[摘要] 目的 探討血液儲(chǔ)存時(shí)間對(duì)紅細(xì)胞免疫功能影響情況。方法 分析該血站采集的無(wú)償獻(xiàn)血標(biāo)本80份檢測(cè)資料,所采集的血液和CPD保養(yǎng)液進(jìn)行充分的混勻,逐步封閉成3段,4 ℃保存,分別觀察血液儲(chǔ)存1 d、15 d、30 d RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8情況。結(jié)果 血液儲(chǔ)存15 d、30 d RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8均低于血液儲(chǔ)存1 d,同時(shí)血液儲(chǔ)存30 d RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8均低于血液儲(chǔ)存15 d,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 要盡量為患者輸注采集時(shí)間在2周之內(nèi)的血液在臨床輸血上,這樣輸血的安全系數(shù)可以提高。
[關(guān)鍵詞] 血液儲(chǔ)存時(shí)間;紅細(xì)胞免疫功能
[中圖分類號(hào)] R457.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742(2013)01(c)-0178-02
輸血是臨床搶救患者的重要手段之一,其安全性關(guān)系到患者的生命安全[1]。同時(shí)血液的保存時(shí)間是有限的,觀察血液儲(chǔ)存時(shí)間和紅細(xì)胞免疫功能的變化的研究,和患者的輸血效果關(guān)系密切[2]。為探討血液儲(chǔ)存時(shí)間對(duì)紅細(xì)胞免疫功能影響情況,現(xiàn)通過(guò)對(duì)2012年6月該站80例標(biāo)本血液儲(chǔ)存時(shí)間對(duì)紅細(xì)胞免疫功能影響情況進(jìn)行分析,并報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
選取該血站采集的無(wú)償獻(xiàn)血標(biāo)本80份作為本次觀察對(duì)象,血液標(biāo)本的各項(xiàng)指標(biāo)均符合獻(xiàn)血標(biāo)準(zhǔn),男女比例、年齡分布狀態(tài)等一般性資料平均,無(wú)明顯差異。將所采集的血液和CPD保養(yǎng)液進(jìn)行充分的混勻,向細(xì)管小辮內(nèi)注入,留取0.5 mL/份作為新鮮的血液標(biāo)本進(jìn)行當(dāng)天的檢測(cè),其余通過(guò)封閉成3段,4 ℃保存進(jìn)行備檢。
1.2 儀器與方法
1.2.1 儀器 全自動(dòng)生化分析儀。
1.2.2 紅細(xì)胞C3b受體(RBC-C3b)花環(huán)率、紅細(xì)胞免疫復(fù)合物(RBC-IC)花環(huán)率均通過(guò)郭峰法進(jìn)行測(cè)定,紅細(xì)胞超氧化物歧化酶(RBC-SOD),白介素8(IL-8)通過(guò)放射免疫法進(jìn)行測(cè)定,試劑盒。
1.2.3 方法 紅細(xì)胞C3b受體花環(huán)率實(shí)驗(yàn):選取清滌后的紅細(xì)胞0.1 mL配成濃度為1.25×107/mL的紅細(xì)胞懸液。用生理鹽水將凍干補(bǔ)體致敏酵母菌洗滌離心1次,配成濃度為1×108/mL懸液。取紅細(xì)胞懸液50 μL加補(bǔ)體致敏酵母菌懸液50 μL,充分混勻在試管內(nèi),置30 min的水浴,水溫為37 ℃,加用生理鹽水100 mL稀釋混勻,加0.25%戊二醛50 mL固定,取出涂片做瑞氏染色,計(jì)數(shù)200個(gè)紅細(xì)胞在高倍鏡下,陽(yáng)性花環(huán)為1個(gè)紅細(xì)胞結(jié)上2個(gè)或2個(gè)以上酵母菌的細(xì)胞,RBC-C3b受體活性指標(biāo)為換算成百分率。測(cè)定RBC-SOD、RBC-IC:方法與RBC-C3b酵母花環(huán)實(shí)驗(yàn)相同,僅把致酵母菌換成未致酵母菌。結(jié)果判斷同前。IL-8仿真實(shí)驗(yàn):第1管內(nèi)加全血0.2 mL和0.9%氯化鈉溶液0.2 mL,第2支試管進(jìn)行充分的混勻, 37℃水浴60 min,2 500 r/min離心,取上清液0.1 mL,通過(guò)放射免疫試劑盒操作步驟進(jìn)行測(cè)定IL-8。
1.3 觀察指標(biāo)
1.3.1 觀察血液儲(chǔ)存1 d、15 d、30 d RBC-C3b和RBC-IC情況。
1.3.2 觀察血液儲(chǔ)存1 d、15 d、30 d RBC-SOD和IL-8情況。
1.4 統(tǒng)計(jì)方法
采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 15.0建立數(shù)據(jù)庫(kù),以t檢驗(yàn)對(duì)計(jì)量資料進(jìn)行分析。
2 結(jié)果
血液儲(chǔ)存1 d、15 d、30 d RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8情況(如表1)血液儲(chǔ)存15 d、30 d RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8均低于血液儲(chǔ)存1 d,同時(shí)血液儲(chǔ)存30 d RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8均低于血液儲(chǔ)存15 d,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3 討論
關(guān)于紅細(xì)胞免疫是1981年Siegel提出了這一新概念即“紅細(xì)胞免疫系統(tǒng)”,免疫學(xué)研究的新領(lǐng)域得到開(kāi)拓[3]。1982年郭峰實(shí)驗(yàn)證實(shí)補(bǔ)體調(diào)理的病原體和各種腫瘤細(xì)胞可直接被紅細(xì)胞粘附。1985年,福斯里德在體外通過(guò)對(duì)比實(shí)驗(yàn)證明紅細(xì)胞促吞噬作用與紅細(xì)胞CR1和SOD酶活性有關(guān)[4]。紅細(xì)胞有識(shí)別、粘附、濃縮、殺傷抗原、清除CIC的能力,加入機(jī)體免疫調(diào)控,同時(shí)有完整的自我調(diào)控系統(tǒng), 紅細(xì)胞天然免疫缺陷在很多疾病免疫發(fā)病機(jī)制中,占有很重要的地位。紅細(xì)胞免疫粘附功能通過(guò)補(bǔ)體C3受體(C3b)實(shí)現(xiàn)的[5]。C3受體(C3b)與血液循環(huán)中的免疫復(fù)合物粘附、轉(zhuǎn)運(yùn)到肝、脾等器官,巨噬細(xì)胞將免疫復(fù)合物奪下,并將其吞噬。由于血液循環(huán)中95%的C3b受體存在于紅細(xì)胞表面,且紅細(xì)胞與白細(xì)胞數(shù)量之比為500:1,故血液循環(huán)中大量免疫復(fù)合物是由紅細(xì)胞粘附清除的,因此C3b受體、紅細(xì)胞免疫復(fù)合物反映了紅細(xì)胞免疫功能。在正常狀態(tài)下,人紅細(xì)胞CR1可將大部分IC黏附并將其帶至肝臟、脾臟,最后由巨噬細(xì)胞予以清除,因此CR1是紅細(xì)胞免疫功能的重要物質(zhì)基礎(chǔ)。研究表明[6],在疾病等外界因素作用下,產(chǎn)生的IC在肝臟、腎臟等組織器官大量沉積,將激活補(bǔ)體系統(tǒng),引起炎癥反應(yīng),導(dǎo)致肝、腎損傷等。RBC-SOD降低證明超氧陰離子不斷增加,會(huì)造成紅細(xì)胞生物膜上出現(xiàn)脂質(zhì)過(guò)氧化,造成一定程度對(duì)紅細(xì)胞生物膜結(jié)構(gòu)和功能的破壞,使得紅細(xì)胞損傷和死亡。并且氧自由基的大量堆積會(huì)造成蛋白質(zhì)變性和交聯(lián),促使體內(nèi)酶和激素失活,降低患者的機(jī)體反應(yīng)能力、免疫功能。IL-8是紅細(xì)胞膜上趨化因子受體的配體,同時(shí)IL-8還可以趨化白細(xì)胞引起炎性反應(yīng)。分析該血站采集的無(wú)償獻(xiàn)血標(biāo)本80份檢測(cè)資料,所采集的血液和CPD保養(yǎng)液進(jìn)行充分的混勻,逐步封閉成3段,4 ℃保存,分別觀察血液儲(chǔ)存1 d、15 d、30 d RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8情況,結(jié)果表明,血液儲(chǔ)存15 d、30 d RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8均低于血液儲(chǔ)存1 d,同時(shí)血液儲(chǔ)存30 d RBC-C3b、RBC-IC、RBC-SOD和IL-8均低于血液儲(chǔ)存15 d,提示血液在貯存期間之內(nèi)受到多種因素影響,在形態(tài)學(xué)和生化反應(yīng)方面發(fā)生不同程度的變化,隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng),變化明顯增強(qiáng)。臨床輸血過(guò)程中,除了考慮組織細(xì)胞供氧生理特點(diǎn)之外,還要將紅細(xì)胞免疫功能的測(cè)定作為輸血應(yīng)用與否的重要指標(biāo)。綜上所述,輸血的安全系數(shù)可以提高,在臨床輸血中盡量為患者輸注采集時(shí)間在2周之內(nèi)的血液的前提下。
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(收稿日期:2012-09-18)