摘要：采用傳統(tǒng)浸提法，以乙醇為溶劑，考察溶劑濃度、提取溫度、料液比、提取時(shí)間和提取次數(shù)對洋槐花總黃酮物質(zhì)提取率的影響，并在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，通過正交試驗(yàn)，確定了洋槐花總黃酮物質(zhì)的提取工藝。結(jié)果表明，乙醇濃度、提取溫度、料液比、提取時(shí)間及提取次數(shù)對洋槐花總黃酮物質(zhì)的提取率均有影響，優(yōu)化的洋槐花總黃酮物質(zhì)的提取工藝為：料液比1：25，乙醇濃度70%，提取溫度60℃，提取時(shí)間90min，提取次數(shù)為三次。

關(guān)鍵詞：洋槐花 乙醇 總黃酮物質(zhì) 提取率

中圖分類號：TS201 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-5336（2013）18-0007-03

洋槐又名刺槐，在我國分布極廣，且生長迅速，資源極為豐富[1]。洋槐花（Sophora Japonica. L），性清涼，具有清熱解毒、舒張血管、改善血液循環(huán)、防止血管硬化、降低血壓等作用，屬于藥食兩用花卉。洋槐花營養(yǎng)豐富，含有豐富的維生素、蛋白質(zhì)、氨基酸、糖分和動物生長所必需的多種微量元素[1]，據(jù)測定每l00g鮮洋槐花中，含蛋白質(zhì)3.1g，脂肪0.7g，碳水化合物15g，粗纖維2.2g，灰分1.2g，鈣83mg，磷69mg，鐵36mg，胡蘿卜素0.04mg，核黃素0.18mg，尼克酸6.6mg，維生素C30mg，含熱量330kJ[2]。此外，還含有豐富的黃酮類化合物[3]。黃酮類化合物廣泛存在于許多植物中，具有多樣生物活性，尤其在治療心血管疾病方面有強(qiáng)心、抗心肌缺血、擴(kuò)張血管、降壓、抗心律失常、降血脂、抗動脈粥樣硬化等多種作用，能有效抑制血小板聚集和防治血栓形成。

目前，從植物中提取黃酮類化合物已成為國內(nèi)外研究的的熱門課題。本文采用乙醇溶液提取洋槐花中的黃酮，從多個(gè)因素方面確定從洋槐花中提取總黃酮物質(zhì)的最佳工藝。

1 材料和方法

1.1 材料和試劑

1.1.1 原料

洋槐花：采摘于山西襄汾張槐村

1.1.2 化學(xué)試劑

無水乙醇、蘆丁、硝酸鋁、六偏磷酸鈉、亞硝酸鈉、氫氧化鈉、蒸餾水

1.2 試驗(yàn)儀器與設(shè)備（見圖1）

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 原料的預(yù)處理

洋槐花經(jīng)精選，除雜，清洗，干燥，粉碎過60目篩后放入干燥器內(nèi)備用。

1.3.2 總黃酮物質(zhì)的測定原理

利用蘆丁與Al生成黃色絡(luò)合物，然后在最大波長下建立吸光度與濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，由此可計(jì)算樣品中總黃酮物質(zhì)的含量[4]。

1.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立

采用NaNO2-Al（NO）3-NaOH光度法測定黃酮含量。精密稱取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品10mg，置50ml容量瓶中，加70%的乙醇溶解并稀釋到刻度，配制成質(zhì)量濃度為0.2mg/ml的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液。精取配制好的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液0.0、0.2、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0ml分別裝入10ml容量瓶中，加5% 亞硝酸鈉0.4ml，放置6min后加入10%硝酸鋁溶0.4ml，放置6min，再加入4%的氫氧化鈉溶液4ml，加水至刻度，搖勻，放置15min后在波長505nm處進(jìn)行比色測定，將測定結(jié)果吸光度y與蘆丁濃度x做線性回歸，得方程為y =8.6551x+0.0111，R2=0.9983。

1.4 洋槐花中總黃酮物質(zhì)的提取工藝流程

洋槐花→除雜→清洗→干燥→粉碎→浸提→過濾→合并濾液→測吸光度→得總黃酮物質(zhì)的提取率

1.5 總黃酮的提取工藝的研究

1.5.1 單因素影響試驗(yàn)

分別研究了乙醇濃度、提取溫度、提取時(shí)間、料液比、提取次數(shù)對總黃酮物質(zhì)提取率的影響。

1.5.2 正交試驗(yàn)法選取最佳工藝

選擇較顯著的4個(gè)因素設(shè)計(jì)3水平，做L9（3）4正交試驗(yàn)[12]，以得到總黃酮物質(zhì)提取的最佳工藝條件，試驗(yàn)指標(biāo)為總黃酮物質(zhì)的提取率。

2 結(jié)果與討論

2.1 單因素影響試驗(yàn)

經(jīng)單因素試驗(yàn)結(jié)果表明：提取洋槐花中總黃酮類物質(zhì)的最佳乙醇濃度為60%，最佳提取溫度選擇60℃，最佳料液比為1：25，最佳提取時(shí)間選擇80min，最合理的提到次數(shù)為3次

2.2 正交試驗(yàn)法選取最佳工藝

在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，選擇對乙醇濃度（A）、溫度（B）、料液比（C）、提取時(shí)間（D）進(jìn)行正交優(yōu)化試驗(yàn)，以得到從洋槐花中提取總黃酮物質(zhì)的最佳工藝條件。因素水平表見表1，正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及試驗(yàn)結(jié)果見表2、表3。

2.3 結(jié)果分析

由表2極差分析可看出，影響洋槐花中總黃酮物質(zhì)提取因素作用的主次順序?yàn)锽>A>C>D，即料液比>乙醇濃度>提取溫度>提取時(shí)間。經(jīng)方差分析可知，料液比具有顯著性，乙醇濃度和提取溫度具有顯著性，提取時(shí)間具有不顯著性?？纱_定各因素的最優(yōu)水平為B2A3C2D3，即在料液比1：25，乙醇濃度70%，提取溫度60℃，提取時(shí)間90min，此條件下總黃酮物質(zhì)提取率為2.677%。

2.4 討論

在正交試驗(yàn)中，所篩選的最佳乙醇濃度（70%）與單因素試驗(yàn)中所得最佳乙醇濃度（60%）有一定差異。根據(jù)乙醇濃度對總黃酮物質(zhì)提取的影響，分析認(rèn)為，總黃酮物質(zhì)在70%時(shí)溶解更完全，因此，以乙醇濃度為70%為宜。

3 結(jié)語

（1）在洋槐花提取總黃酮物質(zhì)過程中，料液比、乙醇濃度、提取溫度對總黃酮物質(zhì)的提取都有明顯的影響。

（2）采用乙醇提取洋槐花中總黃酮物質(zhì)的最佳工藝參數(shù)為料液比1：25，乙醇濃度70%，提取溫度60℃，提取時(shí)間90min，在此條件下驗(yàn)證后，果膠得率為2.677%。

參考文獻(xiàn)

[1]范文秀，張玉泉，王澤云，秦新超.洋槐葉和槐花中營養(yǎng)成分分析的研究[J].廣東微量元素科學(xué)， 2004，11（11）：51-52.

[2]董文明，吳榮書，袁唯.花卉飲料工業(yè)的開發(fā)[J].食品工業(yè)2005，（2）：4.

[3]李敏晶，游景艷，劉忠英，張寒琦.微波萃取槐花中黃酮類化合物[J].廣西師范大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，21（02）：103.

[4]田龍.均勻設(shè)計(jì)優(yōu)化槐花中黃酮類物質(zhì)的水浸提工藝[J].東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2007，10（35）：37.

[5]趙國建，劉興華，李桂峰，董周永.螯合劑輔助乙醇提取石榴籽黃酮工藝[J].食品科學(xué)，2009，（22）：177.