摘要：隨著我國食品工業(yè)的快速發(fā)展，食品中防腐劑與甜味劑混用的問題愈加突出，甜味劑、防腐劑超標的問題也時有發(fā)生，嚴重危害著人群的身體健康?；诖?，采用新方法，加強對食品中防腐劑、甜味劑等的檢測，加強食品的質(zhì)量監(jiān)督，對于確保食品質(zhì)量，促進我國食品工業(yè)持續(xù)發(fā)展意義重大。本文以反相高效液相色譜法為主要手段，針對食品中的苯甲酸與阿斯巴甜等防腐劑與甜味劑，運用梯度洗脫的方式對多種食品添加劑進行同時測定，分析其回收率與結果檢出限，并闡述了防腐劑的主要危害。

關鍵詞：梯度洗脫 液相色譜 防腐劑

中圖分類號：TS264.9 文獻標識碼：A 文章編號：1672-5336（2013）22-0008-02

1 實驗材料以及方法

1.1 實驗材料

（1）實驗儀器；在對食品中防腐劑、甜味劑等食品添加劑多組分同時檢測的實驗過程中，主要運用的實驗儀器包括：LG10-2.4A高速離心機（利用高速運轉產(chǎn)生的離心力加速分離不同物料）、LC-20A高效液相色譜儀（將多組分的樣品溶液經(jīng)過重復多次的吸附-解吸分配，分離成單組份）。

（2）實驗試劑；在該實驗中，主要運用的化學試劑主要包括：色譜分析標準試劑：色譜純，如甲醇以及乙腈等、純度與主成分含量高的乙醇（優(yōu)級純）、干擾雜質(zhì)低，純度較高的乙醚（分析純）、山梨酸與苯甲酸標準溶液（1.0mg/mL）以及純度均超過98%的阿斯巴甜、糖精鈉、安賽蜜等。

1.2 實驗方法

（1）樣品前處理；首先，調(diào)味品，如醋、醬油等樣品前處理時，在離心管（50mL）中放入樣品（10g），之后再將1mL的鹽酸溶液加入到裝有樣品的離心管之中對樣品實施酸化與混合處理，確保離心管內(nèi)的鹽酸溶液與樣品混勻之后，再運用乙醚（10mL）對混合溶液進行提取，提取次數(shù)為2次，在每一次的提取過程中，都應輕輕振搖離心管，離心參數(shù)為：4000r/min，離心時間為1分鐘。提取完成后對乙醚層實施合并處理，并利用乙醚在容量瓶（25mL）中定容，并將其混合均勻。之后在試管（5mL）中滴入乙醚提取液，滴入的提取液的量應準確控制為1mL，再將裝有乙醚提取液的試管置于溫度為40℃的水浴中將其揮干，并以流動相為主要材料，將其定容至刻度，再對其進行過濾操作，即運用水系濾膜（0.45um）進行過濾處理，以備使用。其次，對于含乳飲料或者是植物蛋白而言，在樣品前處理中，同樣在離心管（50mL）中加入樣品，并準確控制在10g，之后將乙醇（10mL）加入至裝有樣品的離心管之中，將其混合均勻，且離心參數(shù)為：4000r/min，離心時間長達5分鐘。之后，再在容量瓶（25mL）中濾入上清液，并對其實施定容至刻度操作，定容時以水為主要材料進行。同時選用乙醇（5mL）進行洗滌、沉淀，在完成離心操作之后，將其與上清液進行合并，在進行定容操作，最后在實施過濾處理，過濾使選用有機濾膜進行，以備使用。此外，對于基質(zhì)相對比較簡單的飲料而言，例如果汁或者是碳酸飲料等，在樣品的前處理過程中，首先應對樣品實施脫氣處理，處理時，可運用超聲脫氣的方法進行，脫氣處理之后，可運用適量的水對其進行稀釋處理，或者實施直接進樣操作，之后，同樣選用水系濾膜為主要的過濾設備進行過濾操作，以待備用。

（2）色譜簡析；在本實驗操作中，運用反相高效液相色譜法進行色譜分析，設備型號：LC-20A，運用的色譜柱為DiamonsilC18液相色譜柱，色譜柱溫度為30℃，215nm為其檢測波長。流動相a與流動相b分別比例為0.015%的C2HF3O2溶液以及比例為10%的甲醇-乙腈，在進行梯度洗脫中，每分鐘梯度洗脫的流量都為1mL，流速為：0.7mL/min，進樣量為20uL。

2 實驗過程與結果分析

2.1 色譜條件以及檢測波長

（1）明確色譜條件；在本實驗中，主要針對食品中的防腐劑與甜味劑，如山梨酸、苯甲酸、阿斯巴甜等化合物的性質(zhì)，在實驗中進行流動相選擇與確定時，選用酸性流動相。且在檢測過程中，對防腐劑、甜味劑等多組分同時檢測過程中，為充分改善在檢測過程中出現(xiàn)的色譜峰脫尾問題，決定在選用的酸性流動相中混合C2HF3O2溶液，并以此促進分離度的增大。在流動相中加入C2HF3O2溶液時，還應合理控制C2HF3O2的濃度。在確定其濃度過程中，可分別選擇幾種不同濃度值，如0.015%、0.05%以及0.1%等3種濃度的C2HF3O2與流動相進行混合配比，分析山梨酸、苯甲酸、阿斯巴甜等幾種化合物的出峰情況，展開C2HF3O2對化合物分離的影響分析實驗，經(jīng)實驗分析發(fā)現(xiàn)，當C2HF3O2的含量確定不變的情況下，單一的流動相比例與化合物的分離并無聯(lián)系，基于此，在化合物的分離中，若采用等度洗脫的方式，無法實現(xiàn)化合物的高效分離。因而本實驗中采取梯度洗脫的方式，確定C2HF3O2的濃度為0.015%，對山梨酸、苯甲酸、阿斯巴甜等化合物進行分離，獲得了較好的分離效果。此外，在本實驗過程中，還進行了在乙腈、甲醇以及甲醇-乙腈（10%）等三種不同的有機相對化合物分離的影響分析實驗，經(jīng)過實驗分析后，選用甲醇-乙腈（10%）開展梯度洗脫程序。為充分減少分析的時間，在實驗中，主要采取提升有機溶劑比例的方式，確保在半個小時之內(nèi)結束分析全過程。然而在實驗中，測定樣品時，化合物中的某些組分難免與部分雜質(zhì)產(chǎn)生小部分的交叉重疊，雖然通過提升溶劑比例的方式使分析時間大幅削減，但色譜峰分離的效果卻不能保證會比不提升有機溶劑比例情況下的效果更好。

（2）確定檢測波長；為確保防腐劑、甜味劑等添加劑的多組分能夠同時檢測，而且食品中苯甲酸、安賽蜜等防腐劑與甜味劑的添加量相對較大，在檢測過程中，若選擇檢測的波長較長，就可能會影響檢測的精度，產(chǎn)生相對較大的檢測誤差，基于此，在進行實驗的過程中，選擇的215nm為檢測波長。

2.2 實驗結果分析

（1）回收率與精密度。在實驗過程中，若在色譜分離情況最好的情況下，防腐劑、甜味劑各種組分的線性范圍在0.90-0.99之間，對不同指標項目展開不同濃度下的回收加標實驗，最終獲得苯甲酸、阿斯巴甜、山梨酸以及安賽蜜等的回收率，見表1。

（2）檢出限?？紤]在10倍的信噪比的情況，并在色譜條件最佳的情況下，測定標準曲線，并對各樣品的回歸方程以及檢出限等進行推算，其結果可見表2。

從表2中可知，各樣品檢出限檢測結果均低于國家規(guī)定要求，運用此種方法對市場中的含乳飲料以及碳酸飲料（15種）等中的防腐劑、甜味劑進行同時檢測，經(jīng)檢測，一次性檢測出的苯甲酸、阿斯巴甜、山梨酸以及安賽蜜等幾種添加劑中含3種的有6個，含2種的有4個，含1種的有5個。

3 結語

食品中的防腐劑、甜味劑等添加劑是一把雙刃劍，尤其是防腐劑，如山梨酸鉀等，既能夠對霉菌起到很好的抑制作用，同時還能夠防止食品中有害生物，如沙門氏菌等繁殖與生長，但也會對人們的健康造成一定的威脅，如人們常食用的味精、花生醬等調(diào)味品等，其中含有谷氨酸鈉、甘氨酸等，長期食用不但會引起結石病、造成人們的聽力下降，記憶力減退等癥狀，危害著人體的健康。因此，運用有效的方法，加強食品中防腐劑等的檢測，加強食品的質(zhì)量監(jiān)督尤為重要。本文運用反相高效液相色譜法，對4種防腐劑、甜味劑等流動相組成進行梯度洗脫實驗，經(jīng)檢測，其檢測效果良好，且與食品衛(wèi)生理化要求相符合，運用此種方法進行防腐劑等多組分同時檢測，檢測效率高且檢測效果良好，在食品質(zhì)量檢測中，可結合實際情況，推廣應用。

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