林廣民

（漯河市中心醫(yī)院檢驗科，河南 漯河 462000）

同型半胱氨酸測定試劑性能評價

林廣民

（漯河市中心醫(yī)院檢驗科，河南 漯河 462000）

目的對利德曼同型半胱氨酸測定試劑盒進行性能評價。方法用日立7600-110全自動生化分析儀P模塊檢測血清中同型半胱氨酸含量，對試劑的準確度，精密度，線性，靈敏度，特異性，穩(wěn)定性，系統(tǒng)比對等對試劑性能驗證和系統(tǒng)評估。結果試劑準確度。批內精密度，批間精密度，線性范圍，靈敏度，特異性，穩(wěn)定性，系統(tǒng)比對均達到要求標準。結論利德曼同型半胱氨酸試劑符合臨床診斷試劑標準要求，可以用于臨床診斷。

同型半胱氨酸；性能評價；試劑

高同型半胱氨酸是心腦血管疾病重要，獨立的危險因素，同型半胱氨酸濃度升高與心腦血管疾病的發(fā)生密切相關，同型半胱氨酸升高還可引起神經管畸形及先天性畸形等出生缺陷類疾病[1-10]。具有較高的臨床應用價值。本文參照廠家試劑說明書和美國國家實驗室標準化委員會（NCCLS）EP10-A2文件要求，對利德曼同型半胱氨酸測定試劑盒進行初步評價。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器和試劑

日立7600-110全自動生化分析儀。北京利德曼生物工程有限公司同型半胱氨酸測定試劑盒 批號012263K

1.1.2 校準液和質控血清

北京利德曼生物工程有限公司校準液 北京利德曼生物工程有限公司質控血清。伯樂質控品低值，中，高值。

1.1.3 樣本

體檢無溶血，黃疸，脂血混和血清20mL。高值同型半胱氨酸樣本一份。

1.2 方法

1.2.1 準確度評價

按實驗室常規(guī)操作程序，進行同型半胱氨酸項目定標，測定利德曼高，中，低三個水平質控品，每份質控品重復測定3次，計算3次重復測定的均值。計算每份質控品均值與靶值的偏差，將每份樣本的偏差與企業(yè)標準（偏差＜±5%）進行比較。

1.2.2 精密度評價

批內精密度將伯樂質控品高，中，低三個濃度水平分為20份同批連續(xù)測定，計算標準差（sd）和變異系數（cv），與企業(yè)標準cv＜5%進行比較批間精密度，連續(xù)20d測定伯樂高，低兩個個濃度水平質控品，每天測定一次。收集20d測定的數據，計算sd 和cv，與衛(wèi)生部室間質量評價活動的最大允許誤差cv＜6%比較。

表1 準確度評價實驗結果

表2 精密度評價實驗結果

1.2.3 線性范圍評價

將高值樣本血清進行倍比稀釋，比例分別為1/2，1/4，1/8，1/16，1/32，1/64，每個樣本測定兩次，測定順序為原液，1/2，1/4，1/8，1/16，1/32，1/64.0，和0，1/64，1/32，1/16，1/8，1/4，1/2，原液。求理論濃度與實測均值之間的線性關系，滿足線性相關系數r＞0.975，斜率在0.97～1.03之間。

1.2.4 分析靈敏度

取空白樣本（生理鹽水），重復測定20次。計算均值（χ—±s）和標準差（sd），則分析靈敏度等于 ±2sd，當檢測系統(tǒng)給出小于分析靈敏度的值，即可報告為無分析物檢出。

1.2.5 特異性評價，在混合血清中分別添加膽紅素，血紅蛋白，三酰甘油，紅細胞，等干擾物質，分析添加干擾物質樣本和對照樣本的測值偏差。判定標準：測定結果偏差＞10%判定存在干擾

1.2.6 系統(tǒng)比對將利德曼試劑和和光試劑分別按照試劑說明書在日立7600-110全自動生化分析儀上設定參數，試劑盒定標后，同時檢測血清樣本40例，樣本濃度包含高值及正常值，濃度要求有梯度分布，測定在2h內完成。結果數據以利德曼試劑測定值為X，和光試劑測定值為Y，計算回歸方程及相關系數r，要求相關系數r＞0.975.

1.2.7 穩(wěn)定性

開瓶上機穩(wěn)定性，在第一次校準后，開瓶置于儀器試劑倉內，以后不再校準，每天檢測質控品，記錄失控時試劑在機器內放置天數，

1.3 統(tǒng)計學處理

實驗數據采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件處理。

2 結 果

2.1 準確度評價測定結果

見表1。表1說明質控品三個濃度水平偏差均小于廠家聲明標準5%符合要求。

2.2 精密度評價結果

見表2。表2說明 質控品三個濃度水平批內測定變異系數小于廠家說明書要求的5%，批間測定20日，變異系數小于衛(wèi)生部室間質量評價6%，符合要求。

2.3 線性評價

測試數據，經過計算，在濃度0-70μmol/L范圍內理論濃度Y與實測數值X之間的線性方程為Y=0.984X-0.2096 相關系數r=1.000 符合廠家說明書聲明標準。

2.4 靈敏度評價

分析靈敏度的計算值為0.1μmol/L，符合廠家說明書要求。

2.5 分析測定當膽紅素＜20mg/dL，血紅蛋白＜500mg/dL，三酰甘油＜500mg/dL，抗壞血酸＜50mg/dL，紅細胞＜0.4%時，測定結果偏差＜10%，對檢測結果未產生顯著干擾。符合廠家說明書性能要求。

2.6 系統(tǒng)比對

在日立7600-110生化分析儀P模塊上，利德曼試劑和和光試劑測定數據相關系數r為0.998，相關性良好，符合要求。

2.7 穩(wěn)定性

試劑在儀器試劑倉內貯存可穩(wěn)定不失控天數＞30d，符合廠家說明書聲明。

3 討 論

同型半胱氨酸是心腦血管疾病的獨立危險因子。同型半胱氨酸的測定越來越受到臨床醫(yī)師的重視，評價結果表明，豪邁公司的同型半胱氨酸試劑盒（雙試劑循環(huán)酶法），各項性能指標能達到臨床診斷試劑性能要求。適合在全自動生化分析儀上使用。

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R446；R54

B

1671-8194（2013）18-0103-02