陳 亮 張向東 馬登飛 (安陽市人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，河南 安陽 455000)

腦血管病中腦出血約占20% ～30%，腦出血起病急驟、病情兇險、死亡率非常高，對腦出血的早期診斷和盡早治療將會對患者的預(yù)后帶來很大的改變〔1，2〕。血小板源性生長因子(PDGF)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)受到損傷時，合成和分泌會相應(yīng)增加〔3，4〕，因此，本研究觀察急性腦出血患者血清PDGF的動態(tài)變化，旨在為腦出血的早期診斷和病情以及預(yù)后判斷提供相關(guān)生物學(xué)指標。

1 材料與方法

1.1 臨床病例資料 2009年5月至2011年12月我院神經(jīng)內(nèi)科住院腦出血患者84例，入組者發(fā)?。?4 h，臨床診斷參照腦血管病全國第四屆學(xué)術(shù)會議所修訂的標準:《各類腦血管病診斷要點》〔5〕，同時經(jīng)頭顱CT與MRI影像學(xué)檢查確診。其中男49例，女35例，年齡44～75〔平均(63.6±11.7)〕歲。腦出血患者在入院48 h內(nèi)、第4、8天應(yīng)用Fugl-Meyer評測法(FMA)對其進行神經(jīng)功能缺損程度評分。排除標準:嚴重心臟、肝臟、腎臟等疾病，糖尿病以及甲狀腺疾病，自身免疫性疾病、急慢性感染、血液病等。另選取我院體檢中心的健康體檢者26例為對照組，其中男15例，女11例，年齡40～72歲〔平均(59.3±12.5)〕歲，兩組受試者年齡、性別和體重等具有可比性(P＞0.05)。

1.2 影像學(xué)檢查 腦出血患者在入院第2天進行頭顱影像學(xué)復(fù)查，并估算血腫大小，血腫體積=0.5×血腫最大長徑×與長徑相垂直的直徑×血腫層面數(shù)，參照Leira等〔6〕的方法將血腫分為少量(體積＜20 ml)、中量(體積20～40 ml)、大量出血(體積＞40 ml)組。

1.3 PDGF的測定 受試者在發(fā)病 ＜48 h、第4、8、12天采集清晨空腹外周不抗凝靜脈血5 ml，3 000 r/min離心15 min分離血清，-70℃低溫保存待測。酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法(ELISA)測定外周血PDGF的表達水平，PDGF ELISA檢測試劑盒購自北京尚柏生物工程公司，采用美國RB公司生產(chǎn)的試劑，嚴格按試劑盒說明操作，Model 550酶標儀(Bio-Rad，USA)450 nm處測定測定OD值，以O(shè)D值為縱坐標，以標準品濃度為橫坐標，繪制標準曲線，然后對照標準曲線根據(jù)血清樣品的OD值計算PDGF的濃度。

2 結(jié)果

2.1 腦出血患者血清PDGF表達水平隨發(fā)病時間的動態(tài)變化腦出血患者＜48 h、第4、8、12天的血清PDGF含量均明顯高于正常對照組(P＜0.01)，腦出血患者直到第8天血清PDGF水平仍未見差異性變化(P＞0.05)，12 d血清PDGF水平開始較前顯著減少，與＜48 h、第4、8天相比具有顯著性差異(P＜0.05)。見表1。

表1 腦出血患者發(fā)病不同時間血清PDGF表達的動態(tài)變化(μg/L，±s)

表1 腦出血患者發(fā)病不同時間血清PDGF表達的動態(tài)變化(μg/L，±s)

與對照組比較:1)P＜0.01;與發(fā)病＜48 h相比:2)P＜0.01;與發(fā)病第4天相比:3)P＜0.01;與發(fā)病第8天相比:4)P＜0.05

組別 n ＜48 h 第4天 第8天 第12天對照組26342.6±35.3 - - -腦出血組84 534.6±61.41)525.3±54.11)492.5±46.21)412.5±37.81)2)3)

2.2 腦出血患者血清PDGF蛋白含量與神經(jīng)功能缺損的關(guān)系腦出血患者FAM評分在第8天開始升高，但其與＜48 h、第4天比較無顯著性差異，第12天顯著升高，與＜48 h、第4、8天比較存在統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)，說明患者病情出現(xiàn)好轉(zhuǎn)時其相應(yīng)的血清PDGF表達水平出現(xiàn)了減低，見表2。FAM評分與PDGF表達水平之間呈負相關(guān)(r=-0.62，P＜0.05)。

表2 腦出血患者血清PDGF水平動態(tài)變化與FMA評分之間的相關(guān)性(±s，n=84)

表2 腦出血患者血清PDGF水平動態(tài)變化與FMA評分之間的相關(guān)性(±s，n=84)

與發(fā)病＜48 h相比:1)P＜0.01;與發(fā)病第4天相比:2)P＜0.01;與發(fā)病第8天相比:3)P＜0.05

病程 PDGF(μg/L) FMA評分＜48 h 534.6±61.4 5.6±2.4第4天 525.3±54.1 5.8±2.7第8天 492.5±46.2 6.7±3.4第12天 412.5±37.81)2)3) 16.6±6.51)2)3)

2.3 不同出血體積腦出血患者血清PDGF表達水平的動態(tài)變化 腦出血＜48 h，不同出血體積PDGF表達水平均高于對照組(P＜0.01)，并且不同出血體積之間也存在顯著性差異，隨血腫體積的增大其水平也相應(yīng)地升高(P＜0.05)，少量出血組PDGF水平第8天開始減低，第12天時恢復(fù)到正常水平(P＜0.05);中量出血組PDGF水平第8天也開始減低，但第12天仍然高于正常水平(P＜0.05);大量出血組PDGF水平在第12天才開始減低，高于正常水平(P＜0.05)。同一時間點不同分組PDGF表達水平之間也存在顯著性差異(P＜0.05)。見表3。

表3 不同體積血腫患者血清PDGF表達水平動態(tài)變化的比較(±s，μg/L)

表3 不同體積血腫患者血清PDGF表達水平動態(tài)變化的比較(±s，μg/L)

與對照組比較:1)P＜0.05，2)P＜0.01;與發(fā)病＜48 h相比:3)P＜0.05，4)P＜0.01;與發(fā)病第4天相比:5)P＜0.05，6)P＜0.01;與發(fā)病第8天相比:7)P＜0.05

組別 n ＜48 h 第4天 第8天 第12天對照組26 342.6±35.3 - - -少量出血組 23 434.2±44.72) 427.3±41.42) 384.9±38.51)3)5) 352.3±32.64)6)7)中量出血組 32 514.6±63.72) 506.4±55.22) 466.5±50.62)3)5) 401.7±47.41)2)3)5)大量出血組 29 623.7±68.62) 602.0±61.72) 596.4±57.22) 511.7±43.82)3)5)7)

3 討論

腦出血因其發(fā)病急、致死率、致殘率高，即使入院病人也有30% ～40%的死亡率，并且50% ～70%的存活者遺留癱瘓、失語等嚴重殘疾，因此腦出血成為難治性的腦血管疾病，尤其是出血后腦水腫常常會導(dǎo)致病情的惡化〔7，8〕。因此尋找一種非侵入性、快速準確診斷急性腦出血，并預(yù)測其損害程度及預(yù)后的生化檢測指標，是完善臨床診治腦出血的有效途徑。

在過去的幾十年里，一些生物標記已經(jīng)被用于一些疾病的早期診斷和病情的監(jiān)控〔9〕，腦出血后會引起機體和腦組織局部的一系列病理生理反應(yīng)并釋放一些生物化學(xué)標志物，PDGF在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中有廣泛的表達，與多種神經(jīng)系統(tǒng)的疾病有密切關(guān)系，研究顯示神經(jīng)細胞損傷時神經(jīng)膠質(zhì)細胞合成PDGF增多〔10〕。腦出血所引起的腦水腫、腦缺血或缺氧、顱內(nèi)壓升高等因素導(dǎo)致了星形膠質(zhì)細胞的大量增生和分泌，PDGF分子量較小只有28 kD，通過血腦屏障運輸?shù)窖褐?，另外腦出血續(xù)發(fā)的腦水腫所激發(fā)的炎癥反應(yīng)、受損的內(nèi)皮細胞以及血液中血小板的激活，都會導(dǎo)致PDGF表達水平的升高〔11〕。

FAM評價法是一種綜合軀體功能評價法，F(xiàn)AM評分越低，說明神經(jīng)功能缺損的越嚴重，隨著患者病情的好轉(zhuǎn)FAM評分會逐漸升高〔12〕，本研究說明患者血清PDGF的表達水平與患者的病情密切相關(guān)。PDGF表達水平與患者的預(yù)后有一定的相關(guān)性。其可能的機制是腦出血量越大，壓迫周圍的腦組織越多使血腫周圍水腫、炎癥反應(yīng)越強烈的，星形膠質(zhì)細胞增生越活躍，各種機制促使PDGF合成分泌大量增加，所以PDGF表達水平也就反映出了患者病情的嚴重程度。

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