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(1 青島大學醫(yī)學院診斷學教研室,山東 青島 266021; 2 青島市海慈醫(yī)療集團血液凈化中心; 3 青島大學醫(yī)學院2011級本科生)

基質金屬蛋白酶-9(MMP-9)是一種鋅離子依賴性蛋白水解酶，最早由SOPATA等[1]在人的中性粒細胞中提純。MMP-9能夠降解細胞外基質，破壞粥樣斑塊的穩(wěn)定性，因此，其在冠心病(CHD)的發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[2-3]。同型半胱氨酸(Hcy)可參與低密度脂蛋白的氧化，促進泡沫細胞的生成，還可激活多種細胞因子及黏附分子，發(fā)揮促炎作用，加速動脈粥樣硬化的形成[4]。因此，Hcy被認為是CHD的獨立危險因素之一。本研究檢測不同類型CHD病人血清MMP-9、Hcy濃度的變化及其相關性，探討兩者在CHD發(fā)病中的作用及臨床意義。現(xiàn)將結果報告如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

1.1.1CHD組 根據(jù)WHO關于CHD的診斷標準，從我院附屬醫(yī)院2011年3—6月的住院病人中選取CHD病人60例，男32例，女28例；年齡38～85歲，平均(61.96±11.23)歲。其中急性心肌梗死(AMI)組20例，男11例，女9例，平均年齡(61.75±14.34)歲；不穩(wěn)定型心絞痛(UAP)組20例，男10例，女10例，平均年齡(62.80±13.16)歲；穩(wěn)定型心絞痛(SAP)組20例，男11例，女9例，平均年齡(59.85±8.61)歲。

1.1.2對照組 選取同期健康體檢者20例作為對照組，其中男9例，女11例，年齡為55～86歲，平均(63.45±8.01)歲；經(jīng)詢問病史及常規(guī)體格檢查未見異常。

CHD組和對照組均排除炎癥、感染、心肌病、糖尿病、腫瘤、肝腎功能衰竭、自身免疫性疾病等疾病，無近期手術或創(chuàng)傷史。各組間年齡、性別比較，差異無統(tǒng)計學意義。

1.2 檢測指標及方法

所有研究對象均于清晨采集空腹靜脈血4 mL，37 ℃水浴30 min后，3 000 r/min離心10 min分離血清，分裝于兩個EP管中，并于-20 ℃密封保存。MMP-9、Hcy均采用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測定，試劑盒由美國ADL公司提供。

1.3 統(tǒng)計學處理

2 結 果

2.1 各組MMP-9和Hcy濃度的比較

CHD組MMP-9和Hcy濃度均高于對照組，差異有顯著性(t′=6.73、6.40，P<0.01)。AMI組MMP-9和Hcy濃度顯著高于UAP組、SAP組及對照組(F=35.91、40.75，q=4.95～14.14，P<0.01)；UAP組高于SAP組及對照組(q=5.08～7.49，P<0.01)；SAP組與對照組比較差異無統(tǒng)計學意義(q=0.39、1.48，P>0.05)。見表1。

2.2 CHD病人血清MMP-9和Hcy濃度的相關性

CHD病人血清MMP-9和Hcy濃度呈正相關(r=0.490，P<0.01)。

2.3 CHD病人血清MMP-9和Hcy濃度的受試者工作曲線(ROC)分析

AMI病人血清MMP-9和Hcy濃度的ROC曲線下面積(AUCROC)均大于0.9，分別為0.996和0.981，對AMI的診斷價值較高，同時具有較高的靈敏度和特異度。見表2。血清MMP-9和Hcy濃度對UAP也具有較高的診斷價值，其AUCROC分別為0.940和0.914。見表3。SAP組血清MMP-9和Hcy濃度的AUCROC分別為0.531和0.661，對SAP無診斷價值。

表1 CHD組與對照組血清MMP-9和Hcy濃度比較

表2 AMI病人血清MMP-9和Hcy診斷價值的比較

表3 UAP病人血清MMP-9和Hcy診斷價值的比較

3 討 論

MMP-9又稱明膠酶B，是一種高度保守的、以無活性酶原形式分泌的、依賴于鋅離子的蛋白水解酶，主要由中性粒細胞、單核細胞、巨噬細胞等分泌。MMP-9可降解組織的Ⅳ型膠原、彈性蛋白等，從而破壞細胞外基質的完整性，導致血管中層平滑肌細胞(VSMC)移行至內(nèi)膜層，并大量增殖形成斑塊。因此，MMP-9在動脈粥樣硬化(AS)的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用。另外，MMP-9可誘發(fā)VSMC釋放TNF-α，使大量VSMC發(fā)生凋亡，導致斑塊肩部無法發(fā)揮支撐作用；MMP-9還可降解斑塊纖維帽的膠原及結締組織，使纖維帽變薄，斑塊抵抗應力的能力減弱，穩(wěn)定性遭到破壞，易于破裂，繼發(fā)血栓，進而導致CHD的急性發(fā)作。已有研究顯示，不穩(wěn)定斑塊中MMP-9的濃度可達穩(wěn)定斑塊的3～5倍，證實MMP-9與AS斑塊的穩(wěn)定性密切相關，是導致斑塊不穩(wěn)定的重要因素[5]。

本研究結果顯示，CHD病人血清MMP-9濃度明顯高于對照組，AMI組、UAP組血清MMP-9濃度明顯高于SAP組，并隨CHD病情嚴重程度增加而呈增高趨勢。MMP-9是一種新型的炎癥遞質，在炎癥反應過程中，AS斑塊中浸潤的炎性細胞可釋放大量的MMP-9，增強IL-1β、TNF-α等炎性遞質的活性，并相互誘生、循環(huán)作用，使炎癥反應進一步擴大，CHD病情加重。另外，在IL-6、IL-18等炎性因子的作用下，炎性細胞釋放MMP-9加強，導致CHD病人血清MMP-9濃度進一步升高[6]。CHD病人AS斑塊中MMP-9與其他炎癥因子共同作用，導致斑塊的炎性狀態(tài)，最終破壞粥樣斑塊的穩(wěn)定性，引起斑塊破裂[7]。因此，血清MMP-9濃度在一定程度上可反映CHD的嚴重程度，對CHD的病變程度有一定的預測價值。

Hcy是甲硫氨酸代謝過程中產(chǎn)生的含硫氨基酸，其合成及代謝過程中酶缺乏或葉酸、維生素B12缺乏可導致血清Hcy濃度顯著升高，高于15 μmol/L被稱為高Hcy血癥(HHcy)。Hcy可參與血管內(nèi)皮舒張因子一氧化氮(NO)的代謝過程，導致舒張障礙，對血管內(nèi)皮造成損傷，進一步引起血管痙攣及局部血栓形成[8]。Hcy合成及代謝過程中產(chǎn)生大量的氧自由基及過氧化物，可氧化低密度脂蛋白(LDL)，形成OX-LDL，而OX-LDL可促進泡沫細胞的生成，引起血管壁增厚、血管阻力增加，導致AS斑塊形成[9]。

本研究結果顯示，CHD組Hcy濃度顯著高于對照組，AMI組、UAP組血清Hcy濃度明顯高于SAP組，隨CHD病情嚴重程度增加，血清Hcy濃度呈上升趨勢，提示Hcy濃度可反映CHD的病情嚴重程度。PAN等[10]研究顯示，降低血清Hcy濃度并不能減少心血管疾病的病死率和心血管事件的發(fā)生率，Hcy濃度與CHD患病風險之間并無聯(lián)系，兩者之間只是一種伴隨關系。此觀點存有爭議，BOUSHEY等[11]研究表明，血清Hcy濃度越高，罹患CHD的風險越高。因此，Hcy是動脈粥樣硬化性疾病的危險因子，可導致CHD的發(fā)生，而不是CHD的伴隨現(xiàn)象。SHASTRY等[12]研究表明，Hcy可上調MMP-9 mRNA的表達，增加MMP-9的合成并促進其分泌，因此，CHD病人血清MMP-9與Hcy濃度呈正比。本文研究結果與其相符。

根據(jù)ROC曲線分析，當AUCROC>0.9時對疾病的診斷具有較高的準確度。本文的研究結果顯示，AMI和UAP病人血清MMP-9和Hcy濃度的AUCROC分別為0.996、0.981和0.940、0.914，均具有較高的靈敏度和特異度，但UAP較AMI病人低。SAP病人AUCROC分別為0.531和0.661，提示血清MMP-9和Hcy濃度對SAP無診斷價值，這可能與SAP病人的AS斑塊較穩(wěn)定有關。血清MMP-9和Hcy濃度變化對AMI、UAP具有較高的診斷價值，其升高程度可用于判斷CHD病情的嚴重程度，因此，檢測血清MMP-9和Hcy對CHD的診斷、危險分層及預后預測具有重要意義。

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