唐碩潤(rùn) 梁 珍
湖南省結(jié)核病醫(yī)院,長(zhǎng)沙 410000
結(jié)核病(tuberculosis,TB)被列為國(guó)內(nèi)重大傳染病之一,是目前傳染病中的頭號(hào)殺手,是嚴(yán)重危害人類健康的呼吸道傳染病,同時(shí)也是單因素致死率最高的傳染性疾病[1-2]。近年來(lái),隨著人類免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染、艾滋病的流行、移民增加、人口流動(dòng)性增大以及結(jié)核菌耐藥性的加重,TB的發(fā)病率有上升趨勢(shì)。中國(guó)是TB高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一,2010年第五次全國(guó)結(jié)核病流行病學(xué)調(diào)查顯示,活動(dòng)性TB患者459/10萬(wàn),菌陽(yáng)患者66/10萬(wàn),提示TB的診治仍然是國(guó)家TB控制策略中的重要措施。目前臨床診斷TB的金標(biāo)準(zhǔn)只有結(jié)核菌培養(yǎng),但其缺乏敏感性,易漏診。本研究選取 2010年 5月~2013年1月在本院做結(jié)核檢測(cè)的患者,采用結(jié)核酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)試驗(yàn)(T-SPOT.TB)、結(jié)核分枝桿菌 DNA(TB-DNA)測(cè)定和痰涂片方法分別檢測(cè),探討其診斷肺結(jié)核的應(yīng)用價(jià)值,現(xiàn)報(bào)道如下。
選取2010年5月~2013年1月在本院做結(jié)核檢測(cè)的患者,其中確診肺結(jié)核的患者95例,男60例,女35例,年齡 25~70 歲,平均 (50.17±11.41)歲。
以肺結(jié)核診斷標(biāo)準(zhǔn)(WS288-2008)為標(biāo)準(zhǔn),結(jié)核桿菌培養(yǎng)陽(yáng)性(金標(biāo)準(zhǔn))或痰檢抗酸桿菌陽(yáng)性;肺外結(jié)核以癥狀、體征、涂片抗酸桿菌和結(jié)核分支桿菌培養(yǎng)陽(yáng)性為標(biāo)準(zhǔn)[3]。
1.3.1 T-SPOT.TB試驗(yàn) 采集患者外周血,應(yīng)用上海復(fù)興長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供的結(jié)核感染T細(xì)胞斑點(diǎn)診斷試劑盒,按試劑盒說(shuō)明書(shū)判讀檢測(cè)結(jié)果。
1.3.2 痰涂片檢測(cè) 清晨收集膿性痰,進(jìn)行抗酸桿菌染色,在顯微鏡下觀察染色結(jié)果,以每100個(gè)視野抗酸桿菌≥3個(gè)為陽(yáng)性。
1.3.3 TB-DNA的檢測(cè) 采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),應(yīng)用上??寺∩锔呒夹g(shù)有限公司TB-DNA熒光PCR檢測(cè)試劑盒,操作和診斷標(biāo)準(zhǔn)參照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。
數(shù)據(jù)采用SPSS 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,采用 t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料采用 χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
T-SPOT.TB、痰涂片和TB-DNA的陽(yáng)性率分別為87.37%、23.16%、64.12%,敏感性分別為 92.22%、24.44%、67.78%,痰涂片敏感性最低,T-SPOT.TB 最高(P<0.05)(表 1)。
表1 T-SPOT.TB、痰涂片和TB-DNA敏感性的比較
TB是一個(gè)全球性公共衛(wèi)生問(wèn)題,近年來(lái)TB疫情呈明顯上升趨勢(shì)?,F(xiàn)在中國(guó)成為全球22個(gè)TB高負(fù)擔(dān)國(guó)家之一,成為僅次于印度的結(jié)核大國(guó)。對(duì)于感染結(jié)核的患者進(jìn)行早期診斷和治療是改善患者預(yù)后的關(guān)鍵,也是控制結(jié)核播散的重要環(huán)節(jié)[4]。早期診斷對(duì)于控制TB的快速蔓延十分重要,但初期的檢測(cè)困難。檢測(cè)結(jié)核的方法很多,包括結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)、結(jié)核菌培養(yǎng)、結(jié)核菌素純蛋白衍化物(PPD)實(shí)驗(yàn)、痰涂片和TB-DNA測(cè)定、T-SPOT.TB檢測(cè)等,但皮試假陽(yáng)性和假陰性非常多,檢測(cè)不準(zhǔn)確。結(jié)核菌培養(yǎng)則有周期長(zhǎng),假陰、假陽(yáng)性比例高,難于診斷肺外結(jié)核等缺點(diǎn);PPD實(shí)驗(yàn)受免疫力及交叉反應(yīng)的影響,敏感性和特異性較低[5-6]。本研究采用痰涂片、TB-DNA測(cè)定、T-SPOT.TB方法檢測(cè)肺結(jié)核患者,以期為臨床檢測(cè)提供依據(jù)。
痰涂片抗酸染色雖然操作簡(jiǎn)單、診斷快速、費(fèi)用低廉,但檢測(cè)結(jié)果受技術(shù)人員水平的影響,檢測(cè)率低,且無(wú)法對(duì)肺外結(jié)核及不咯痰的兒童肺結(jié)核作出診斷。TB-DNA測(cè)定具有快速檢測(cè)、高準(zhǔn)確率等優(yōu)點(diǎn),但其標(biāo)本來(lái)源(如漿膜腔液體、病灶分泌物等)難以獲取[7-8];T-SPOT.TB則是利用ELISPOT法檢測(cè)特異性T細(xì)胞來(lái)診斷結(jié)核的一種新方法,它是利用結(jié)核桿菌感染者外周血單核細(xì)胞(PBMC)中存在結(jié)核感染特異性 T細(xì)胞,這些T細(xì)胞在受到致病性結(jié)核桿菌特異抗原刺激后分泌IFN-γ而設(shè)計(jì)的 T細(xì)胞免疫斑點(diǎn)試驗(yàn),其特異性及靈敏度高。
本研究結(jié)果顯示,T-SPOT.TB、痰涂片和TB-DNA敏感性分別為92.22%、24.44%、67.78%,痰涂片敏感性最低,T-SPOT.TB最高,說(shuō)明T-SPOT.TB檢測(cè)結(jié)核具有非常高的敏感性。目前,隨著T-SPOT.TB檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展和完善,其可以減少結(jié)核的漏檢率,是一種有效的檢查TB的手段[9]。
綜上所述,T-SPOT.TB較較痰涂片和TB-DNA檢測(cè)對(duì)TB的診斷有高度的敏感性,值得臨床推廣。
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