張珣珍

(雅士利國際集團(tuán)有限公司 廣東潮州 515638)

1 引言

維生素是維持機(jī)體生命活動(dòng)過程必不可少的一大類有機(jī)物質(zhì),雖然機(jī)體對(duì)這一類物質(zhì)的需要量相對(duì)較小,但卻十分重要。維生素C,又叫L-抗壞血酸,是一種水溶性維生素,對(duì)治療壞血病、預(yù)防動(dòng)脈硬化等方面有著重要作用。隨著生活水平的不斷提高,人們更懂得了均衡飲食的重要性,不僅每天要攝入相應(yīng)的營養(yǎng)物質(zhì),適當(dāng)?shù)难a(bǔ)充維生素也是必不可少的。本文就配方奶粉中維生素C檢測方法進(jìn)行了探討,以期能為在配方奶粉中更易檢測維生素C而提供參考借鑒。

2 主要儀器與試劑

2.1 儀器

日立F-4600熒光分光光度計(jì),激發(fā)波長350nm,發(fā)射波長430nm,測量方式為標(biāo)準(zhǔn)曲線法;熒光石英比色皿;天平;烘箱;搖床。

2.2 試劑

圖1 維生素C 標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

偏磷酸-乙酸溶液:稱取30g偏磷酸,溶于80mL冰乙酸中,加400mL蒸餾水中,溶解后稀釋至1000mL備用。

酸性活性炭:稱取粉狀活性炭(化學(xué)純,80目～200目)約200g,加入1L體積分?jǐn)?shù)為10%的鹽酸,加熱至沸騰,真空過濾,取下結(jié)塊于一個(gè)大燒杯中,用水清洗至濾液中無鐵離子為止,在110～120℃烘箱(5.3)中干燥約10h后使用。檢驗(yàn)鐵離子的方法:普魯士藍(lán)反應(yīng)。將20g/L亞鐵氰化鉀與體積分?jǐn)?shù)為1%的鹽酸等量混合,將上述洗出濾液滴入,如有鐵離子則產(chǎn)生藍(lán)色沉淀。

乙酸鈉溶液:用水溶解500g三水乙酸鈉,并稀釋至1L。

硼酸-乙酸鈉(30g/L):稱取3.0g硼酸,用乙酸鈉溶液(4.5)溶解并稀釋至100mL,臨用前配制。

鄰苯二胺溶液:稱取40mg鄰苯二胺,用水溶解并稀釋至100mL,臨用前配制。

維生素C標(biāo)準(zhǔn)品:維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/L):稱取0.050g維生素C標(biāo)準(zhǔn)品,用偏磷酸-乙酸溶液溶解并定容至50mL,再準(zhǔn)確吸取10.0mL該溶液用偏磷酸-乙酸溶液稀釋并定容至100mL,臨用前配制。

3 樣品預(yù)處理

3.1 試樣處理

稱取混合均勻的奶粉試樣(市售)約3g(精確至0.0001g),用偏磷酸-乙酸溶液溶解,定容至100mL。

3.2 待測液的制備

表1 精密度實(shí)驗(yàn)

表2 回收率實(shí)驗(yàn)

(1)將上述試樣及維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/L)轉(zhuǎn)至放有約2g酸性活性炭的250mL三角瓶中,劇烈振動(dòng),過濾(棄去約5mL最初濾液),即為試樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的濾液。然后準(zhǔn)確吸取5.0mL試樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的濾液分別置于25mL及50mL放有5.0mL硼酸-乙酸鈉溶液的容量瓶中,靜置30min后,用蒸餾水定容。以此作為試樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的空白溶液。

(2)在此30min內(nèi),再準(zhǔn)確吸取5.0mL試樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的濾液于另外的25mL及50mL放有5.0mL乙酸鈉溶液和約15mL水的容量瓶中,用水稀釋至刻度。以此作為試樣溶液及標(biāo)準(zhǔn)溶液。

(3)試樣待測液:分別準(zhǔn)確吸取2.0mL試樣溶液及試樣的空白溶液于10.0mL試管中,向每支試管中準(zhǔn)確加入5.0mL鄰苯二胺溶液,搖勻,在避光條件下放置60min后待測。

(4)標(biāo)準(zhǔn)系列待測液:準(zhǔn)確吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液0.5、1.0、1.5、2.0mL,分別置于10mL試管中,再用水補(bǔ)充至2.0mL。同時(shí)準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液的空白溶液2.0mL于10mL試管中。向每支試管中準(zhǔn)確加入5.0mL鄰苯二胺溶液,搖勻,在避光條件下放置60min后待測。

4 測定

4.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

將標(biāo)準(zhǔn)系列待測液(6.2.4)立刻移入熒光分光光度計(jì)的石英杯中,于激發(fā)波長350nm,發(fā)射波長430nm條件下測定其熒光值。以標(biāo)準(zhǔn)系列熒光值分別減去標(biāo)準(zhǔn)空白熒光值為縱坐標(biāo),對(duì)應(yīng)的維生素C質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

4.2 試樣待測液的測定

將試樣待測液按的方法分別測其熒光值,試樣溶液熒光值減去試樣空白溶液熒光值后在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得對(duì)應(yīng)的維生素C質(zhì)量濃度。

5 結(jié)果與討論

5.1 線性范圍

采用熒光分光光度計(jì)測定食品中VC標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程Y=457.79X+28.877,相關(guān)系數(shù)為0.9993,標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1所示。

5.2 方法檢出限

用空白標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行20次維生素C熒光值的連續(xù)測定,根據(jù)3倍標(biāo)準(zhǔn)偏差與對(duì)應(yīng)的維生素C工作曲線斜率,求出該方法維生素C的檢出限為0.1mg/100g。

5.3 精密度實(shí)驗(yàn)

分別配制低、中、高3個(gè)質(zhì)量濃度維生素C標(biāo)液,每個(gè)質(zhì)量濃度測定6次,計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,結(jié)果如表1所示。

5.4 回收率實(shí)驗(yàn)

應(yīng)用本方法對(duì)配方奶粉進(jìn)行不同水平平行2次加標(biāo)回收檢測,結(jié)果如表2所示。

6 結(jié)語

綜上所述,維生素C在人體的代謝過程中起著重要的作用。人體中缺乏時(shí)會(huì)引起多種疾病,如壞血病等。因此,維生素C對(duì)嬰兒快速發(fā)育的各種組織和器官具有十分重要的作用,它作為新型營養(yǎng)強(qiáng)化劑廣泛添加于嬰幼兒配方奶粉中,來補(bǔ)充母乳的不足。本文就配方奶粉中維生素C檢測方法進(jìn)行了探討,希望文中所用的檢測方法能得到廣泛的普及應(yīng)用。

[1]吳軼,孫凱峰,袁波,陳欣欽.配方奶粉中維生素B_1的檢測方法研究[J].現(xiàn)代食品科技,2010(04).

[2]閆龍寶,劉艷琴,王浩,楊紅梅,劉小力.HPLC法測定嬰幼兒配方奶粉中維生素C[J].食品科技,2008(06).