王傳禹 常志順 劉艷麗 楊 斌 鮑曉偉

（云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，昆明 650224）

云南部分鴨場鴨新城疫血清學(xué)檢測與結(jié)果分析

王傳禹 常志順 劉艷麗 楊 斌 鮑曉偉

（云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院，昆明 650224）

鴨新城疫（ND）是由鴨副黏病毒Ⅰ型感染引起鴨的一種傳染病，又稱鴨副黏病毒病。患鴨的主要癥狀以急性水樣腹瀉、兩腳無力或癱瘓、呼吸困難及母鴨產(chǎn)蛋下降為特征；部分病鴨出現(xiàn)點(diǎn)頭、搖頭或扭頸等神經(jīng)癥狀。主要病理變化是患鴨腦、肝及消化道和呼吸系統(tǒng)器官黏膜充血、出血、壞死、潰瘍或呈現(xiàn)彌散性點(diǎn)狀出血[1]。近年來，由鴨源NDV引起的鴨臨床發(fā)病、死亡、生產(chǎn)性能下降的病例日趨增多，對(duì)養(yǎng)鴨業(yè)危害嚴(yán)重。為了解云南省鴨群中NDV的感染情況，2008～2012年，我們進(jìn)行了此項(xiàng)血清學(xué)調(diào)查。筆者采用HA、HI等方法，用禽ND抗原對(duì)云南省主要鴨場的血清樣品和卵黃進(jìn)行ND抗體檢測。現(xiàn)將檢測情況報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品和鴨蛋 對(duì)云南昆明、宜良、晉寧、安寧、玉溪、建水等地35個(gè)養(yǎng)鴨場不同日齡不同品種的鴨群，采集檢測樣品389份，其中血清樣品154份，鴨蛋235份。

1.1.2 抗原 新城疫血凝抑制抗原及陽性血清由云南省畜牧獸醫(yī)科學(xué)院提供。

1.2 方法

1.2.1 0.5%雞紅細(xì)胞懸液 采成年公雞血，用20倍量pH7.0～7.2磷酸緩沖鹽水洗滌3～4次，每次以2 000 r/ min離心3～4 min，最后1次5 min，用磷酸緩沖鹽水配成0.5%懸液。

1.2.2 血清樣品處理 將分離的鴨血清與5%的雞紅細(xì)胞等量混合，作用1 h，3 000 r/min離心5 min，吸取上清進(jìn)行血凝抑制（HI）試驗(yàn)。

1.2.3 卵黃樣品處理 待檢的鴨蛋蛋殼清潔后，分離蛋清與卵黃，取0.5 ml卵黃，加等量PBS，振蕩均勻，再加1 ml的氯仿，振蕩均勻，3000 r/min離心10 min，吸取上清進(jìn)行血凝抑制（HI）試驗(yàn)。

1.2.4 檢測方法 血凝（HA）和血凝抑制（HI）試驗(yàn)在96孔v型玻板上進(jìn)行，操作方法按《GB/T 16550-2008新城疫診斷技術(shù)》的規(guī)定進(jìn)行。

1.2.5 判定標(biāo)準(zhǔn) 血清抗體和卵黃抗體的HI效價(jià)≥1：16（4 log2）判為陽性。

2 結(jié)果

2.1 6個(gè)地區(qū)鴨場鴨ND抗體檢測結(jié)果

對(duì)35個(gè)商品肉鴨場、蛋鴨場及種鴨場的血清和卵黃樣品進(jìn)行了ND抗體檢測，結(jié)果22個(gè)鴨場的采樣中部分或全部樣品ND抗體陽性，鴨場陽性率62.86%；389份檢測樣品中抗體陽性數(shù)198份，陽性率50.89%。詳見表1。

2.2 商品肉鴨場ND血清抗體檢測結(jié)果

13個(gè)商品肉鴨場的124份鴨血清樣品中有9個(gè)鴨場檢出ND抗體，但有7個(gè)鴨場的血清樣品抗體滴度≤3 log2，2個(gè)鴨場檢出陽性血清樣品7份，陽性率5.65 %（7/124），4個(gè)鴨場的血清樣品未檢出ND抗體。檢測結(jié)果詳見表2。

表1 6個(gè)地區(qū)鴨場鴨ND抗體陽性率統(tǒng)計(jì)表

表2 品肉鴨場ND血清抗體檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

表3 種鴨場ND血清或卵黃抗體檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

表4 商品蛋鴨場ND卵黃抗體檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)表

2.3 種鴨場ND血清或卵黃抗體檢測結(jié)果

10個(gè)種鴨場血清或卵黃樣品均檢出ND抗體，鴨場陽性率90%（9/10），7個(gè)種鴨場的卵黃樣品和2種鴨場的血清樣品抗體陽性率30%～100%不等，1個(gè)種鴨場的血清樣品ND抗體滴度≤3 log2。檢測結(jié)果詳見表3。

2.4 商品蛋鴨場ND卵黃抗體檢測結(jié)果

檢測的12個(gè)蛋鴨場的卵黃樣品種僅均JnD1一個(gè)鴨場樣品的抗體陽性率為0，其余鴨場樣品的抗體陽性率在12.5%～100%不等，平均抗體滴度在1.88～7.1之間，不同地區(qū)不同鴨場ND抗體滴度差異較大。檢測結(jié)果詳見表4。

3 討論

3.1 傳統(tǒng)觀點(diǎn)認(rèn)為水禽是NDV的天然貯存宿主，感染后很少或不表現(xiàn)臨床癥狀。但自1997年以來，國內(nèi)不斷有水禽感染NDV發(fā)病的報(bào)道，特別近兩年來某些鴨源NDV強(qiáng)毒株對(duì)鴨具有明顯的致病性。用禽副黏病毒Ⅰ型（ND）抗原對(duì)鴨的ND抗體進(jìn)行檢測，可以較好的反映鴨NDV感染或疫苗免疫情況，這對(duì)鴨新城疫的研究具有一定的意義。從檢測結(jié)果看，云南省部分鴨場的ND抗體陽性率較高，達(dá)62.86%，檢測樣品的陽性率50.89%，這與國內(nèi)周錦萍[2]、崔華敏[3]、吳峻華[4]等在上海、河北、福州等地對(duì)鴨群的NDV血清學(xué)調(diào)查抗體陽性率方面的檢測結(jié)果基本一致。說明我國鴨源NDV的流行范圍廣、流行趨勢和規(guī)律復(fù)雜，雖然血清中出現(xiàn)NDV特異性抗體不能反映感染毒株的情況，但足以確證PMV-1（NDV）或其他型的PMV感染已經(jīng)發(fā)生。在水禽生產(chǎn)中，鴨副黏病毒病的防制應(yīng)引起足夠重視，加強(qiáng)獸醫(yī)防疫措施。

3.2 比較表2、表3、表4，商品肉鴨場血清樣品陽性率為5.65%，平均抗體滴度非常低，而種鴨場及部分商品蛋鴨場的樣品陽性率較高，ND平均抗體滴度在5 log2左右，且離散度較小。說明不同地區(qū)、不同品種、不同日齡的鴨群NDV感染率存在明顯差異，但抗體滴度高低與日齡大小相關(guān)性不大，部分種鴨場及商品蛋鴨場較整齊的鴨群ND抗體是鴨源NDV感染還是ND疫苗免疫的抗體有待進(jìn)一步檢測。

[1] 陳伯倫.鴨病[M] .北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2008.

[2] 周錦萍，孫泉云，劉佩紅，等.上海地區(qū)近幾年鴨新發(fā)病毒性傳染病的血清學(xué)調(diào)查[J].中國家禽.，2005，27（3）：9-11.

[3] 崔華敏，董兵，張芳，等.河北部分地區(qū)鴨新城疫血清學(xué)調(diào)查[J].中國獸醫(yī)雜志，2008，44（7）：40-41.

[4] 吳峻華，福州市部分鴨場新城疫感染情況的調(diào)查[J].養(yǎng)禽與禽病防治，2008，（2）：42-43.