-28

編輯/張惠娟