余水花,何興興,雷菊紅,陳永平,韓鳳琴
(1.甘肅省天水市第二人民醫(yī)院檢驗科 741024;2.甘肅省天水市表積區(qū)中醫(yī)院檢驗科 741024;3.甘肅省文縣縣醫(yī)院檢驗科 746400)
血小板(PLT)是哺乳動物血液中的有形成分之一,血小板具有維持血管內(nèi)皮完整性的功能和黏附、聚集、釋放、促凝和血塊收縮功能。在生理性的止血凝血過程中起著非常重要的作用。血小板減少是引起出血的常見原因。血小板計數(shù)是測定全血中的血小板濃度。血小板計數(shù)的方法有:普通光學顯微鏡直接計數(shù)法、流式細胞儀法、相差顯微鏡法、血細胞分析儀法。后者因測定速度快、重復性好、準確性高、能同時提供多項血液參數(shù),是目前血小板計數(shù)的常用方法[1]。PLT在出凝血疾病的臨床診斷、療效觀察、疾病預后判斷中是一個常用且較為重要的指標之一。其值的高低受諸多因素的影響,且各地間差異較大。近年來本市各醫(yī)院均使用血細胞分析儀進行血小板計數(shù),但仍采用北京等地多年前顯微鏡直接計數(shù)法確定的成人血小板參考值,即(100~300)×109/L[1-2]。作者在工作中發(fā)現(xiàn),兒童尤其是1歲以下兒童血小板值高于成人,所以此參考值已不能滿足臨床對嬰幼兒出凝血疾病診斷的需求。確定本地區(qū)兒童血小板參考值顯得尤為重要。
1.1 一般資料 2010年1月至2011年12月來院體檢的兒童及兒科、新生兒科2歲以下無發(fā)熱、黃疸,無肝、脾、淋巴結(jié)腫大,無紫癜等出血傾向,肝功能正常,尿潛血陰性,體格發(fā)育正常的2 649例2歲以下健康兒童作為研究對象,其中男1 400例,女1 249例,按年齡和性別分為52個組。
1.2 方法
1.2.1 儀器 深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的邁瑞5380型全自動血細胞分析儀。
1.2.2 試劑 血細胞稀釋液、溶血劑、洗清劑均為深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)。
1.2.3 室內(nèi)質(zhì)控 用深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司生產(chǎn)的全血定值質(zhì)控液,質(zhì)控結(jié)果均在說明書要求范圍之內(nèi),以保證儀器運行的良好狀態(tài)。
1.2.4 樣品 采集手指或靜脈血,用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝,每毫升血液用1.5~2.2mg EDTA-K2[3]。靜置5~10min,輕輕均勻混合,上機測定,記錄各項血液參數(shù)。
通過兩樣本均數(shù)的顯著性t檢驗,同年齡組男女血小板參考值差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);不同年齡組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。20d至4月組基本接近,為(313±125)×109/L,且明顯高于5個月至2歲組;3d內(nèi)的新生兒及5個月至2歲組血小板參考值基本接近,為(252±103)×109/L,并隨年齡的增長血小板逐漸降低至接近成人水平。
表1 天水地區(qū)0~2歲健康兒童血小板參考值(x±s,×109/L)
通過本實驗研究,發(fā)現(xiàn)2歲以下兒童隨著年齡的增長血小板值的變化規(guī)律:3d組及5月至2歲組兒童血小板值基本接近,20d至4個月組血小板值明顯高于其他組。初步建立了天水地區(qū)2歲以下健康兒童血小板參考值。20d至4個月組基本接近,為(313±125)×109/L,且明顯高于5個月至2歲組;3 d內(nèi)的新生兒及5個月至2歲組血小板參考值基本接近,并隨年齡的增長血小板逐漸降低至接近成人水平。
PLT是哺乳動物血液中的有形成分之一。來源于骨髓中的巨核細胞(巨核細胞由骨髓中多能造血干細胞發(fā)育而來),壽命為7~14d,每天更新為總量的1/10,衰老的血小板在脾臟中被清除。血小板為圓盤形,直徑2~4μm,平均體積7μm3。血小板因能運動和變形,故觀察時為多形態(tài)性。結(jié)構(gòu)復雜,由外向內(nèi)為3層結(jié)構(gòu):即由外膜、單元膜及膜下微絲結(jié)構(gòu)組成的外圍為第1層;第2層為凝膠層,電鏡下見到與周圍平行的微絲及微管構(gòu)成;第3層為微器官層,有線粒體,致密小體殘核等結(jié)構(gòu)。血小板內(nèi)散在著顆粒和致密顆粒。顆粒中含纖維蛋白原、血小板第4因子、組織蛋白酶A、組織蛋白酶D、酸性水解酶等。致密顆粒內(nèi)容物電子密度高,含有5-羥色胺、二磷酸腺苷(ADP)、三磷酸腺苷(ATP)、鈣離子、腎上腺素、抗血纖維蛋白酶。另外,在血小板中還存在有線粒體、糖原顆粒等。
當血管破損時,血小板受到損傷部位激活因子刺激出現(xiàn)血小板的聚集,成為血小板凝塊,起到初級止血作用。接著血小板又經(jīng)過復雜的變化產(chǎn)生凝血酶,使臨近血漿中的纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白,互相交織的蛋白使血小板凝塊與血細胞纏結(jié)成血凝塊,即血栓。同時血小板的突起伸入纖維蛋白網(wǎng)內(nèi),隨著血小板微絲(肌動蛋白)和肌球蛋白的收縮,使血凝塊收縮,血栓變得更堅實,能更有效地止血,這是二級的止血作用。伴隨著血栓的形成,血小板釋放血栓烷A2;致密顆粒和顆粒,通過與表面相連管道系統(tǒng)釋放ADP、5-羥色胺、血小板第4因子、血栓球蛋白、凝血酶敏感蛋白、細胞生長因子、血液凝固因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅻ和血管通透因子等物質(zhì),這些活性物質(zhì)通過激活周圍血小板,促進血管收縮、促進纖維蛋白形成等多種方式加強止血。
當血管損傷部位血栓形成,血液停止流失以后需要防止血栓的無限增大,避免由此而產(chǎn)生的血管阻塞。此時,由血小板所產(chǎn)生的5-羥色胺等對血管內(nèi)皮細胞起作用,使其釋放纖維蛋白溶酶原激活因子,促使纖維蛋白溶酶形成,進而使血栓中的纖維蛋白溶解。血小板本身也有纖維蛋白溶酶原激活因子與纖維蛋白溶酶原,產(chǎn)生纖維蛋白溶酶參與血栓中纖維蛋白的再溶解。
綜上所述,血小板具有多種功能:(1)血管收縮,有助于暫時止血;(2)形成止血栓,堵塞血管破裂口;(3)釋放促凝物質(zhì),加速血凝塊的形成;(4)釋放抗纖溶因子,抑制纖溶系統(tǒng)的活性;(5)營養(yǎng)和支持毛細血管的內(nèi)皮;(6)促進血液循環(huán)。
PLT在出凝血疾病的臨床診斷、療效觀察、疾病預后判斷中是一個常用且較為重要的指標之一[4]。多年以來,因為缺少少年兒童的血小板參考值,而一直沿用成人的血細胞參考值來對少年兒童進行出、凝血疾病診治,導致了許多偏差。血小板參考值范圍通常因地域、種族、年齡、性別等多種生物學因素不同而有所變化。本研究對2歲以下2 649份標本按年齡、性別進行分組研究,樣本量大、分組細、數(shù)據(jù)統(tǒng)計科學合理,減少了分析誤差,客觀準確地反映了當?shù)?~2歲兒童血小板實際水平,為兒科臨床提供了客觀的診療治療依據(jù),解決了2歲以下兒童多年來使用成人參考值的問題。存在的不足及今后努力的方向:(1)由于血小板參考值的范圍較大,個體之間的差異、生理波動、地區(qū)間的差異及不同血細胞分析儀之間的差異有待進一步分析探討。(2)隨著人們生活水平的不斷提高,工作壓力的增大,生活節(jié)奏的加快,心腦血管病呈明顯上升趨勢。預防和治療心腦血管病常用藥小劑量(每片25mg)阿司匹林及抗風濕常用藥腸溶阿司匹林對血小板數(shù)量和功能的影響也是亟待解決的問題。(3)由于家庭裝飾的盛行,所致家庭環(huán)境、工作環(huán)境對血細胞的影響也是值得探討和需要解決的實際問題。(4)活血化淤中藥對血小板的影響也是值得探討的問題。
[1] 熊立凡.臨床檢驗基礎(chǔ)[M].4版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2007:66-67.
[2] 陳文彬,潘祥林.診斷學[M].6版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:278.
[3] 姚振江.臨床醫(yī)學檢驗學與技術(shù)[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2010:.
[4] 楊成敏.腦梗死患者PLT數(shù)計數(shù)的變化及意義分析[J].健康必讀,2011,2(6):239.