【摘要】 目的：對(duì)新生兒臍帶血CD4+CD25high細(xì)胞中調(diào)節(jié)性Treg細(xì)胞的Foxp3表達(dá)進(jìn)行研究。方法：采用密度梯度離心法提取新生兒（A組）臍帶與成年人（B組）外周血液中的單個(gè)細(xì)胞核后，使用流式細(xì)胞儀測(cè)定CD4+CD25high細(xì)胞中的Treg細(xì)胞數(shù)量，并對(duì)細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子（Foxp3）進(jìn)行檢測(cè)，并記錄檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果： A組CD3+CD4+細(xì)胞中Treg細(xì)胞所占比例為（3.86±1.63）%，明顯高于B組的（0.87±0.74）%；A組Treg細(xì)胞中表達(dá)Foxp3的比例為（23.21±8.9）%，明顯低于B組的（71.3±11.6）%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。結(jié)論：雖然新生兒臍帶血中CD4+CD25high的細(xì)胞數(shù)量較高，但新生兒Foxp3細(xì)胞相對(duì)于成年人卻相對(duì)較低，這也進(jìn)一步說(shuō)明新生兒Treg細(xì)胞的Foxp3表達(dá)能力尚未完全發(fā)育并未成熟。

【關(guān)鍵詞】 新生兒； CD4+CD25high； Treg細(xì)胞； Foxp3

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2013.14.074

研究發(fā)現(xiàn)，成年人人體外周血液中含有CD4+細(xì)胞，CD4+細(xì)胞中存在著可對(duì)人體免疫進(jìn)行調(diào)節(jié)的Treg細(xì)胞，Treg細(xì)胞對(duì)維持人體內(nèi)部運(yùn)作、提升人體免疫力具有著十分重要的作用[1-2]。且最新研究也發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)oxp3對(duì)人體Treg細(xì)胞的發(fā)育生長(zhǎng)以及功能的表達(dá)具有十分重要的意義，但目前醫(yī)學(xué)界對(duì)Treg細(xì)胞的發(fā)育與成熟，以及其功能的實(shí)現(xiàn)機(jī)制尚不明確[3-4]。為了進(jìn)一步了解Treg細(xì)胞的生長(zhǎng)發(fā)育特點(diǎn)，筆者對(duì)這一課題進(jìn)行了深入的研究，將新生兒臍帶血與成年人外周血中Treg細(xì)胞的Foxp3表達(dá)進(jìn)行了測(cè)定，現(xiàn)將測(cè)定結(jié)果報(bào)道如下[5-6]。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2011年后接生的30例健康足月新生兒為A組，其中女?huà)?4例，男嬰16例；同時(shí)選取30例健康成年人為B組，年齡20～30歲，分別采集A組臍帶血和B組外周血，所有血液在采集后均在4 h內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行測(cè)定。

1.2 方法 采用密度梯度離心法提取新生兒臍帶與成年人外周血液中的單個(gè)細(xì)胞核后，使用流式細(xì)胞儀測(cè)定CD4+CD25high細(xì)胞中的Treg細(xì)胞數(shù)量，并對(duì)細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子（Foxp3）進(jìn)行檢測(cè)，并記錄檢測(cè)結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 本文所有數(shù)據(jù)均采用IBMSPSS 20.0軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以（x±s）表示，采用t檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[7]。

2 結(jié)果

2.1 流式細(xì)胞測(cè)定 A組血液樣本的CD4+Treg細(xì)胞中CD25細(xì)胞陰性與陽(yáng)性的分界十分清晰，在圖1中形成了兩個(gè)明顯區(qū)別的群體，而B(niǎo)組血液樣本中的分界則不清晰，呈現(xiàn)出過(guò)渡狀態(tài)。

2.2 CD4+CD25highTreg細(xì)胞比例 按照表達(dá)強(qiáng)度的高低，通

圖1 兩組血液樣本流式細(xì)胞測(cè)定結(jié)果對(duì)比圖

常將CD25陽(yáng)性細(xì)胞分為CD25high（高表達(dá)）和CD25int（低/中表達(dá)）兩種，CD25high為Treg細(xì)胞[8]，發(fā)現(xiàn)A組血液樣本中CD4+CD25high細(xì)胞占CD3+CD4+Treg細(xì)胞的比例明顯高于B組，如表1所示。

3 討論

通過(guò)上文研究證明：新生兒臍帶血的CD25細(xì)胞陰性與陽(yáng)性的分界十分清晰，而成年人外周血液樣本中則表現(xiàn)為一個(gè)具有連續(xù)性的整體[9]。此外，新生兒臍帶血中CD4+細(xì)胞的CD25high與CD25int的Treg細(xì)胞也存在著十分清晰的分界，且在數(shù)量上明顯高于成年人外周血[10]。因此，雖然新生兒臍帶血中CD4+CD25high的細(xì)胞數(shù)量較高，但新生兒Foxp3細(xì)胞相對(duì)于成年人卻相對(duì)較低，這也進(jìn)一步說(shuō)明新生兒Treg細(xì)胞的Foxp3表達(dá)能力尚未完全發(fā)育并未成熟[11]。而深入的研究如何將新生兒Treg細(xì)胞誘導(dǎo)成熟，對(duì)提高新生兒自身免疫力具有重要的意義，也必將成為進(jìn)一步研究Treg細(xì)胞的主要思路。

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（收稿日期：2012-12-04） （本文編輯：陳丹云）