楊繼斌，劉 勇，黃 亮

(南昌大學(xué)第一附屬醫(yī)院急診科, 南昌 330006）

隨著心肺復(fù)蘇技術(shù)的不斷提高和推廣，心臟驟停猝死患者自主循環(huán)恢復(fù)率不斷提高，但隨著自主循環(huán)建立，機(jī)體往往又出現(xiàn)心臟停搏后綜合征［1］，表現(xiàn)為全身性的缺血再灌注損傷，致使心臟驟停患者的生存率一直不高，其具體機(jī)制尚不明確。 因此建立一種簡(jiǎn)單、有效、穩(wěn)定的心臟驟停模型，對(duì)于研究心臟驟停及心肺腦復(fù)蘇過(guò)程中機(jī)體的病理生理變化和開(kāi)創(chuàng)新的復(fù)蘇治療手段具有重要的意義。 電刺激誘發(fā)室顫致心臟驟停是國(guó)內(nèi)外常用的一種動(dòng)物模型制做方法，各模型中對(duì)于不同物種的誘顫能量、誘顫時(shí)間及心臟驟停時(shí)間長(zhǎng)短尚沒(méi)有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，為此，本研究以犬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，建立了一種穩(wěn)定的室顫心臟驟停模型。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

成年、健康犬30 只，體質(zhì)量（15±2）kg，雌雄不限，由南昌大學(xué)動(dòng)物科學(xué)部提供，實(shí)驗(yàn)前48 h 飼養(yǎng)于動(dòng)物房中，溫度18～25 ℃，濕度40%～60%。 術(shù)前禁食12 h，自由飲水。

1.2 儀器設(shè)備

M8001A 飛利浦有創(chuàng)心電監(jiān)護(hù)儀，德國(guó)飛利浦公司；電流控制器，南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院物理教研室研制；雙相波除顫儀，美國(guó)Philips 公司；PB760 呼吸機(jī)，美國(guó)Puritan-Bennett 公司。

1.3 麻醉、誘顫及分組

犬稱(chēng)重后以氯胺酮20 mg·kg-1及安定5 mg 混合液肌注進(jìn)行基礎(chǔ)麻醉，5～10 min 后將麻醉犬仰臥位固定于操作臺(tái)上，四肢皮下置探針連接心電監(jiān)護(hù)儀，行氣管插管，無(wú)菌手術(shù)行左側(cè)股靜脈置管，林格氏液100 mL·h-1靜脈滴注，以3%戊巴比妥鈉2 mL·h-1靜脈間斷給藥維持麻醉，經(jīng)股動(dòng)脈置入6F 動(dòng)脈測(cè)壓導(dǎo)管，管內(nèi)預(yù)留肝素連接壓力傳感器檢測(cè)動(dòng)脈血壓。 經(jīng)右頸外靜脈插入普通起搏導(dǎo)線(xiàn)，當(dāng)導(dǎo)管進(jìn)入到右心室內(nèi)壁，心電圖顯示特異性心室波時(shí)固定好電極導(dǎo)線(xiàn)，心電導(dǎo)聯(lián)設(shè)為Ⅱ?qū)?lián)，電極導(dǎo)線(xiàn)連接電流控制器，5 mA 交流電持續(xù)1～2 s，觀察心電圖和動(dòng)脈壓，出現(xiàn)室顫波及動(dòng)脈壓失去波動(dòng)，可判斷室顫成功，成功標(biāo)準(zhǔn)：1）心電圖顯示室顫波；2）動(dòng)脈壓曲線(xiàn)近似一條直線(xiàn)，壓力降至10～20 mmHg（1.3～2.6 kPa）以下。 30 只犬根據(jù)CA 時(shí)間不同分為3 組、每組10 只，分為CA 3 min 組、CA 5 min 組和CA 8 min組。

1.4 復(fù)蘇及復(fù)蘇后治療

各組犬分別于誘顫后3、5、8 min 開(kāi)始，嚴(yán)格按照2010 年心肺復(fù)蘇新指南開(kāi)始心肺復(fù)蘇（CPR），給予150 J 能量除顫，并立即胸外按壓，連接呼吸機(jī)控制呼吸，通氣頻率為10～12 次·min-1，潮氣量為12～15 mL·kg-1，吸呼比為1∶3，吸入氧濃度30%。 復(fù)蘇至自主循環(huán)恢復(fù)（ROSC）。 ROSC 判斷標(biāo)準(zhǔn)：1）心電圖顯示有效心律（包括竇性心律、交界性心律及室性自主心律）；2）收縮壓＞60 mmHg（8 kPa），且持續(xù)時(shí)間大于3 min；3）可觸及大動(dòng)脈波動(dòng)。復(fù)蘇30 min 無(wú)效者放棄復(fù)蘇。 對(duì)于ROSC 后犬繼續(xù)心電監(jiān)護(hù)6 h，期間根據(jù)具體情況給予相應(yīng)的呼吸循環(huán)支持，并連續(xù)觀察72 h 內(nèi)所有實(shí)驗(yàn)犬的存活情況。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 各組犬基本生理參數(shù)及誘顫情況

每組10 只犬，各組動(dòng)物的生理學(xué)參數(shù)見(jiàn)表1，組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 誘顫前犬的心電圖監(jiān)測(cè)及動(dòng)脈壓監(jiān)測(cè)見(jiàn)圖1，經(jīng)右心室起搏導(dǎo)管5 mA 電流誘顫1～2 s 后30 只犬均出現(xiàn)典型的室顫波，動(dòng)脈壓下降至1.3～2.6 kPa 以下，曲線(xiàn)失去波動(dòng)。 各組犬生理學(xué)參數(shù)比較P＞0.05，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 見(jiàn)圖2。

表1 各組犬的基本生理參數(shù)表

2.2 復(fù)蘇情況

圖1 犬生理指標(biāo)檢測(cè)

圖2 誘發(fā)室顫時(shí)的心電圖及動(dòng)脈波形

各組自主循環(huán)恢復(fù) （ROSC） 情況為CA 3 min組：90%（9/10）、CA 5 min：80%（8/10）、CA 8 min：20%（2/10），ROSC 率3 min 組和CA 5 min 組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；CA 8 min 組與其他2組之間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05)。 如表2。各組ROSC 犬存活時(shí)間比較，CA 3 min 組有7 只存活72 h， 而CA 5 min 和8 min 組分別于12 h 內(nèi)全部死亡。CA 3 min 組、CA 5 min 組及CA 8 min 組存活時(shí)間分別為：（64.22±23.33）、（6.26±4.10）、（3.0±1.41）h、CA 3 min 組與其他2組存活時(shí)間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），CA 5 min 和CA 8 min 組之間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2 各組犬ROSC 率比較表

3 討論

SCD 的主要原因?yàn)樾穆墒С?，其中以室顫（VF）為多見(jiàn)，因此為了更好地研究VF 及CPR 后機(jī)體的病理生理改變，建立一個(gè)穩(wěn)定且可靠的室顫動(dòng)物模型有著重要的意義。

在心臟驟停動(dòng)物模型的制備中，常常要根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇不同的方法，筆者根據(jù)以往研究經(jīng)驗(yàn)，選用犬作為研究對(duì)象，并采用電刺激誘發(fā)室顫，結(jié)果顯示模型相對(duì)穩(wěn)定可靠。 電刺激誘發(fā)室顫常用的方法有：1）經(jīng)胸體外電休克；2）開(kāi)胸直視下心外膜電擊；3）經(jīng)右心室起搏導(dǎo)管誘發(fā)室顫。

經(jīng)胸體外電休克制作心臟驟停模型主要用于大動(dòng)物的研究，如兔、豬、犬等，國(guó)外Vaagenes 等［3］、Miclescu 等［4］及國(guó)內(nèi)金修才等［5］、劉煥兵等［6］均以犬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，采用體外經(jīng)胸壁20～60 V 交流電擊制作的心臟驟停模型均取得了較好的結(jié)果，然而這種方法誘發(fā)心臟驟停的交流電流選擇及電擊持續(xù)時(shí)間卻沒(méi)有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，而且不但容易引起胸壁局部電燒傷，還容易自動(dòng)復(fù)律，往往需要多次電擊誘導(dǎo)。

開(kāi)胸直視下心外膜電擊建立心臟驟停模型也常應(yīng)用于豬等大型動(dòng)物，國(guó)外Krep 等［7］對(duì)豬采取直視下心外膜電擊制作心臟驟停模型，在開(kāi)胸等準(zhǔn)備過(guò)程中死亡了2 只，其他所有動(dòng)物都誘發(fā)了心臟驟停，且復(fù)蘇成功。 這種模型具有誘導(dǎo)能量低、誘導(dǎo)成功率及復(fù)蘇成功率高等優(yōu)點(diǎn)被廣泛應(yīng)用，不足之處在于開(kāi)胸后對(duì)心臟及大動(dòng)脈的損傷較大，有可能使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在準(zhǔn)備過(guò)程中意外死亡，且其產(chǎn)生的心臟驟停與臨床上有一定差異。

右心室起搏導(dǎo)管誘顫是常用的經(jīng)典模型制作方法，周正宇等［8］及黃子通等［9］用豬為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，通過(guò)頸靜脈或股動(dòng)脈置管至右心室誘發(fā)室顫成功制作了心臟驟停模型，然而實(shí)驗(yàn)用豬價(jià)格昂貴，實(shí)驗(yàn)成本較高。 相比實(shí)驗(yàn)用大鼠、家兔及豬等動(dòng)物，犬既有的心血管功能與人的很相似的優(yōu)勢(shì)，又能降低實(shí)驗(yàn)成本，因此本研究選用健康成年雜交犬為實(shí)驗(yàn)對(duì)象， 結(jié)果顯示，30 只犬均成功誘發(fā)室顫， 模型穩(wěn)定，重復(fù)性高，臨床上大多數(shù)心臟驟停是由室顫引起的，因此右心室起搏導(dǎo)管誘顫制作心臟驟停模型的病理生理機(jī)制更接近臨床。

本研究中參照以往制作的室顫模型［10］并加以改進(jìn)，誘顫能量固定為5 mA，筆者發(fā)現(xiàn)5 mA 電流能夠誘導(dǎo)出室顫，是較理想的誘顫能量，誘顫時(shí)間設(shè)定為1～2 s，結(jié)果顯示所有犬都出現(xiàn)了明顯的室顫，且無(wú)自動(dòng)復(fù)律，可見(jiàn)5 mA 電流誘顫1～2 s 能夠滿(mǎn)足模型制作的需要，相比體外交流電電擊需要高電流、自動(dòng)復(fù)律多見(jiàn)等缺點(diǎn)，本模型具有明顯的優(yōu)勢(shì)。 目前在建立CA 動(dòng)物模型時(shí)，CA 時(shí)間的長(zhǎng)短還沒(méi)有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)， 短時(shí)間的CA 可能無(wú)法復(fù)制與臨床接近的病理生理改變，長(zhǎng)時(shí)間的CA 又可能無(wú)法順利復(fù)蘇，導(dǎo)致無(wú)法滿(mǎn)足基礎(chǔ)研究的需要，本研究結(jié)果提示CA 3 min 組及CA 5 min 組經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)的CPR 后具有較高ROSC 率，CA 3 min 組存活時(shí)間較CA 5 min及CA 8 min 長(zhǎng)，綜合比較提示CA 3 min 后進(jìn)行復(fù)蘇建立的心臟驟停復(fù)蘇模型相對(duì)其他2組更具穩(wěn)定性及可靠性，但CA 3 min 是否是研究犬心臟驟停的最佳時(shí)間復(fù)蘇時(shí)間，還有待進(jìn)一步研究。

4 結(jié)論

通過(guò)本研究，筆者認(rèn)為犬經(jīng)右心室導(dǎo)管誘發(fā)室顫制作的心臟驟停模型穩(wěn)定且可靠，操作簡(jiǎn)單易行，成本較低，能滿(mǎn)足心肺腦復(fù)蘇基礎(chǔ)研究的需要。

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