姜建國，張西如，宋更申，赫曉軍（河北省食品藥品檢驗院，石家莊 050011）

枸櫞酸噴托維林（Pentoxyverine citrate）又名咳必清，為非成癮性鎮(zhèn)咳藥，1956年被合成后由比利時聯(lián)合化學(xué)公司（Ucb）開發(fā)，國內(nèi)于1962年開始生產(chǎn)。本品臨床應(yīng)用很廣泛，主要用于治療上呼吸道感染引起的無痰干咳和百日咳等。

溶出度檢查是評價制劑品質(zhì)和工藝水平的一種有效手段，也是評價固體制劑活性成分生物利用度和制劑均勻度的一種有效方法，是口服固體制劑再評價的關(guān)鍵，因此研究者越來越關(guān)注藥品的溶出行為[1-3]。枸櫞酸噴托維林片和滴丸被收錄在2010年版《中國藥典》[4]中，標準中無溶出度檢查項，因此，按此標準進行檢驗得到的結(jié)果不能完全真實反映藥品的質(zhì)量。為提高藥品標準，嚴格控制藥品質(zhì)量，筆者對其溶出度試驗的溶出介質(zhì)進行了篩選，并確定使用0.1 mol/L鹽酸為溶出介質(zhì)；同時，采用高效液相色譜（HPLC）法測定枸櫞酸噴托維林的含量。結(jié)果表明，所建立的方法操作簡單、結(jié)果準確。

本文通過對國內(nèi)多廠家多批次樣品進行考察，對市場上流通的枸櫞酸噴托維林片和滴丸的質(zhì)量有了一定的了解，為有關(guān)部門進行監(jiān)管、提高藥品的安全性提供了一定的技術(shù)支持，也為藥品生產(chǎn)企業(yè)改進工藝指出了方向。

1 材料

LC-2010 CHT HPLC儀（日本島津公司）；UltiMate3000 HPLC儀（德國戴安公司）；1200 HPLC儀（美國Agilent公司）；D-800 LS智能藥物溶出儀、RCZ-8 B溶出試驗儀（天大天發(fā)科技有限公司）；D-800 L智能藥物溶出儀（天津大學(xué)無線電廠）；ZRS-8 G智能藥物溶出儀（天津大學(xué)無線電廠）。

枸櫞酸噴托維林對照品（批號:100432-200401，純度:100%）購自中國食品藥品檢定研究院；枸櫞酸噴托維林制劑（在全國范圍抽取該樣品，片劑共41個廠家，218批；滴丸共1個廠家，2批；規(guī)格均為25 mg）；甲醇為色譜純，鹽酸為分析純。

2 溶出條件的確定

2.1 方法及轉(zhuǎn)速

采用2010年版《中國藥典》（二部）附錄ⅩC溶出度測定法第一法[4]，轉(zhuǎn)速為100 r/min。

2.2 溶出介質(zhì)的確定

（1）溶出介質(zhì)1:水；（2）溶出介質(zhì)2:0.1 mol/L HCl；（3）溶出介質(zhì)3:pH 4.5醋酸鹽緩沖液（取醋酸鈉2.99 g加水適量使溶解，加2mol/L的醋酸溶液14ml，用水稀釋到1000ml，即得）；（4）溶出介質(zhì)4:pH 6.8緩沖鹽（取0.2 mol/L磷酸二氫鉀溶液250 ml，與0.2 mol/L氫氧化鈉溶液112 ml混合后，加水稀釋至1000 ml，即得）。

分別選用上述4種不同溶出介質(zhì)對同一批片劑樣品及同一批滴丸樣品進行測定，并采用各時間點6片（丸）制劑的平均溶出量為縱坐標，溶出時間為橫坐標，繪制溶出曲線，見圖1 A、B。

圖1 片劑和滴丸在不同溶出介質(zhì)中的溶出曲線比較A.片劑；B.滴丸Fig 1 Comparison of dissolution curves of tablet and dropping pills in different dissolution mediumsA.tablet；B.dropping pills

試驗結(jié)果表明，樣品在溶出介質(zhì)2中較在其他3種溶出介質(zhì)中溶出較快，且平臺區(qū)溶出量較高。故選用溶出介質(zhì)2即0.1 mol/L鹽酸作為本次試驗的溶出介質(zhì)。

2.3 溶出曲線的測定

從41個片劑生產(chǎn)廠家中，抽取某知名企業(yè)的1批片劑樣品進行考察，以0.1 mol/L鹽酸作為溶出介質(zhì)，分別于5、10、15、20、30、45、60 min等時間點測定6片樣品的溶出量，繪制溶出曲線詳見圖2 A。同時，抽取1批滴丸樣品進行溶出考察，分別于相同時間點測定6丸樣品的溶出量，見圖2 B。

圖2 片劑和滴丸在0.1mol/L鹽酸中的溶出曲線A.片劑；B.滴丸Fig 2 Dissolution curves of tablet and dropping pills in 0.1 mol/LHClA.tablet；B.dropping pills

2.3.1 測定時間點和結(jié)束點的確定。根據(jù)溶出度測定要求，在溶出曲線中當?shù)?次連續(xù)2點溶出量平均值均在85%以上，且該2點溶出度差值在5%以內(nèi)時，以首先達到溶出量平均值85%的時間點為結(jié)束點。根據(jù)圖2 A，可將30 min作為片劑的結(jié)束點。

根據(jù)考察全國41個廠家218批片劑樣品的結(jié)果來看，取樣30 min時有133批樣品溶出量達不到80%，涉及生產(chǎn)廠家30家；取樣時間為45 min時，仍有20個生產(chǎn)廠家的70批樣品達不到80%；甚至有4個生產(chǎn)廠家的樣品在45 min時，樣品平均溶出量不足40%；還有6個廠家的樣品平均溶出量達不到60%。

同樣，根據(jù)溶出測定要求及圖2 B，可將30 min作為滴丸劑樣品考察結(jié)束時間點。用不同介質(zhì)測得廠家產(chǎn)品溶出曲線可知:采用4種不同介質(zhì)時，取樣時間30 min與45 min無顯著性差異，故確定取樣時間點為30 min。

2.3.2 計算各時間點溶出結(jié)果的變異系數(shù)。從結(jié)束時間點向前依次選取5個時間點，分別列出各時間點6片樣品的溶出量并計算其變異系數(shù)。結(jié)果，第一時間點溶出結(jié)果的變異系數(shù)略大于20%，第二時間點溶出結(jié)果的變異系數(shù)略大于10%，其他時間點溶出結(jié)果的變異系數(shù)均未超過5%，基本達到溶出測定要求。

同樣，滴丸樣品所選取的時間點溶出結(jié)果的變異系數(shù)均未超過10%，達到溶出測定要求。

2.4 限度的確定

根據(jù)溶出測定要求，應(yīng)根據(jù)參比樣品溶出曲線測定的結(jié)果，以第1次連續(xù)2點平均溶出量均在85%以上，且該2點溶出量平均值之間差值在5%以內(nèi)時，取第一時間點作為質(zhì)量標準的取樣時間點，即“2.3.1”項下片劑的結(jié)束時間點；并將該點的溶出量減去15%作為溶出限度（即Q值），即91%減去15%，Q值應(yīng)為76%。同時，考察全國各廠家樣品，發(fā)現(xiàn)不同生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品，溶出行為差異很大。因此，對各廠家的情況進行對比后，結(jié)合2010年版《中國藥典》（二部）附錄ⅩC溶出度測定法的有關(guān)要求，建議片劑的溶出限度為75%。

同樣，由“2.3.1”項下滴丸劑的結(jié)束時間點，該點的溶出量減去15%作為Q值，即97%減去15%，Q值應(yīng)為82%。根據(jù)2批樣品的考察結(jié)果，確定滴丸的溶出限度為80%。

3 測定方法與結(jié)果

3.1 色譜條件

色譜柱:Alltima C18（250mm×4.6mm，5μm）；流動相:水（取三乙胺10ml，用水稀釋至1000ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至3.0）-甲醇（45∶55），流速:1.0 ml/min；檢測波長:215 nm；進樣量:20μl。

3.2 溶液的制備

對照品溶液的制備:精密稱取枸櫞酸噴托維林對照品適量，用0.1 mol/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋制成每1 ml中約含28 μg的溶液，即得。

供試品溶液的制備:取供試品，按“2.1”項下方法進行溶出度試驗，以0.1 mol/L鹽酸溶液900 ml為溶出介質(zhì)，30 min時取溶液適量，濾過，取續(xù)濾液即得。

取上述2種溶液進樣，記錄色譜圖，見圖3 A、B。

3.3 線性范圍

圖3 高效液相色譜圖A.對照品；B.供試品；1.枸櫞酸噴托維林Fig 3 HPLC chromatogramsA.substance control；B.test sample；1.pentoxyverine citrate

精密稱定枸櫞酸噴托維林對照品14.02mg，置于100ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取1.0、3.0、5.0、7.5、10.0ml，分別置于25ml量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密量取20μl進樣，記錄色譜圖，以溶液的質(zhì)量濃度（c）為橫坐標，峰面積（A）為縱坐標，進行線性回歸。得線性方程為:A＝1.4300×104c－4.2323×10－2（r＝0.9999），表明枸櫞酸噴托維林檢測質(zhì)量濃度線性范圍為5.608～56.08μg/ml。

3.4 精密度試驗

取對照品溶液，連續(xù)進樣6次，峰面積RSD為0.10%，表明方法精密度良好。

3.5 回收率試驗

精密稱取枸櫞酸噴托維林對照品適量，按處方比例加入輔料，用溶出介質(zhì)配制成相當于測定濃度50%、80%、100%的溶液，按“3.2”項下方法處理樣品，在選定的色譜條件下測定，計算回收率。結(jié)果平均回收率為100.32%～101.29%，RSD＜0.76%（n＝3），表明該方法的準確度較高，能滿足制劑分析的要求，詳見表1。

表1 回收率試驗結(jié)果（n＝3）Tab 1 Results of recovery test（n＝3）

3.6 輔料的干擾試驗

取輔料按制劑的處方（缺枸櫞酸噴托維林）比例配制成相應(yīng)的溶液，在選定的色譜條件下測定。結(jié)果顯示，輔料在主峰保留時間處均無吸收，對測定無干擾。

3.7 穩(wěn)定性試驗

將同一樣品制成的供試品溶液在8 h內(nèi)每隔2 h進樣1次，考察溶液的穩(wěn)定性。結(jié)果顯示，樣品溶液在室溫（25℃）放置8 h枸櫞酸噴托維林的含量無變化，RSD為0.5%。

3.8 測定結(jié)果

對全國41個廠家的218批片劑樣品和1個廠家的2批滴丸樣品，按擬定的溶出度測定方法測定，結(jié)果見圖4（每批樣品分別為6粒制劑的平均溶出度數(shù)據(jù)）。

圖4 不同廠家枸櫞酸噴托維林片劑和滴丸的溶出曲線A、B、C.片劑；D.滴丸Fig 4 Dissolution curves of Pentoxyverine citrate tablets and dropping pills from different factoriesA，B，C.tablets；D.dropping pills

4 討論

根據(jù)對41個生產(chǎn)廠家的218批片劑樣品檢測結(jié)果，按照擬定的溶出度測定方法和限度（30 min，限度75%），顯示有28家生產(chǎn)企業(yè)的121批（55.5%）樣品低于規(guī)定限度。說明目前國內(nèi)生產(chǎn)的枸櫞酸噴托維林片在質(zhì)量上存在較大差異。因此，在2010年版《中國藥典》（二部）收載的枸櫞酸噴托維林片質(zhì)量標準中增加溶出度控制檢查項目非常必要。

片劑樣品試驗結(jié)果還表明，同一生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的不同批次樣品，溶出行為也存在明顯差異。如30 min時，部分批次的樣品溶出量高達80%以上，有的樣品只有30%左右。說明生產(chǎn)企業(yè)的處方或生產(chǎn)工藝還存在不科學(xué)或不穩(wěn)定的因素。為保證用藥安全有效，建議有關(guān)企業(yè)盡快完善處方和改進生產(chǎn)工藝。

從國家食品藥品監(jiān)督管理局網(wǎng)站查知，目前國內(nèi)僅有3家枸櫞酸噴托維林滴丸生產(chǎn)企業(yè)。本次樣品僅得到1家企業(yè)的2批樣品，2批樣品30 min時的溶出量均達到了90%以上，檢驗結(jié)果雖然代表性差，但試驗結(jié)果明顯好于片劑樣品。在一定程度上也反映了滴丸劑樣品優(yōu)于片劑樣品的質(zhì)量。

[1]孫俊.鹽酸氯吡格雷片溶出度方法研究[J].中國藥房，2010，21（45）:4292.

[2]吳涓，王洪泉，黃蓓琳，等.不同廠家格列齊特片溶出度考察[J].中國藥房，2005，16（4）:300.

[3]詹云麗，陳日添，王小惠.感冒清片的溶出度考察[J].中國藥房，2002，13（4）:236.

[4]國家藥典委員會.中華人民共和國藥典:二部[S].2010年版.北京:中國醫(yī)藥科技出版社，2010:524-525、附錄ⅩC.