摘 要:對血細胞的制備保存和稀釋以及操作方法進行改進。
關(guān)鍵詞:制備細胞膜;操作方法;實驗改進
“體驗制備細胞膜的方法”是人教版高中生物必修1第3章第1節(jié)實驗內(nèi)容。通過實驗,學生能夠直觀地觀察到細胞吸水漲破的過程,體驗提取細胞膜的簡單方法,認識細胞膜作為系統(tǒng)邊界的重要意義,同時為第4章“細胞的物質(zhì)輸入和輸出”的學習奠定基礎(chǔ)。由于學生分組實驗需要較多血細胞,在操作過程中滴加蒸餾水后,細胞在很短的時間內(nèi)就會漲破消失,對于教師課前準備和學生實驗操作要求都很高。為使實驗順利完成,對本實驗進行了一些改進。
一、制備血細胞
1.羊血的采集
根據(jù)當?shù)貙嶋H,采取羊血。采血前要配制抗凝劑檸檬酸鈉溶液,按質(zhì)量分數(shù)為0.1 g/ml檸檬酸鈉溶液100 ml配比鮮血大約200 ml的比例。預(yù)計采取4升羊血,需帶抗凝劑2升左右。實驗前一天帶著抗凝劑、塑料桶和攪拌棒去本地屠宰場接血。
2.血細胞的提取
用離心機做血沉,挖取血細胞。將血液倒入離心管里,用2000 r/min的轉(zhuǎn)速,離心2 min,使血細胞沉淀于離心管底部,倒去上部的澄清液,用藥勺將沉淀的血細胞挖出,放在大燒杯中冷藏保存?zhèn)溆谩?/p>
3.血細胞液的稀釋
取儲備的5 ml羊血細胞,加100 mL 0.9%生理鹽水,對血細胞進行稀釋。供學生分組實驗時使用,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二、操作方法的改進
實驗指導介紹的方法步驟,對于缺少實驗操作經(jīng)驗的學生而言,很難把握分寸。滴加蒸餾水需要憑借經(jīng)驗來操作,細胞才不容易流走。但是,學生沒有接觸過此類實驗,再加之課堂時間有限,往往會因為蒸餾水滴加太多,細胞很快漲破沒有觀察到實驗現(xiàn)象,或者不會正確地使用吸水紙,致使細胞全部被吸走,同樣觀察不到實驗現(xiàn)象。改進的方法步驟如下:
1.用蒸餾水直接制片
在載玻片上滴1滴蒸餾水,再滴加1滴血細胞稀釋液,用滴管尖嘴混合,蓋上蓋玻片,再用吸水紙吸去多余的血液,制成臨時裝片。
2.用顯微鏡馬上觀察
先用低倍鏡,后用高倍鏡。此時學生可以在顯微鏡下清晰地觀察到細胞吸水膨脹,體積增大,凹陷消失,最后漲破的過程。
經(jīng)過精心細致的課前準備,科學采血,用離心機做血沉提取血細胞,冷藏保存的方法,解決了血細胞連續(xù)多日使用問題,使血細胞液現(xiàn)用現(xiàn)配。應(yīng)用蒸餾水直接制片的方法進行顯微觀察,避開學生操作技術(shù)上的不足,避免了高倍鏡頭弄臟的后果,既學會了制備細胞膜的方法,又培養(yǎng)了學生的探究能力。
參考文獻:
謝微微.“體驗制備細胞膜的方法”的實驗改進.生物學通報,2010(12):45-52.
(作者單位 吉林省乾安縣第七中學)
編輯 楊兆東