陳 亮 張向東 馬登飛 (安陽(yáng)市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 安陽(yáng) 455000)

腦血管病中腦出血約占20% ～30%，腦出血起病急驟、病情兇險(xiǎn)、死亡率非常高，對(duì)腦出血的早期診斷和盡早治療將會(huì)對(duì)患者的預(yù)后帶來(lái)很大的改變〔1，2〕。血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)受到損傷時(shí)，合成和分泌會(huì)相應(yīng)增加〔3，4〕，因此，本研究觀察急性腦出血患者血清PDGF的動(dòng)態(tài)變化，旨在為腦出血的早期診斷和病情以及預(yù)后判斷提供相關(guān)生物學(xué)指標(biāo)。

1 材料與方法

1.1 臨床病例資料 2009年5月至2011年12月我院神經(jīng)內(nèi)科住院腦出血患者84例，入組者發(fā)?。?4 h，臨床診斷參照腦血管病全國(guó)第四屆學(xué)術(shù)會(huì)議所修訂的標(biāo)準(zhǔn):《各類(lèi)腦血管病診斷要點(diǎn)》〔5〕，同時(shí)經(jīng)頭顱CT與MRI影像學(xué)檢查確診。其中男49例，女35例，年齡44～75〔平均(63.6±11.7)〕歲。腦出血患者在入院48 h內(nèi)、第4、8天應(yīng)用Fugl-Meyer評(píng)測(cè)法(FMA)對(duì)其進(jìn)行神經(jīng)功能缺損程度評(píng)分。排除標(biāo)準(zhǔn):嚴(yán)重心臟、肝臟、腎臟等疾病，糖尿病以及甲狀腺疾病，自身免疫性疾病、急慢性感染、血液病等。另選取我院體檢中心的健康體檢者26例為對(duì)照組，其中男15例，女11例，年齡40～72歲〔平均(59.3±12.5)〕歲，兩組受試者年齡、性別和體重等具有可比性(P＞0.05)。

1.2 影像學(xué)檢查 腦出血患者在入院第2天進(jìn)行頭顱影像學(xué)復(fù)查，并估算血腫大小，血腫體積=0.5×血腫最大長(zhǎng)徑×與長(zhǎng)徑相垂直的直徑×血腫層面數(shù)，參照Leira等〔6〕的方法將血腫分為少量(體積＜20 ml)、中量(體積20～40 ml)、大量出血(體積＞40 ml)組。

1.3 PDGF的測(cè)定 受試者在發(fā)病 ＜48 h、第4、8、12天采集清晨空腹外周不抗凝靜脈血5 ml，3 000 r/min離心15 min分離血清，-70℃低溫保存待測(cè)。酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法(ELISA)測(cè)定外周血PDGF的表達(dá)水平，PDGF ELISA檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京尚柏生物工程公司，采用美國(guó)RB公司生產(chǎn)的試劑，嚴(yán)格按試劑盒說(shuō)明操作，Model 550酶標(biāo)儀(Bio-Rad，USA)450 nm處測(cè)定測(cè)定OD值，以O(shè)D值為縱坐標(biāo)，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線根據(jù)血清樣品的OD值計(jì)算PDGF的濃度。

2 結(jié)果

2.1 腦出血患者血清PDGF表達(dá)水平隨發(fā)病時(shí)間的動(dòng)態(tài)變化腦出血患者＜48 h、第4、8、12天的血清PDGF含量均明顯高于正常對(duì)照組(P＜0.01)，腦出血患者直到第8天血清PDGF水平仍未見(jiàn)差異性變化(P＞0.05)，12 d血清PDGF水平開(kāi)始較前顯著減少，與＜48 h、第4、8天相比具有顯著性差異(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 腦出血患者發(fā)病不同時(shí)間血清PDGF表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化(μg/L，±s)

表1 腦出血患者發(fā)病不同時(shí)間血清PDGF表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化(μg/L，±s)

與對(duì)照組比較:1)P＜0.01;與發(fā)?。?8 h相比:2)P＜0.01;與發(fā)病第4天相比:3)P＜0.01;與發(fā)病第8天相比:4)P＜0.05

組別 n ＜48 h 第4天 第8天 第12天對(duì)照組26342.6±35.3 - - -腦出血組84 534.6±61.41)525.3±54.11)492.5±46.21)412.5±37.81)2)3)

2.2 腦出血患者血清PDGF蛋白含量與神經(jīng)功能缺損的關(guān)系腦出血患者FAM評(píng)分在第8天開(kāi)始升高，但其與＜48 h、第4天比較無(wú)顯著性差異，第12天顯著升高，與＜48 h、第4、8天比較存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，說(shuō)明患者病情出現(xiàn)好轉(zhuǎn)時(shí)其相應(yīng)的血清PDGF表達(dá)水平出現(xiàn)了減低，見(jiàn)表2。FAM評(píng)分與PDGF表達(dá)水平之間呈負(fù)相關(guān)(r=-0.62，P＜0.05)。

表2 腦出血患者血清PDGF水平動(dòng)態(tài)變化與FMA評(píng)分之間的相關(guān)性(±s，n=84)

表2 腦出血患者血清PDGF水平動(dòng)態(tài)變化與FMA評(píng)分之間的相關(guān)性(±s，n=84)

與發(fā)病＜48 h相比:1)P＜0.01;與發(fā)病第4天相比:2)P＜0.01;與發(fā)病第8天相比:3)P＜0.05

病程 PDGF(μg/L) FMA評(píng)分＜48 h 534.6±61.4 5.6±2.4第4天 525.3±54.1 5.8±2.7第8天 492.5±46.2 6.7±3.4第12天 412.5±37.81)2)3) 16.6±6.51)2)3)

2.3 不同出血體積腦出血患者血清PDGF表達(dá)水平的動(dòng)態(tài)變化 腦出血＜48 h，不同出血體積PDGF表達(dá)水平均高于對(duì)照組(P＜0.01)，并且不同出血體積之間也存在顯著性差異，隨血腫體積的增大其水平也相應(yīng)地升高(P＜0.05)，少量出血組PDGF水平第8天開(kāi)始減低，第12天時(shí)恢復(fù)到正常水平(P＜0.05);中量出血組PDGF水平第8天也開(kāi)始減低，但第12天仍然高于正常水平(P＜0.05);大量出血組PDGF水平在第12天才開(kāi)始減低，高于正常水平(P＜0.05)。同一時(shí)間點(diǎn)不同分組PDGF表達(dá)水平之間也存在顯著性差異(P＜0.05)。見(jiàn)表3。

表3 不同體積血腫患者血清PDGF表達(dá)水平動(dòng)態(tài)變化的比較(±s，μg/L)

表3 不同體積血腫患者血清PDGF表達(dá)水平動(dòng)態(tài)變化的比較(±s，μg/L)

與對(duì)照組比較:1)P＜0.05，2)P＜0.01;與發(fā)?。?8 h相比:3)P＜0.05，4)P＜0.01;與發(fā)病第4天相比:5)P＜0.05，6)P＜0.01;與發(fā)病第8天相比:7)P＜0.05

組別 n ＜48 h 第4天 第8天 第12天對(duì)照組26 342.6±35.3 - - -少量出血組 23 434.2±44.72) 427.3±41.42) 384.9±38.51)3)5) 352.3±32.64)6)7)中量出血組 32 514.6±63.72) 506.4±55.22) 466.5±50.62)3)5) 401.7±47.41)2)3)5)大量出血組 29 623.7±68.62) 602.0±61.72) 596.4±57.22) 511.7±43.82)3)5)7)

3 討論

腦出血因其發(fā)病急、致死率、致殘率高，即使入院病人也有30% ～40%的死亡率，并且50% ～70%的存活者遺留癱瘓、失語(yǔ)等嚴(yán)重殘疾，因此腦出血成為難治性的腦血管疾病，尤其是出血后腦水腫常常會(huì)導(dǎo)致病情的惡化〔7，8〕。因此尋找一種非侵入性、快速準(zhǔn)確診斷急性腦出血，并預(yù)測(cè)其損害程度及預(yù)后的生化檢測(cè)指標(biāo)，是完善臨床診治腦出血的有效途徑。

在過(guò)去的幾十年里，一些生物標(biāo)記已經(jīng)被用于一些疾病的早期診斷和病情的監(jiān)控〔9〕，腦出血后會(huì)引起機(jī)體和腦組織局部的一系列病理生理反應(yīng)并釋放一些生物化學(xué)標(biāo)志物，PDGF在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中有廣泛的表達(dá)，與多種神經(jīng)系統(tǒng)的疾病有密切關(guān)系，研究顯示神經(jīng)細(xì)胞損傷時(shí)神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞合成PDGF增多〔10〕。腦出血所引起的腦水腫、腦缺血或缺氧、顱內(nèi)壓升高等因素導(dǎo)致了星形膠質(zhì)細(xì)胞的大量增生和分泌，PDGF分子量較小只有28 kD，通過(guò)血腦屏障運(yùn)輸?shù)窖褐校硗饽X出血續(xù)發(fā)的腦水腫所激發(fā)的炎癥反應(yīng)、受損的內(nèi)皮細(xì)胞以及血液中血小板的激活，都會(huì)導(dǎo)致PDGF表達(dá)水平的升高〔11〕。

FAM評(píng)價(jià)法是一種綜合軀體功能評(píng)價(jià)法，F(xiàn)AM評(píng)分越低，說(shuō)明神經(jīng)功能缺損的越嚴(yán)重，隨著患者病情的好轉(zhuǎn)FAM評(píng)分會(huì)逐漸升高〔12〕，本研究說(shuō)明患者血清PDGF的表達(dá)水平與患者的病情密切相關(guān)。PDGF表達(dá)水平與患者的預(yù)后有一定的相關(guān)性。其可能的機(jī)制是腦出血量越大，壓迫周?chē)哪X組織越多使血腫周?chē)[、炎癥反應(yīng)越強(qiáng)烈的，星形膠質(zhì)細(xì)胞增生越活躍，各種機(jī)制促使PDGF合成分泌大量增加，所以PDGF表達(dá)水平也就反映出了患者病情的嚴(yán)重程度。

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