【摘要】 目的：通過腹腔注射阿霉素誘導(dǎo)制備擴張型心肌病（dilated cardiomyopathy，DCM）大鼠模型，探討其心功能的變化。方法：選取體質(zhì)量為240～290 g的8周齡、SPF級近交系雄性SD大鼠85只，分為2組：DCM組（n=65）、正常對照組（n=20）。DCM組采用腹腔注射阿霉素的方法構(gòu)建DCM模型；正常對照組則注射等容積的生理鹽水。給藥第10周對兩組大鼠行心臟超聲檢查，觀察左室舒張末期內(nèi)徑、左室收縮末期內(nèi)徑、左室射血分數(shù)、左室短軸縮短率。結(jié)果：心臟超聲檢查顯示DCM組大鼠心腔擴大，室壁活動度彌漫性減弱，左室舒張末期內(nèi)徑、左室收縮末期內(nèi)徑顯著大于正常對照組（P<0.05），而左室射血分數(shù)、左室短軸縮短率顯著低于正常對照組（P<0.05）。結(jié)論：腹腔注射阿霉素誘導(dǎo)DCM大鼠心功能下降。

【關(guān)鍵詞】 擴張型心肌??； 心功能； 阿霉素

近年來，DCM發(fā)病率呈逐步上升趨勢，嚴重危害人類健康。國外報道DCM患病率為8.32～36.5/10萬人，年死亡率為3.27/10萬人，而我國DCM患病率高達84.0/10萬人，發(fā)病率為1.3/10萬人[1]。DCM以左室、右室或雙室腔擴大為特征，被認為是心臟移植最常見的原因（年齡大于1歲）及兒童心力衰竭的第三大病因[2]。一旦患者發(fā)生心力衰竭，其心功能呈進行性惡化。本研究通過腹腔注射阿霉素誘導(dǎo)制備DCM大鼠模型，探討其心功能的變化。

1 材料與方法

1.1 實驗材料 體質(zhì)量為240～290 g的8周齡SPF級近交系雄性SD大鼠85只，購于大連醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心。分為DCM組65例、正常對照組20例，置于同等條件下飼養(yǎng)。

1.2 實驗試劑與儀器 阿霉素（浙江海正藥業(yè)股份有限公司）；生理鹽水（青島華仁藥業(yè)股份有限公司）；HD11XE型彩色超聲診斷儀（PHILIPS，USA）。

1.3 DCM動物模型的建立 DCM組予腹腔注射阿霉素，每次2.5 mg/kg，1次/周，共6周，使阿霉素累積劑量達到15 mg/kg。正常對照組以等容積的生理鹽水代替阿霉素進行腹腔注射。

1.4 心臟超聲檢查 給藥第10周對兩組大鼠進行心臟超聲檢查，了解心功能狀況。檢查前30 min予腹腔注射氯胺酮麻醉，劑量為100 mg/kg，用8%硫化鈉溶液脫去大鼠左胸前皮毛。仰臥位固定大鼠，取胸骨旁左室長軸切面平乳頭肌水平，在二維影像指導(dǎo)下用M型超聲測量左室舒張末期內(nèi)徑（left ventricular end-diastolic diameter，LVEDD）、左室收縮末期內(nèi)徑（left ventricular end-systolic diameter，LVESD），取平均值，計算左室射血分數(shù)（left ventricular ejection fraction，LVEF）、左室短軸縮短率（left ventricular fractional shortening，LVFS）。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用SPSS 17.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料以（x±s）表示，比較采用t檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 生存情況 至給藥第10周，正常對照組20只大鼠全部存活；DCM組65只大鼠共死亡17只，生存率為73.8%。見表1。

2.2 心臟超聲檢查結(jié)果 給藥前兩組大鼠心臟超聲各項指標比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表2。給藥第10周，DCM組大鼠心腔擴大，室壁活動度彌漫性減弱，LVEDD、LVESD顯著大于正常對照組（P<0.05），而LVEF、LVFS顯著低于正常對照組（P<0.05），見表3。

3 討論

在本實驗中，筆者采用經(jīng)典的腹腔注射阿霉素的方法進行DCM動物模型的構(gòu)建[3]。國外有研究表明，用阿霉素誘導(dǎo)制備的DCM模型無論是超聲心動圖改變還是組織病理學(xué)變化都與人類臨床DCM相符[4]。阿霉素是一種蒽環(huán)類廣譜抗腫瘤抗生素，它對心臟的慢性毒性作用主要表現(xiàn)為心肌細胞形態(tài)學(xué)與心功能的改變，包括心肌纖維消失、心肌細胞胞質(zhì)空泡化、細胞核變性、心律失常、心功能不全如左心室收縮及舒張功能下降、右心室功能障礙等，嚴重者可發(fā)生充血性心力衰竭[5]。并伴有左室、右室或雙室心腔的繼發(fā)性擴大，與臨床上DCM合并心力衰竭相類似[6]。阿霉素的心肌毒性與其引起氧自由基損傷和肌質(zhì)網(wǎng)攝Ca2+功能障礙有關(guān)[7-8]。且阿霉素與心磷脂具有高親和力，可通過與心磷脂結(jié)合，或與線粒體DNA相互作用，進入線粒體從而抑制呼吸鏈。研究顯示，阿霉素注射結(jié)束后，線粒體DNA與呼吸鏈受損仍會持續(xù)存在，進而引起延遲性心肌病[9]。

阿霉素對心臟的慢性毒性作用與用藥的累積劑量相關(guān)。研究表明，當阿霉素的累積劑量為50 mg/m2時，左心室已出現(xiàn)了收縮及舒張功能不全，而當其累積劑量達到300 mg/m2時，左心室功能不全的發(fā)生率可達16%～60%[10]。隨著阿霉素劑量的增大，作用時間的延長，心肌細胞的損傷程度逐漸加重。因此，若阿霉素劑量太小，則不容易導(dǎo)致DCM，而如果劑量過大，則可能由于藥物的嚴重毒副作用而造成實驗動物死亡率過高。有學(xué)者采用阿霉素短期大劑量腹腔注射的方法，成功建立DCM模型[11]，但死亡率高，且發(fā)病急，與臨床上DCM的慢性發(fā)展過程不相符合。因此，本實驗通過分次小劑量（每次2.5 mg/kg，1次/周，共6周）腹腔注射阿霉素，使其累積劑量達到15 mg/kg[12]。

DCM以左室、右室或雙室腔擴大為特征，主要表現(xiàn)為心肌收縮期泵功能衰竭。本研究顯示，DCM組大鼠LVEDD、LVESD顯著大于正常對照組（P<0.05），而LVEF、LVFS明顯低于正常對照組（P<0.05）。以上數(shù)據(jù)提示，DCM組大鼠心腔明顯擴大，室壁活動度彌漫性減弱，心臟收縮功能明顯受損，符合臨床DCM合并心力衰竭的表現(xiàn)。研究結(jié)果表明，腹腔注射阿霉素誘導(dǎo)DCM大鼠心功能下降。

參考文獻

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（收稿日期：2013-07-22） （本文編輯：蔡元元）