摘要：采用毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定糕點(diǎn)中的富馬酸二甲酯。本實(shí)驗(yàn)采用氯仿作為提取液提取糕點(diǎn)中的富馬酸二甲酯，提取液注入氣相色譜儀經(jīng)毛細(xì)管色譜柱分離用FID檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)。本法的方法檢出限和定量限分別是2.5mg/kg和7. 5mg/kg，線性范圍是50-300μg/mL，r=0.999840，回收率在93.6-102.6%。本法可以很好分離脂肪和富馬酸二甲酯，方法操作簡(jiǎn)單方便，靈敏度高，結(jié)果滿意。

關(guān)鍵詞：糕點(diǎn) 富馬酸二甲酯 氣相色譜

中圖分類號(hào)：0657.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-5336（2013）24-0000-00

富馬酸二甲酯（DMF）屬二元不飽和脂肪酸酯類，因其蒸汽壓較高，它可抑殺常見的黃曲霉、黑曲霉、青霉、交鏈孢霉、串珠鐮刀霉、白地霉、土曲霉和雜曲霉等霉菌。20世紀(jì)80年代開始，富馬酸二甲酯曾經(jīng)作為國內(nèi)外使用的效果好、用量少、使用成本低、應(yīng)用范圍廣的無毒的防腐、防霉、防蟲及保鮮劑，廣泛應(yīng)用于食品、飼料、皮革、糧食、紡織品、化妝品的防腐、防霉、防蟲及公共場(chǎng)所和家庭中的空氣抑殺菌凈化作用。

然而，在使用過程中發(fā)現(xiàn)富馬酸二甲酯會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生一些傷害，因?yàn)?DMF可以通過皮膚接觸、呼吸系統(tǒng)和消化系統(tǒng)進(jìn)入人體，對(duì)人體健康造成危害。DMF的皮膚接觸能夠引起難于治療的接觸性皮炎，而通過消化道和呼吸道進(jìn)入體內(nèi)的DMF水解以后，產(chǎn)生一定含量的甲醇，從而引起毒害。2009年3月17日，歐盟委員會(huì)通過了關(guān)于投放到歐洲市場(chǎng)上的商品中禁止含有富馬酸二甲酯的2009 /251 /EC的指令[1]。該指令要求進(jìn)入歐盟市場(chǎng)的商品中富馬酸二甲酯的最高含量不得超過0.1mg/kg。針對(duì)這種情況，我國現(xiàn)已禁止使用。但是，近來仍發(fā)現(xiàn)一些不妨商販在繼續(xù)使用。

通過查閱相關(guān)文獻(xiàn)[2][3][4][5]，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有條件，得到以下關(guān)于糕點(diǎn)中富馬酸二甲酯的氣相色譜檢測(cè)方法。本方法利用脂肪易溶于氯仿但是不容易透過0.45μm濾膜而DMF可以順利通過過0.45μm濾膜這一性質(zhì)[6]，用于提取糕點(diǎn)中的DMF，再用過0.45μm濾膜去除樣品中的脂肪和蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)，然后將提取液注入氣相色譜儀經(jīng)毛細(xì)管色譜柱分離，F(xiàn)ID檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果比較令人滿意。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1儀器與試劑

氣相色譜儀（附帶離子火焰檢測(cè)器）（6890N，美國Agilent）

振蕩器（HZQ-X300，上海一恒）

PB303-E電子天平：感量0.1mg

富馬酸二甲酯標(biāo)準(zhǔn)品（純度：99.0%，德國）

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent HP-5（30m*0.32mm*0.25μm）；進(jìn)樣口溫度：160℃；檢測(cè)器溫度：200℃；柱溫：40℃（1min），先以20℃/min升至80℃（1min），再以20℃/min升至155℃（3min）；載氣：高純氮；尾吹流速50mL/min；氫氣流速35 mL/min；空氣流速：500 mL/min；進(jìn)樣量：1μL。

1.2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

準(zhǔn)確稱取0.100g富馬酸二甲酯（含量99.0%，德國），用少量氯仿溶解，轉(zhuǎn)移至100mL容量瓶中，用氯仿稀釋至刻度，得 1.0mg/mL的儲(chǔ)備液。再分別吸取該標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液制成濃度分別為50、100、150、200、250、300 μg/mL 的富馬酸二甲酯標(biāo)準(zhǔn)系列。

1.2.3 樣品制備

稱取10g左右粉碎樣品，置于250mL具塞三角瓶中，加入30mL氯仿，在振蕩器上振搖30min，用定性濾紙過濾，濾液在40℃揮發(fā)至5-6mL左右，過0.45μm濾膜，最后定容至10mL，備用。

1.2.4測(cè)定

取標(biāo)準(zhǔn)系列和樣品溶液各1.0μL，按上述色譜條件分析，以外標(biāo)峰高法計(jì)算糕點(diǎn)中富馬酸二甲酯的含量。

1.2.5計(jì)算公式

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件的選擇

通過實(shí)驗(yàn)，我們發(fā)現(xiàn)選用Agilent HP-5柱時(shí)，富馬酸二甲酯分離效果很好，峰形尖銳，無拖尾現(xiàn)象，標(biāo)準(zhǔn)品圖譜見圖1，同時(shí)對(duì)柱溫條件和升溫程序進(jìn)行了篩選，最終確定了初始柱溫40℃（保持1min），先以20℃/min升至80℃（保持1min），再以20℃/min升至155℃（保持3min）的條件下，出峰時(shí)間是8.911min，與其他人研究相比[2][7]，可以獲得較好的峰形，延長(zhǎng)出峰時(shí)間目的也是為了讓一些低沸點(diǎn)的萃取物先出來，減少對(duì)DMF的干擾。同時(shí)，每次選用260℃高溫吹出柱內(nèi)殘留雜質(zhì)，用以防止氯仿共萃取的高沸點(diǎn)物質(zhì)污染色譜系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)表明，高沸點(diǎn)的脂肪沒有對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾。

2.2 樣品前處理

富馬酸二甲酯易溶于乙醇，丙酮，氯仿和乙酸乙酯等有機(jī)溶劑中，所以我們選用三氯甲烷、乙酸乙酯、和無水乙醇三種溶劑進(jìn)行提取效果比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，三氯甲烷的提取效果較為理想。另外，還發(fā)現(xiàn)采用兩次溶劑提取的提取效果最好，既節(jié)約時(shí)間，提取也比較完全。同時(shí)也發(fā)現(xiàn)，如果提取液直接上機(jī)的話，會(huì)有很多雜峰出現(xiàn)，這樣不可避免對(duì)色譜柱影響比較大，我們就采用了0.45μm的微孔濾膜過濾，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)過濾前后對(duì)提取效率基本上沒有影響，而且可以有效的去除提取液中的大部分雜峰，這樣對(duì)我們儀器的使用和維護(hù)做出了很大的貢獻(xiàn)。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線和方法檢出限

配制50、100、150、200、250、300 μg/mL 的富馬酸二甲酯標(biāo)準(zhǔn)溶液。按照上述的色譜條件進(jìn)行上機(jī)檢測(cè)，以峰高為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為Y=0.13155148 -0.1175849，相關(guān)系數(shù)r=0.99984，標(biāo)準(zhǔn)曲線見圖2。我們應(yīng)用IUPAC推薦的方法計(jì)算方法檢出限，測(cè)定結(jié)果以峰高表示，帶入到公式LOD=3S/b，其中LOD為方法檢出限，S為50μg/mL濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰高標(biāo)準(zhǔn)差，b為回歸方程的斜率。 最后得出樣品為10.0g，提取液體積為10.0mL時(shí)，方法的最低檢出限為2.5mg/kg。

2.4 精密度和回收率實(shí)驗(yàn)

稱取不含富馬酸二甲酯的空白樣品10.0g進(jìn)行兩個(gè)水平添加回收實(shí)驗(yàn)，分別為50和300μg/mL，每個(gè)水平取6個(gè)平行樣做精密度實(shí)驗(yàn)，方法的回收率和精密度數(shù)據(jù)見2.5監(jiān)測(cè)樣品中富馬酸二甲酯含量的測(cè)定

在某地三個(gè)不同區(qū)縣總共采集50種不同商標(biāo)的糕點(diǎn)類樣品進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)后發(fā)現(xiàn)含有富馬酸二甲酯的樣品12個(gè)，其余均未檢出富馬酸二甲酯，檢出樣品中含量基本上都非常低。富馬酸二甲酯在食品中屬于違禁添加物質(zhì)，經(jīng)過考慮分析，我們認(rèn)為，大部分樣品中微量的富馬酸二甲酯可能是源于生產(chǎn)過程中的污染或者是產(chǎn)品包裝。

3 結(jié)語

結(jié)果表明，該方法樣品前處理簡(jiǎn)單，在所選擇的色譜條件下測(cè)定富馬酸二甲酯的含量準(zhǔn)確，回收率高，精密度好，可用于糕點(diǎn)類食品中富馬酸二甲酯含量的測(cè)定，以便于更好的監(jiān)測(cè)糕點(diǎn)類食品中富馬酸二甲酯的含量。

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