吉鴻武 鄭 川 李海山 謝 磊 張寧寧 梅 凡

（北京市動物衛(wèi)生監(jiān)督所，北京市 100044）

瘦肉精快速檢測卡的質量驗證與評價

吉鴻武 鄭 川 李海山 謝 磊 張寧寧 梅 凡

（北京市動物衛(wèi)生監(jiān)督所，北京市 100044）

為篩選出品質優(yōu)良的 “瘦肉精”快速檢測卡，保證檢測結果的準確性，本文通過測定 “檢測閾值、假陰性率、假陽性率”3個驗證參數(shù)，對6個廠家的18批次產品的質量進行驗證。結果表明，共15批次的產品符合國家相關部門要求；建議監(jiān)管單位在采購 “瘦肉精”檢測卡時，一定要進行產品質量驗證試驗；在條件受限時可優(yōu)先對 “檢測閾值”和 “假陰性率”進行驗證。

瘦肉精；快速檢測卡；質量驗證；參數(shù)

因此，在 “瘦肉精”檢測卡購置前進行質量驗證是確保檢測結果準確有效的重要手段。為篩選出品質優(yōu)良的產品，提高檢測結果的準確性，保障畜產品安全，本試驗聯(lián)系工作實際，對6個廠家18批次產品的質量進行驗證，分析驗證結果并提出建議，供同行參考。

1 材料

空白豬尿樣品：從北京市某屠宰場采集豬尿液30份，用液-質聯(lián)方法未檢測出鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇。

鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇的標準品。

鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇標準儲備液 （1 mg/mL）：稱取鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇標準品約10.0 mg，分別置于l0 mL容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度。貯存于-18℃冰箱中，有效期為1年。

鹽酸克倫特羅、萊克多巴胺和沙丁胺醇標準中間工作液 （10 g/mL）。用微量移液器移取標準儲備液100 L，置于10 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度。貯存于-18℃冰箱中，有效期為1個月。

微量移液器：單道0～1000 L。

“瘦肉精”檢測卡。樣品的檢測限為：鹽酸克倫特羅2或3mg/L、萊克多巴胺3或5mg/L、沙丁胺醇5mg/L。

陰性豬尿樣品：取空白豬尿樣品1份5 mL，置于50 mL塑料瓶中。再分別移取適量鹽酸克倫特羅的標準中間工作液加入空白豬尿中，配制濃度為0和鹽酸克倫特羅檢測卡檢測限的1/2，混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。用同樣的方法分別制備萊克多巴胺、沙丁胺醇的陰性豬尿樣品。

隨著我國經濟的發(fā)展，社會的進步，涌現(xiàn)出越來越多的新型能源，而且為了滿足綠色環(huán)保發(fā)展需求，社會對于煤炭需求量逐年降低，煤炭價格也長期處于低位徘徊，使得煤炭供給能力一直處于過剩狀態(tài)，最終導致供應關系出現(xiàn)失衡。此外，隨著行業(yè)的進一步發(fā)展，供給側問題也逐漸浮出水面，煤炭企業(yè)經濟效益每況愈下。所以，為了使煤炭行業(yè)實現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展戰(zhàn)略，需要實施供給側結構性改革，為煤炭行業(yè)注入新活力，幫助煤炭企業(yè)提高經濟收益。

陽性添加樣品：取空白豬尿樣品1份5mL，置于50 mL塑料瓶中。再移取適量鹽酸克倫特羅標準中間工作液加入空白豬尿中，配制濃度為鹽酸克倫特羅檢測卡檢測限的1和2倍，混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。用同樣的方法制備萊克多巴胺、沙丁胺醇陽性豬尿樣品。

2 方法

2.1 驗證參數(shù)及判定標準

檢測閾值：即試劑條能檢測出來的最低濃度值。當檢測閾值等于檢測卡的檢測限時，該檢測卡為合格；當其小于或大于檢測限時，會導致假陽性率或假陰性率的產生。

假陰性率和假陽性率：國內外對于快速檢測技術的基本原則是 “絕不能有假陰性，但允許有一定的假陽性”。按照農業(yè)部獸藥殘專家委員會評審快速檢測卡備案的有關要求，快速檢測卡的假陽性率應小于10%。

2.2 檢測卡的使用步驟及結果判讀

按照產品說明書對樣品進行前處理，用滴管滴加 2～3滴（約 70 L）檢測液樣品到劑卡孔內。加后計時，反應2～5分鐘后判讀結果，檢測結果穩(wěn)定，保存30分鐘后結果不會發(fā)生變化。結果判定：C線顯色，T線不顯色，判為陽性；C線顯色，T線顯色，判為陰性。

表1 各公司 “瘦肉精”檢測卡質量驗證結果

2.3 檢測限測定

用鹽酸克倫特羅檢測卡分別對陰性豬尿樣品、陽性豬尿樣品進行檢測，每個樣品兩個重復，記錄下來呈現(xiàn)陽性的最低濃度值。如果高濃度陽性豬尿樣品也不呈現(xiàn)陽性，則配制濃度更高的陽性豬尿樣品進行檢測，直至出現(xiàn)陽性結果為止。

2.4 假陽性率的測定

取空白的豬尿樣品30份，每份量為10mL，按照陰性豬尿樣品的制備方法，制備60份陰性豬尿樣品。用檢測卡檢測，每個樣品做兩個重復，統(tǒng)計假陽性數(shù)，按照下面的公式計算假陽性率。

假陽性率=假陽性數(shù)/樣品總數(shù)×100%

2.5 假陰性率的測定。取空白的豬尿樣品30份，每份量為10 mL，按照陽性豬尿樣品的制備方法，制備60份陽性豬尿樣品，用檢測卡進行檢測，每個樣品做兩個重復，統(tǒng)計假陰性數(shù)，按照下面的公式計算假陰性率。

假陰性率=假陰性數(shù)/樣品總數(shù)×100%

3 結果與分析

本研究使用6個廠家18批次的“瘦肉精”檢測卡對120份樣品進行了檢測限、假陽性率、假陰性率的驗證，結果見表1。

3.1 質量驗證的必要性

從驗證結果來看，每個公司的檢測卡產品均存在檢測閾值偏高、假陽性或假陰性的問題，產品質量良莠不齊，個別公司的產品質量不符合國家要求。所以，畜產品加工企業(yè)或者監(jiān)管部門在采購 “瘦肉精”檢測卡時，一定要進行產品質量驗證試驗，以避免結果誤判和資金浪費。

3.2 檢測閾值的測定

從表1可以看出，大部分產品的檢測閾值與檢測限一致；但1號與6號產品的檢測閾值超出檢測限2倍左右，產品判定為不合格。因此，我們在選擇產品時，應當首先剔除這2個不合格產品。當檢測閾值高于或低于檢測限時，會出現(xiàn)一定的假陰性率或假陽性率，導致問題畜產品流入市場或增加確認經費的投入，因此檢測閾值是快速檢測卡質量驗證的首要指標。

3.3 假陰性率的測定

由于通過檢測閾值去掉了2個產品，因此本試驗并未發(fā)現(xiàn)假陰性產品，假陰性率為0，剩余產品符合國家有關要求。除了產品本身的問題，引起假陰性的原因還包括：個別樣本中含有較為特殊物質或亞型成分，檢測卡受潮、活性下降或失活，在超過規(guī)定時間后讀取結果等。因此，在產品確定后，應當規(guī)范檢測卡的保管和使用。

3.4 假陽性率的問題

結果顯示，共有6批次產品存在假陽性，其中1個產品的假陽性率超過10%，判定為不合格。當檢測卡靈敏度過高，尿液中含有和 “瘦肉精”類似代謝物或樣品已被污染 （例如自來水中殘留的漂白粉，屬于強氧化劑，會影響抗原抗體反應的進行）時，都將導致出現(xiàn)假陽性。此時須用其他方法確認該檢測結果。

3.5 驗證參數(shù)的選擇

檢測卡的驗證參數(shù)共3個，分別是：檢測閾值、假陰性率、假陽性率。檢測閾值是非常重要的，只有二者相等時，才可進一步進行驗證。同時，假陰性率也比較重要，根據(jù)國家相關規(guī)定，檢測卡用于篩選方法時，假陰性率必須為零。而一定的假陽性率是國家允許的。由于產品質量驗證試驗涉及到液-質聯(lián)用儀等設備材料，且過程較復雜，對試驗條件和資金有一定要求。因此，在試驗條件受限的情況下，可優(yōu)先對“檢測閾值”、 “假陰性率”這兩個參數(shù)進行驗證。

4 結論

本試驗通過質量驗證，根據(jù)檢測閾值、假陰性率、假陽性率3個驗證參數(shù)，證明6家公司共15批次的產品符合國家相關部門要求。同時，由于產品存在差異，監(jiān)管單位在采購 “瘦肉精”檢測卡時，一定要進行產品質量驗證試驗；在試驗條件受限的情況下，可優(yōu)先對 “檢測閾值”、 “假陰性率”進行驗證。

S816.7；S851.34

A

1673-4645（2013）03-0065-02

2013-02-26