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        150例血尿相差顯微鏡法與UF-100法尿紅細(xì)胞形態(tài)檢查結(jié)果比較分析

        2013-09-01 08:58:06李芳文常若云
        衛(wèi)生職業(yè)教育 2013年7期
        關(guān)鍵詞:尿沉渣血尿顯微鏡

        李芳文,王 芳,常若云

        (甘肅省人民醫(yī)院,甘肅 蘭州 730000)

        自Birch和Fassett于1979年首先用相差顯微鏡觀察尿紅細(xì)胞(RBC)形態(tài),將血尿分為腎小球性血尿和非腎小球性血尿以來,盡管傳統(tǒng)相差顯微鏡法尿RBC形態(tài)檢查對(duì)鑒別血尿來源特異性較高,但該方法敏感性較低,且操作繁瑣,易受尿液標(biāo)本及主觀因素影響。有報(bào)道指出,不同檢驗(yàn)人員發(fā)出報(bào)告的變異系數(shù)達(dá)到30%。隨著UF-100尿沉渣流式細(xì)胞分析儀(以下簡(jiǎn)稱UF-100)的廣泛使用,國(guó)內(nèi)外不少學(xué)者[1~3]對(duì)UF-100識(shí)別尿液中各種有形成分,如RBC、WBC、上皮細(xì)胞、管型、結(jié)晶、細(xì)菌,甚至霉菌及影響因素進(jìn)行了研究。本文采用相差顯微鏡法和UF-100法對(duì)150例血尿進(jìn)行尿RBC形態(tài)學(xué)檢查,并對(duì)結(jié)果進(jìn)行比較分析,現(xiàn)報(bào)告如下。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        150 例血尿標(biāo)本來自我院門診及住院病人,其中93例經(jīng)詳細(xì)的病史,血、尿生化和免疫學(xué)檢測(cè)及腎活檢等證實(shí)為腎小球疾病,包括輕微腎小球病變33例,IgA腎病24例,腎小球腎炎33例,其他腎炎3例。另57例根據(jù)病史及有關(guān)影像學(xué)檢查,結(jié)合膀胱鏡或病理活檢確診為非腎小球性疾病,包括輸尿管結(jié)石34例,急性膀胱炎11例,膀胱腫瘤4例,腎盂腫瘤2例,前列腺癌5例,其他疾病1例。

        1.2 儀器與試劑

        UF-100尿沉渣流式細(xì)胞分析儀為日本Sysmex公司生產(chǎn),稀釋液、鞘液及雙色熒光染料均為配套試劑;相差顯微鏡為日本Olympus公司生產(chǎn);離心機(jī)。

        1.3 方法

        取空腹第二次新鮮中后段晨尿20ml,分裝于兩只尿沉渣專用定量刻度離心管,其中一管用于UF-100自動(dòng)吸樣檢測(cè);另一管置離心機(jī)以1500r/min離心5min,棄上清液留沉淀0.2ml,混勻后注入計(jì)數(shù)池置相差顯微鏡下高倍視野計(jì)數(shù)尿RBC數(shù)量,同時(shí)觀察200個(gè)尿RBC,計(jì)算尿RBC畸形率及畸形種類,1h內(nèi)完成尿沉渣分析。

        1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)

        UF-100檢測(cè)結(jié)果參照Hyodo提供的實(shí)驗(yàn)診斷標(biāo)準(zhǔn):≥80%尿RBC的前向散射光強(qiáng)度(Fsc)≥84ch稱為均一型RBC,即非腎小球性血尿;≥80% 尿RBC的Fsc≤126ch且<80% 的RBC Fsc≥84ch稱為非均一型RBC,即腎小球性血尿;<80%RBC的Fsc≤126ch,且<80% 的RBC Fsc>84ch稱為混合型血尿。相差顯微鏡檢查結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn):當(dāng)>80%的尿RBC形態(tài)呈均一型(大小形態(tài)一致)診斷為非腎小球血尿;當(dāng)>80%的尿RBC呈多樣型(大小不等、形態(tài)多樣,有突起、棘細(xì)胞樣、面包圈樣、皺縮狀、靶樣等)時(shí)診斷為腎小球性血尿;均一型及多樣型均未達(dá)到80%診斷為混合型血尿。

        1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

        采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件包,相關(guān)性分析采用χ2檢驗(yàn)。

        2 結(jié)果

        2.1 相差顯微鏡法和UF-100法檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性分析(見表1)

        表1 相差顯微鏡法與UF-100法檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性分析

        表1顯示,兩種方法檢測(cè)各型RBC的符合率分別為90.7%、92.0%、75.0%,說明相差顯微鏡法與UF-100法檢測(cè)結(jié)果符合率較高,相關(guān)性較好(P<0.01)。

        2.2 相差顯微鏡法及UF-100法檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷符合率比較分析(見表2)

        表2 相差顯微鏡法及UF-100法檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷符合率[n(%)]

        表2顯示,相差顯微鏡和UF-100檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷符合率分別是93.5%、94.7%和89.2%、87.7%,儀器法稍高于相差顯微鏡法,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,相差顯微鏡和UF-100檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷符合率較高,相關(guān)性較好。

        3 討論

        (1)腎小球性血尿形成的機(jī)理目前尚不清楚,可能形成的原因是:RBC通過病變的腎小球?yàn)V膜受到擠壓損傷;腎小管不同的pH和滲透壓持續(xù)變化,介質(zhì)張力及代謝產(chǎn)物(脂肪酸、溶血卵磷脂、膽酸等)等多種因素的影響,使已受損的尿RBC發(fā)生形態(tài)改變甚至破裂。尿RBC形態(tài)學(xué)檢查對(duì)血尿來源的鑒別診斷及腎小球疾病的治療及療效觀察有重要意義。

        (2)尿RBC形態(tài)學(xué)檢查方法較多,但迄今為止無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),常用的是相差顯微鏡法和儀器法。各種方法本身有其優(yōu)缺點(diǎn),目前認(rèn)為相差顯微鏡法高倍鏡檢查細(xì)胞微細(xì)結(jié)構(gòu)不清楚,尿RBC少時(shí)無法識(shí)別其形態(tài),有報(bào)道指出,不同檢驗(yàn)人員報(bào)告的變異系數(shù)達(dá)到30%。國(guó)內(nèi)顧可梁教授強(qiáng)調(diào)采用多種不同放大倍數(shù),不同鏡頭識(shí)別尿中各種成分的重要性[1]。UF-100尿沉渣流式細(xì)胞分析儀采用了流式細(xì)胞計(jì)數(shù)分析原理,能提供尿RBC數(shù)量、散點(diǎn)圖、直方圖及尿RBC前向散射光多項(xiàng)指標(biāo),對(duì)尿RBC形態(tài)的鑒別診斷具有重要價(jià)值,但大量細(xì)菌、酵母菌、結(jié)晶存在尿中可干擾檢測(cè)結(jié)果[2,3]。本文對(duì)150例血尿標(biāo)本尿RBC形態(tài)進(jìn)行了相差顯微鏡法和UF-100法檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性分析,兩種方法檢測(cè)尿RBC形態(tài)符合率較高,相關(guān)性較好。有報(bào)道指出,腎小球性血尿時(shí)尿蛋白陽性多見(約占54.3%),以+~++為主;非腎小球性血尿,尿蛋白陽性僅占20%左右,且以±~+為主。腎小球性血尿,尿潛血以+~++為主,而非腎小球性血尿則以+++為主。尿S G和pH值改變對(duì)尿RBC形態(tài)產(chǎn)生影響。因此,筆者認(rèn)為,可結(jié)合相差顯微鏡法、UF-100尿沉渣流式細(xì)胞分析儀、尿化學(xué)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行綜合分析,對(duì)血尿來源作出更為準(zhǔn)確、可靠的診斷。

        (3)從尿RBC形態(tài)相差顯微鏡法及UF-100法檢測(cè)結(jié)果與臨床診斷符合率比較分析,說明UF-100法對(duì)鑒別血尿來源是一種可靠的方法,但大量細(xì)菌、酵母菌、結(jié)晶存在尿中可干擾檢測(cè)結(jié)果,依然需要特異性較高的相差顯微鏡法進(jìn)行驗(yàn)證。

        [1]顧可梁.尿沉渣檢查的新進(jìn)展[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2004,22(4):395.

        [2]武蓉珍,劉勝勇,徐麗珍,等.草酸鈣結(jié)晶對(duì)UF-100尿沉渣分析儀測(cè)定結(jié)果的影響[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2002,20(4):222-223.

        [3]馬駿龍,叢玉隆.菌尿?qū)δ蛞悍治鰞x測(cè)定紅細(xì)胞的影響[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志,1999,22(4):205-207.

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