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        新生兒臍帶血CD4+CD25high調(diào)節(jié)性T細(xì)胞Foxp3的表達(dá)探析

        2013-12-31 00:00:00陳芳謝華英付維娜

        【摘要】 目的:對(duì)新生兒臍帶血CD4+CD25high細(xì)胞中調(diào)節(jié)性Treg細(xì)胞的Foxp3表達(dá)進(jìn)行研究。方法:采用密度梯度離心法提取新生兒(A組)臍帶與成年人(B組)外周血液中的單個(gè)細(xì)胞核后,使用流式細(xì)胞儀測(cè)定CD4+CD25high細(xì)胞中的Treg細(xì)胞數(shù)量,并對(duì)細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子(Foxp3)進(jìn)行檢測(cè),并記錄檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果: A組CD3+CD4+細(xì)胞中Treg細(xì)胞所占比例為(3.86±1.63)%,明顯高于B組的(0.87±0.74)%;A組Treg細(xì)胞中表達(dá)Foxp3的比例為(23.21±8.9)%,明顯低于B組的(71.3±11.6)%,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。結(jié)論:雖然新生兒臍帶血中CD4+CD25high的細(xì)胞數(shù)量較高,但新生兒Foxp3細(xì)胞相對(duì)于成年人卻相對(duì)較低,這也進(jìn)一步說(shuō)明新生兒Treg細(xì)胞的Foxp3表達(dá)能力尚未完全發(fā)育并未成熟。

        【關(guān)鍵詞】 新生兒; CD4+CD25high; Treg細(xì)胞; Foxp3

        doi:10.3969/j.issn.1674-4985.2013.14.074

        研究發(fā)現(xiàn),成年人人體外周血液中含有CD4+細(xì)胞,CD4+細(xì)胞中存在著可對(duì)人體免疫進(jìn)行調(diào)節(jié)的Treg細(xì)胞,Treg細(xì)胞對(duì)維持人體內(nèi)部運(yùn)作、提升人體免疫力具有著十分重要的作用[1-2]。且最新研究也發(fā)現(xiàn),F(xiàn)oxp3對(duì)人體Treg細(xì)胞的發(fā)育生長(zhǎng)以及功能的表達(dá)具有十分重要的意義,但目前醫(yī)學(xué)界對(duì)Treg細(xì)胞的發(fā)育與成熟,以及其功能的實(shí)現(xiàn)機(jī)制尚不明確[3-4]。為了進(jìn)一步了解Treg細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育特點(diǎn),筆者對(duì)這一課題進(jìn)行了深入的研究,將新生兒臍帶血與成年人外周血中Treg細(xì)胞的Foxp3表達(dá)進(jìn)行了測(cè)定,現(xiàn)將測(cè)定結(jié)果報(bào)道如下[5-6]。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料 選取本院2011年后接生的30例健康足月新生兒為A組,其中女?huà)?4例,男嬰16例;同時(shí)選取30例健康成年人為B組,年齡20~30歲,分別采集A組臍帶血和B組外周血,所有血液在采集后均在4 h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行測(cè)定。

        1.2 方法 采用密度梯度離心法提取新生兒臍帶與成年人外周血液中的單個(gè)細(xì)胞核后,使用流式細(xì)胞儀測(cè)定CD4+CD25high細(xì)胞中的Treg細(xì)胞數(shù)量,并對(duì)細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子(Foxp3)進(jìn)行檢測(cè),并記錄檢測(cè)結(jié)果。

        1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 本文所有數(shù)據(jù)均采用IBMSPSS 20.0軟件進(jìn)行分析,計(jì)量資料以(x±s)表示,采用t檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[7]。

        2 結(jié)果

        2.1 流式細(xì)胞測(cè)定 A組血液樣本的CD4+Treg細(xì)胞中CD25細(xì)胞陰性與陽(yáng)性的分界十分清晰,在圖1中形成了兩個(gè)明顯區(qū)別的群體,而B(niǎo)組血液樣本中的分界則不清晰,呈現(xiàn)出過(guò)渡狀態(tài)。

        2.2 CD4+CD25highTreg細(xì)胞比例 按照表達(dá)強(qiáng)度的高低,通

        圖1 兩組血液樣本流式細(xì)胞測(cè)定結(jié)果對(duì)比圖

        常將CD25陽(yáng)性細(xì)胞分為CD25high(高表達(dá))和CD25int(低/中表達(dá))兩種,CD25high為Treg細(xì)胞[8],發(fā)現(xiàn)A組血液樣本中CD4+CD25high細(xì)胞占CD3+CD4+Treg細(xì)胞的比例明顯高于B組,如表1所示。

        3 討論

        通過(guò)上文研究證明:新生兒臍帶血的CD25細(xì)胞陰性與陽(yáng)性的分界十分清晰,而成年人外周血液樣本中則表現(xiàn)為一個(gè)具有連續(xù)性的整體[9]。此外,新生兒臍帶血中CD4+細(xì)胞的CD25high與CD25int的Treg細(xì)胞也存在著十分清晰的分界,且在數(shù)量上明顯高于成年人外周血[10]。因此,雖然新生兒臍帶血中CD4+CD25high的細(xì)胞數(shù)量較高,但新生兒Foxp3細(xì)胞相對(duì)于成年人卻相對(duì)較低,這也進(jìn)一步說(shuō)明新生兒Treg細(xì)胞的Foxp3表達(dá)能力尚未完全發(fā)育并未成熟[11]。而深入的研究如何將新生兒Treg細(xì)胞誘導(dǎo)成熟,對(duì)提高新生兒自身免疫力具有重要的意義,也必將成為進(jìn)一步研究Treg細(xì)胞的主要思路。

        參考文獻(xiàn)

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        [11]陳少華, 李萡, 楊力建.T-bet和Gata-3基因在臍帶血中的表達(dá)特點(diǎn)[J].暨南大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版),2010,31(6):45-46.

        (收稿日期:2012-12-04) (本文編輯:陳丹云)

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