于書海 ，王 軍 ，何 文

(1.河南省人民醫(yī)院藥學(xué)部，河南 鄭州 450003;2.武漢大學(xué)人民醫(yī)院藥學(xué)部，湖北 武漢 430060)

口腔潰瘍發(fā)病率較高，病情易反復(fù)，而常用的溶液劑、膏劑、糊劑、散劑等均存在口腔黏膜滯留性不理想的缺點(diǎn)，影響治療效果。口腔黏附片利用生物黏附性高分子材料的特性，可較長時間地黏附于口腔黏膜，發(fā)揮長效、高效的作用[1]。乙酰螺旋霉素為臨床應(yīng)用較多的十六碳大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，體內(nèi)外抗菌效果均優(yōu)于螺旋霉素，并對黏膜炎癥有較好的療效[2]。本試驗(yàn)前期主要對乙酰螺旋霉素口腔黏附片的處方進(jìn)行初步研究[3]，現(xiàn)擬在進(jìn)一步完善其處方的基礎(chǔ)上，對不同處方的乙酰螺旋霉素口腔黏附片的性質(zhì)作全面考察，為臨床治療口腔潰瘍提供一種長效、高效的新制劑奠定基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

單沖壓片機(jī)(上海天翔健臺制藥機(jī)械有限公司);UV－2201型紫外分光光度計(jì)(日本島津);BY－300A型片劑硬度計(jì)(上海黃海藥檢儀器有限公司);黏附力測定裝置(自制);ZRS－8型智能溶出儀(天津大學(xué)無線電廠)。乙酰螺旋霉素原料藥(廣州白云山制藥有限公司，批號111212);乙酰螺旋霉素對照品(中國食品藥品檢定所，批號110222);卡波姆934P(美國BFGoodrich公司，批號20050630);羥丙甲莖纖維素(HPMC，K4M，美國Colorco公司，批號20110611);硬脂酸鎂(亳州華元藥用輔料有限公司，批號20110414);阿斯巴甜(常州市牛塘化工廠有限公司，批號20110315);二氧化硅(鄭州瑞恒化工產(chǎn)品有限公司，批號20110129);甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品制備

依據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，固定潤滑劑及矯味劑的用量，重點(diǎn)考察黏附劑的比例，設(shè)計(jì)了5種處方，見表1。乙酰螺旋霉素口腔黏附片每片總重為25 mg，其中主藥含量5 mg，硬脂酸鎂、二氧化硅各0.25 mg，阿斯巴甜為 0.5mg。取主藥，研細(xì)過 80 目篩，其他輔料均過60目篩，混勻后，粉末直接用壓片法制備。所得片劑直徑4mm，厚度 1mm，硬度 4 kg。

表1 乙酰螺旋霉素口腔黏附片的黏附劑組成(mg/片)

2.2 含量測定方法確定

采用一階導(dǎo)數(shù)法進(jìn)行測定[4－5]。精密稱取干燥至恒重的乙酰螺旋霉素對照品25mg，置50mL容量瓶中，用人工唾液(2.38 g NaH2PO4，0.19 g KH2PO4，0.8 g NaCl溶于 1 000mL 水中)溶解，并定容，搖勻，即得乙酰螺旋霉素的對照品貯備液。精密吸取貯備液2mL，置100mL容量瓶中，用人工唾液定容，搖勻。用人工唾液作空白對照溶液，在200～400 nm波長范圍內(nèi)做紫外掃描，結(jié)果表明，乙酰螺旋霉素在233 nm處有最大吸收。按處方量精密稱取各輔料，同上述方法操作并測定，結(jié)果表明，輔料對主藥的測定有干擾。采用一階導(dǎo)數(shù)處理后，乙酰螺旋霉素在220～250 nm波長間的峰谷具有最大振幅(D)，而輔料無明顯振幅，不干擾主藥的測定，故確定測定振幅 D作為主藥含量的測定方法，見圖1。

精密吸取乙酰螺旋霉素對照品貯備液 0.1，0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0mL 置 100mL 容量瓶中，用人工唾液定容，搖勻。以人工唾液為空白對照，以振幅 D對質(zhì)量濃度 C作標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程 D=0.340C+0.057(r=0.999 7)，說明對照品貯備液質(zhì)量濃度在0.5～30μg/mL范圍內(nèi)與振幅線性關(guān)系良好。精密吸取乙酰螺旋霉素對照品貯備液 1.0，3.0，5.0 mL，置100mL容量瓶中，按處方比例加入各輔料，用人工唾液充分溶解，搖勻。以人工唾液為空白，測定過濾液的 D，計(jì)算回收率。結(jié)果低、中、高 3種質(zhì)量濃度的回收率分別為(99.39±0.20)%，(99.55±0.12)% ，(99.42±0.26)%;取 30 μg/mL 的樣品，1 d內(nèi)重復(fù)測定5次，連續(xù)測定5 d，結(jié)果日內(nèi) RSD為0.24%，日間RSD 為 0.32%。

圖1 乙酰螺旋霉素對照品及其他輔料的紫外掃描圖

2.3 膨脹率測定[6]

將F1～F5黏附片黏附于塑料背襯上，垂直放入37℃人工唾液中，分別于 30，60，90，120，150min 時取出稱片重，膨脹率為溶脹后的片重與溶脹前的片重之比，以膨脹率對時間作圖，結(jié)果見圖2?？梢?，各處方在1 h時基本達(dá)到最大膨脹率，且隨著處方中卡波姆934P用量的增加，膨脹率逐漸增大。

圖2 F1～F5各黏附片的體外膨脹率－時間曲線

2.4 體外黏附力考察

參考貼膏劑的初黏力測定法[7]，采用斜坡滾球測定。將不同型號的不銹鋼球(球號及規(guī)格均符合藥典規(guī)定)從固定于傾斜板上的黏附片(片上滴加10μL水，涂抹均勻后15 s測定)的黏性面滾過，根據(jù)供試品黏性面能夠粘住的最大球號評價其初黏性的大小。取F1～F5各黏附片各3片，應(yīng)有2片或2片以上能粘住鋼球;如有1片不能粘住，再取較小一號的鋼球進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)均能粘住;如果只有1片能粘住鋼球，而另2片只能粘住較小一號的鋼球，則應(yīng)另取3片復(fù)試，3片均應(yīng)能粘住較小一號的鋼球。測定結(jié)果顯示，F(xiàn)1及F5可黏附2號鋼球，F(xiàn)2及F4可黏附3號鋼球，而F3可黏附4號鋼球，表明F3處方制備的乙酰螺旋霉素口腔黏附片體外黏附性最佳。

2.5 體外釋放度測定

將處方F1～F5黏附片按小杯槳法進(jìn)行試驗(yàn)。人工唾液100mL為釋放介質(zhì)，溫度 37 ℃ ，轉(zhuǎn)速 100 r/min，分別于 0.5，1，2，4，6，8，10 h時定時取樣5mL，過濾，同時立即補(bǔ)加等量等溫的新鮮釋放介質(zhì)。取出的樣品過濾后測定 D值，計(jì)算累積釋放率 Q(%)，并將結(jié)果進(jìn)行方程擬合，結(jié)果見圖3和表2。表明各處方的黏附片體外釋藥均有一定的緩釋作用，符合Higuchi方程;HPMC和卡波姆934P合用時，緩釋效果比單用卡波姆934P顯著，且隨著HPMC含量的增加，藥物的釋放逐漸減慢。

圖3 各處方樣品累積釋放率－時間曲線

表2 各處方樣品的Higuchi方程

2.6 口腔滯留時間考察

對各處方黏附片在健康志愿者口腔頰部的滯留時間進(jìn)行初步考察(所涉及的體內(nèi)試驗(yàn)已獲得醫(yī)院倫理委員會通過)，結(jié)果滯留時間分別為 F1 102min，F(xiàn)2 128min，F(xiàn)3 148min，F(xiàn)4 122min，F(xiàn)5 99min?？梢?，F(xiàn)3在口腔中的滯留時間最長，與體外黏附力考察結(jié)果一致。

3 討論

試制樣品采用卡波姆與HPMC兩種黏合劑，體外黏附性及口腔滯留性均優(yōu)于兩者單用，且以1∶1比例時最佳，此時黏附性及緩釋性均滿足要求;處方中硬脂酸鎂、二氧化硅為潤滑劑，阿斯巴甜為矯味劑。本品采用粉末直接壓片法制備，片劑質(zhì)量理想，且避免了卡波姆吸濕性強(qiáng)而制粒困難的問題。試制樣品的體外釋藥速度與兩種黏附劑的用量有關(guān)，隨著HPMC用量的增加，釋藥速度減慢，說明HPMC與卡波姆相比，緩釋效果更好。而體外膨脹率測定結(jié)果表明，卡波姆的膨脹性比HPMC大，更有利于藥物的釋放，進(jìn)一步證實(shí)了體外釋藥特點(diǎn)?？谇毁N片的黏附力大小直接影響制劑在口腔中的滯留時間，從而影響藥效。本研究結(jié)果顯示，處方F3即以卡波姆934P與HPMC配比為1∶1時為最優(yōu)處方，藥效學(xué)研究有待進(jìn)一步進(jìn)行。

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