于海波,李 晶,趙廣陽,于海濤,高 山,秦曉玉

(1.佳木斯大學(xué)附屬第一醫(yī)院,黑龍江 佳木斯 154003;2.佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,黑龍江佳木斯 154007)

慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)是一個復(fù)雜綜合征,可累及多系統(tǒng),也存在免疫功能的紊亂,涉及到許多不同的炎癥介質(zhì)的相互作用。作為循環(huán)器官的心血管組織,還具有內(nèi)分泌功能,也就是心肌、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞等均可產(chǎn)生多種生物活性分子,它們通過各種不同細(xì)胞信號傳導(dǎo)通路對心力衰竭的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸起著不同作用。近年來研究發(fā)現(xiàn)某些心血管疾病發(fā)病機(jī)理與細(xì)胞內(nèi) NO、NOS、IL-10的異常變化有關(guān) ,本實(shí)驗(yàn)研究 CHF患者血清 IL-10、血漿 NOS、NO含量變化,探討它們之間的相關(guān)性,對心衰早期診斷、早期治療、早期干預(yù)具有一定的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

正常對照組30例(男17例,女13例),年齡40～60歲,均為門診健康體檢者。心衰患者60例(男39例,女21例),年齡35～80歲,符合Framingham診斷標(biāo)準(zhǔn)[1]。其中,風(fēng)心病(9例)、高血壓病(21例)、冠心病(30例)。心功能分級為Ⅱ級19例、Ⅲ級24例、Ⅳ級17例,按美國紐約心臟病學(xué)會(NYHA)心功能分級標(biāo)準(zhǔn)。

1.2 方法

所有受試者空腹靜脈采血,血漿 NO的檢測用硝酸還原酶法,NOS活性用化學(xué)比色法,IL-10水平用雙抗體夾心ELISA法。具體操作按試劑盒說明書進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 CHF組與對照組一般資料比較

見表1。

表1 CHF組與對照組一般資料比較 (±s)

表1 CHF組與對照組一般資料比較 (±s)

組別 例數(shù)(n)性別男 女 年齡 (歲)對照組 30 38 27 53.70±11.05心衰組 60 49 31 55.82±13.21

從表1可以看出,兩組在年齡分布、性別比例上無明顯差異,具有可比性。

2.2 血漿 NO、NOS、血清 IL-10含量的比較

CHF組血漿 NO、NOS、血清 IL-10均高于對照組(P ＜ 0.05)。見表2。

表2 兩組血漿 NO、NOS含量的比較 (±s)

表2 兩組血漿 NO、NOS含量的比較 (±s)

* P＜0.05與對照組比較。

組別 例數(shù) NO(μmol/L) NOS活性(U/L)IL-10(p/pg·mL-1)對照組 30 54.57±3.59 16.28±2.49 7.83±1.26 CHF組 60 107.72±7.16* 47.76±4.43* 14.29±2.16*

2.3 CHF組按心功能分級血漿 NO、NOS、血清 IL-10含量比較

心功能Ⅱ 級組血漿 NO、NOS、血清 IL-10明顯增加(P＜0.05),達(dá)最高峰為心功能Ⅲ級組;心功能Ⅳ級組較Ⅱ、Ⅲ級組明顯下降 (P＜0.05),但Ⅳ級組高于正常對照組(P ＜ 0.05),見表3。

表3 CHF組按心功能分級血漿 NO、NOS、血清 IL-10含量的比較 (±s)

表3 CHF組按心功能分級血漿 NO、NOS、血清 IL-10含量的比較 (±s)

△P＜0.05與對照組比較,#P＜0.05與心功能Ⅱ級比較,*P＜0.05與心功能Ⅲ級比較。

組別 例數(shù) NO(μ mol/L) NOS活性 (U/L)IL-10(p/pg·mL-1)對照組 3054.57±3.59 16.28±2.49 7.83±1.26心功能Ⅱ 級 19 113.41±9.95△ 41.76±3.69△ 19.25±2.90△心功能Ⅲ 級 24134.39±8.13△#81.52±7.97△# 17.70±2.24△#心功能Ⅳ級 1775.37±3.42#* 20.01±1.64#* 25.43±3.17#*

2.4 不同病因 CHF患者血漿 NOS活性及 NO水平血清 IL-10比較

高血壓病、冠心病、風(fēng)心病血漿 NO水平、NOS、血清 IL- 10活性升高 (P ＜ 0.05);各組間沒有明顯差異(P ＞ 0.05)。見表4。

表4 不同病因 CHF患者血漿 NOS活性及NO水平、血清 IL-10比較 (±s)

表4 不同病因 CHF患者血漿 NOS活性及NO水平、血清 IL-10比較 (±s)

*P ＜0.05與對照組比較;以上組間比較均 P＞ 0.05。

組別 例數(shù) NO(μmol/L) NOS活性 (U/L)IL-10(p/pg·mL-1)對照組 30 54.57±3.59 16.28±2.49 7.83±1.26高心病 21 142.52±39.32* 48.75±10.25* 16.96±3.22*冠心病 30 145.72±40.52* 51.15±10.32* 17.48±2.84*風(fēng)心病 9 144.32±39.43* 50.25±10.38* 28.07±5.35*

2.5 NOS與 NO的相關(guān)性

經(jīng)相關(guān)性分析,CHF患者血漿 NOS與 NO含量存在明顯正相關(guān) (r=0.39,P＜0.05);表明 NO的變化與 NOS有關(guān),血漿 NO升高部分來源于 NOS的升高。CHF時,某些細(xì)胞激肽(如內(nèi)、外毒素,白介素等)的增加,激活了 iNOS,從而使內(nèi)源性 NO生成和釋放增加,NOS與 NO之間關(guān)系密切。

3 討論

近年來,有學(xué)者認(rèn)為細(xì)胞因子之間的網(wǎng)絡(luò)調(diào)控對于 CHF的發(fā)生、發(fā)展具有重要作用,即“細(xì)胞因子假說”[1]。許多正、負(fù)反饋環(huán)是炎癥性細(xì)胞因子與抗炎癥性細(xì)胞因子相互作用形成,二者經(jīng)常處在相互對立統(tǒng)一 (平衡 /失衡)的變化之中,調(diào)節(jié)左室重構(gòu),影響心功能不全的進(jìn)程。如同神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)激活造成血管收縮因子和舒張因子平衡失調(diào)一樣,而 CHF發(fā)生和發(fā)展可能和其錯綜復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制有關(guān)。IL-10能抑制單核、巨噬細(xì)胞產(chǎn)生 NO,在 CHF的進(jìn)程中,IL-10因能下調(diào)多種心肌破壞性細(xì)胞因子,所以對心肌有保護(hù)作用[2]。心肌局部的 iNOS可能通過激活 JNK誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,減弱心肌收縮力而參與心力衰竭心肌重塑的病理過程。一般細(xì)胞因子是以自分泌或旁分泌形式發(fā)揮作用,其可經(jīng)細(xì)胞表面的特殊受體介導(dǎo)細(xì)胞間的相互作用,從而調(diào)控免疫細(xì)胞激活、分化、生長、死亡以及效應(yīng)器功能。近年研究顯示,心血管功能的調(diào)控可能是細(xì)胞因子循多種機(jī)制進(jìn)行,目前被認(rèn)可的是繼鳥嘌呤調(diào)節(jié)蛋白抑制作用的改變,即腺苷酸環(huán)化酶(AC)之β受體的耦和裂解,NOS活性增強(qiáng),大量 NO釋出造成細(xì)胞內(nèi)鈣離子失衡[3],或激活中性神經(jīng)鞘磷脂酶途徑直接顯現(xiàn)負(fù)性作用[4],或者心肌細(xì)胞凋亡[5]。凋亡(心肌細(xì)胞減少,心室功能降低)是心肌細(xì)胞死亡的主要形式,與 iNOS表達(dá)和過氧化亞硝酸鹽的蛋白硝化作用有關(guān),在 CHF的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要作用。同時,也與 eNOS有關(guān)系,轉(zhuǎn)心臟 eNOS基因,可出現(xiàn)心肌細(xì)胞凋亡,證明心肌細(xì)胞毒性作用由 NO引起,其可轉(zhuǎn)移 eNOS基因的心肌細(xì)胞、也可通過旁分泌作用影響周圍心肌細(xì)胞,促進(jìn)心肌細(xì)胞的凋亡[6]。NO發(fā)揮的作用,與兩種酶 eNOS及 iNOS有關(guān)(即促凋亡與 iNOS產(chǎn)生的高濃度NO有關(guān);抗凋亡與 eNOS刺激的低濃度 NO有關(guān),這也是NO影響心血管細(xì)胞凋亡的特征[7])。NO在心血管疾病中發(fā)揮重要作用。有學(xué)者認(rèn)為充血性心力衰竭的病理生理特征之一是血漿 NO增高。近年研究發(fā)現(xiàn)[8],心功能的調(diào)節(jié)與 NO有關(guān);是通過激活鳥苷酸環(huán)化酶,升高血漿 cGMP水平來增強(qiáng)舒張功能而發(fā)揮作用,并且產(chǎn)生負(fù)性肌力作用、降低心臟的前后負(fù)荷,防止心衰進(jìn)一步惡化。CHF時在炎癥細(xì)胞因子的刺激下,血管平滑肌細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、血小板、紅細(xì)胞等 NOS表達(dá)增加,從而增加 NO的合成。也就是說血管舒張是由NOS-NO-cGM P這一信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路激活引起[9]。本研究發(fā)現(xiàn),隨心功能的惡化(Ⅱ、Ⅲ級),NOS合成和活性增加,NO生成和釋放增多,導(dǎo)致血管擴(kuò)張,血壓下降,實(shí)現(xiàn)其在心力衰竭的代償機(jī)制。而當(dāng)心功能發(fā)展到Ⅳ級時,NO及 NOS較Ⅱ、Ⅲ級組明顯下降,可能與嚴(yán)重心衰時機(jī)體 NOS的活性降低NO產(chǎn)生障礙有關(guān)。

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