王文文，吳春媛，趙蜀崖

（海南省人民醫(yī)院胃鏡室，海南?？?71100）

IL-8基因多態(tài)性與幽門(mén)螺旋桿菌易感性的相關(guān)研究

王文文，吳春媛，趙蜀崖

（海南省人民醫(yī)院胃鏡室，海南?？?71100）

目的探討白細(xì)胞介素-8（IL-8）-251A/T基因多態(tài)性與幽門(mén)螺旋桿菌易感性的關(guān)系。方法收集我院消化內(nèi)科2009年1月至2011年6月間的幽門(mén)螺旋桿菌陽(yáng)性的慢性胃炎患者共276例作為實(shí)驗(yàn)組，陰性患者301例作為對(duì)照組。利用PCR-RFLP技術(shù)檢測(cè)基因多態(tài)性，利用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果AA、AT、TT三種基因型的檢出例（率）在實(shí)驗(yàn)組中為45例(16.3%)、152例(55.1%)、79例(28.6%)，對(duì)照組中為107例(35.5%)、146例(48.5%)、48例(15.9%)，組間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。等位基因A/T在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中的檢出率分別為43.8%/56.2%和59.8%/40.2%，組間比較差異亦具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論白細(xì)胞介素-8基因-251A/T基因多態(tài)性與幽門(mén)螺旋桿菌的易感性具有密切關(guān)聯(lián)，等位基因T可能是幽門(mén)螺旋桿菌感染的危險(xiǎn)因素。

白細(xì)胞介素；幽門(mén)螺旋桿菌；基因多態(tài)性

幽門(mén)螺旋桿菌(Helicobacter pylori，Hp)是具有高感染率的慢性致病菌，其感染可引起人類(lèi)發(fā)生慢性胃炎等胃慢性疾病[1]，與胃癌的發(fā)生發(fā)展具有密切關(guān)系[2]。不同人群中Hp的感染率不同，且致病機(jī)制復(fù)雜，近些年來(lái)研究的熱點(diǎn)逐漸轉(zhuǎn)向基因研究方面：一方面一系列新的致病基因逐漸被發(fā)現(xiàn)，另一方面是與幽門(mén)螺旋桿菌易感性有關(guān)的人類(lèi)基因也被不斷報(bào)道[3-4]。其中白細(xì)胞介素IL-1、IL-8、腫瘤壞死因子α等基因的多態(tài)性與幽門(mén)螺旋桿菌的感染存在相關(guān)性[3-5]。-251A/T是IL-8的啟動(dòng)子上的多態(tài)位點(diǎn)，關(guān)于該位點(diǎn)的多態(tài)性與幽門(mén)螺旋桿菌的感染及胃癌發(fā)生的關(guān)聯(lián)性存在爭(zhēng)議，本研究試圖以海南人群為研究對(duì)象，對(duì)該課題進(jìn)行深入的研究。

1 資料與方法

1.1 一般資料對(duì)2009年1月至2011年6月間在我院消化內(nèi)科進(jìn)行治療的慢性胃炎患者進(jìn)行檢測(cè)，276例幽門(mén)螺旋桿菌感染者作為實(shí)驗(yàn)組，病程0.5~22年，年齡34~65歲，平均44.1歲，男女比例為167:109。同期進(jìn)行治療的非幽門(mén)螺旋桿菌感染患者301例作為對(duì)照組，病程0.5~21年，年齡35~64歲，平均43.5歲，男女比例為181:120。兩組患者的性別、年齡及其他基本資料差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 基因多態(tài)性的檢測(cè)方法所有患者采集外周抗凝血2 ml，利用血液基因組DNA提取試劑盒（上海生工）提取基因組DNA。引物序列為：下游引物為5'-aagcttgtgtgctctgctgtctct-3'，上游引物為5'-aatgcctt-gctccaactgc-3'。擴(kuò)增聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)擴(kuò)增體系為20μl，包括模板DNA0.2μg，引物各0.2~0.5μmol/L，4種dNTP各200 μmol/L，Taq DNA聚合酶(北京天根公司產(chǎn)品)1U。PCR循環(huán)參數(shù)為：首先在94℃進(jìn)行酶2 min的熱變性，隨后進(jìn)行32個(gè)循環(huán)反應(yīng)。利用MunI酶對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行酶切過(guò)夜，酶切產(chǎn)物在1.5%的瓊脂糖凝膠中電泳，經(jīng)溴化乙錠(EB)染色在UVI band凝膠成像系統(tǒng)(英國(guó)UVI tec公司產(chǎn)品)中觀察結(jié)果并照相。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理?；蝾l率采用基因計(jì)數(shù)法計(jì)算。組間基因型與等位基因頻率比較用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 -251 A/T突變位點(diǎn)的基因型檢出樣本數(shù)及基因型分布頻率經(jīng)χ2檢驗(yàn)，兩組間TT基因型和AA基因型的基因型頻率比較，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P< 0.05)，而AT基因型在兩組間則差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見(jiàn)表1。

表1 -251A/T突變位點(diǎn)的基因型檢出樣本數(shù)及基因型分布頻率

2.2 -251 A/T等位基因A和T的檢出率及分布頻率等位基因A/T在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中的檢出率分別為43.8%/56.2%和59.8%/40.2%，其組間差異亦具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 -251A/T等位基因A和T的檢出率及分布頻率

3 討論

研究表明，胃酸分泌的缺乏是Hp的易感因素之一[6]。白細(xì)胞介素IL-8可促進(jìn)IL-1的表達(dá)，而后者具有抑制胃酸分泌的作用。因此，IL-8表達(dá)水平的高低與胃酸的分泌量密切相關(guān)。-251A/T是IL-8基因啟動(dòng)子區(qū)的一個(gè)多態(tài)位點(diǎn)，等位基因A或者T與對(duì)該基因表達(dá)的影響存在爭(zhēng)議。如張笑添等[7]的研究認(rèn)為等位基因A可提升啟動(dòng)子的活性，促進(jìn)該基因的表達(dá)量。而Lee等[8]的研究則發(fā)現(xiàn)等位基因T的表達(dá)活性高于A的表達(dá)活性。因此，有必要對(duì)該課題進(jìn)行深入的研究。

本研究以海南慢性胃炎患者為研究對(duì)象，對(duì)276例幽門(mén)螺旋桿菌感染者和301例非感染者進(jìn)行了-251A/T多態(tài)性的分析。結(jié)果顯示AA、AT、TT三種基因型的檢出例（率）在實(shí)驗(yàn)組中為45例(16.3%)、152例(55.1%)、79例(28.6%)，對(duì)照組中為107例(35.5%)、146例(48.5%）、48例(15.9%)。對(duì)AA、AT、TT三種基因型分別進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果顯示，TT基因型和AA基因型在組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而AT基因型在兩組間差無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。等位基因A/T在實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組中的檢出率分別為43.8%/56.2%和59.8%/40.2%，組間差異亦具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。從本實(shí)驗(yàn)結(jié)果中可以推斷出等位基因T的表達(dá)水平低于A的表達(dá)水平。這與張笑添等[7]的研究結(jié)果一致。

綜上所述，等位基因T可能是幽門(mén)螺旋桿菌的易感基因，而A則可能對(duì)該菌具有一定的抗性。

[1]于凌琪.幽門(mén)螺旋桿菌的研究進(jìn)展[J].中國(guó)慢性病預(yù)防與控制, 2010,18(2):218-219.

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Correlation between-251A/T polymorphism of IL-8 and the susceptibility of Helicobacter pylori.

WANG Wen-wen,WU Chun-yuan,ZHAO Shu-ya.Gastroscopy Room,Hainan Provincial People's Hospital,Haikou 571100, Hainan,CHINA

ObjectiveTo investigate the correlation between 251A/T polymorphism of IL-8 and the susceptibility of Helicobacter pylori.MethodsA total of 276 cases with Helicobacter pylori positive were chosen as the study group,and 301 cases with Helicobacter pylori negative as the control group.The gene polymorphism was detected by PCR-RFLP and the data were statistically analyzed.ResultsThe cases(rate)of AA,AT,TT genotypes detected was 45(16.3%),152(55%),79(28.7%)in the study group and 107(35.5%),146(48.5%),48(15.9%)in the control group. Difference between the two groups has statistical significance(P<0.05).Alleles of A/T in the study group and the control group was 43.8%/56.2%and 59.3%/40.7%,respectively,and the difference was statistically significant(P<0.05). Conclusion-251A/T polymorphism of IL-8 is closely related with the susceptibility of Helicobacter pylori,and the T allele may be the risk factors of Helicobacter pylori infection.

Interleukin;Helicobacter pylori;Gene polymorphism

R378.2

A

1003—6350（2013）16—2344—02

10.3969/j.issn.1003-6350.2013.16.0970

2013-01-24)

趙蜀崖。E-mail：zsy4444@163.com