目前檢測孔雀石綠方法有實驗室標(biāo)準(zhǔn)方法及現(xiàn)場快速篩查方法。實驗室的標(biāo)準(zhǔn)檢測方法主要是高效液相色譜法、高效液相色譜-質(zhì)譜法，能夠提供較高的靈敏度和回收率，但是色譜法需要昂貴的儀器，費時且檢測成本高，不適用于大量樣品的篩選，也難在基層檢測單位以及食品企業(yè)推廣使用，同時檢測時間仍很難滿足企業(yè)產(chǎn)品質(zhì)量安全控制的實際需求?，F(xiàn)場快速篩查方法快速、經(jīng)濟但只是起到對待檢樣品的初步快速篩查，實驗結(jié)果受人為因素影響較大，不能準(zhǔn)確定性、定量和及時記錄傳輸結(jié)果。

現(xiàn)本方法采用北京六角體科技發(fā)展有公司限研制的便攜干式分析儀，結(jié)合六角體科技研制的孔雀石綠快速檢測試劑盒-柱凈化點滴板比色法，利用便攜干式分析儀記錄色斑達(dá)到現(xiàn)場定性定量快速準(zhǔn)確檢測孔雀石綠的目的。水產(chǎn)品中孔雀石綠快速提取樣液經(jīng)過柱色譜分離凈化及隱色孔雀在線快速衍生轉(zhuǎn)化成有色孔雀石綠，分離衍生樣液并濃縮于聚四氟乙烯點滴板上，采用便攜干式分析儀快速定量檢測，設(shè)計了5個添加水平（1.0、2.0、5.0、10.0、20.0μg/kg）6次重復(fù)試驗。結(jié)果表明，方法線性范圍為0～20.0μg/ kg；檢測限均為1.0μg/kg，回收率在70%～85%之間，RSD在3.6%～12.5%之間，在30分鐘內(nèi)完成整個檢測過程。本方法操作簡單、檢測時間短、對實驗人員素質(zhì)要求不高、可準(zhǔn)確定量檢測水產(chǎn)品中孔雀石綠含量，并可現(xiàn)場記錄傳輸結(jié)果，可以滿足基層檢測及執(zhí)法單位的需求。

實驗部分

1.儀器、設(shè)備和試劑

便攜干式分析儀（北京六角體科技發(fā)展有限公司）；

孔雀石綠快速檢測試劑盒（北京六角體科技發(fā)展有限公司）。

2.實驗方法

（1）檢測范圍

魚、蝦等水產(chǎn)品肌肉組織。（2）技術(shù)指標(biāo)

檢測下限：1.0μg/kg。（3）樣品前處理

樣品前處理操作如圖1所示。

結(jié)果與討論

1.干式分析儀快速測定條件的選擇

在進(jìn)行試驗測試之前，應(yīng)先對儀器工作條件進(jìn)行選擇設(shè)置工作。首先打開軟件界面，然后對檢測項目設(shè)置及企業(yè)基本信息設(shè)置進(jìn)行填寫，之后對卡類型進(jìn)行選擇，最后將檢測卡放入卡槽，點擊開始測試按鈕進(jìn)行結(jié)果的測定。其流程如圖2。

（1）檢測項目設(shè)置

檢測項目選擇孔雀石綠，食品種類選擇魚肉（蝦肉）。

抽樣時間的設(shè)置根據(jù)具體抽取樣品的時間設(shè)置。

稀釋倍數(shù)根據(jù)實際稀釋情況填寫，如果在試驗操作中沒有對樣品進(jìn)行稀釋則填寫1，如試驗操作過程中將樣液進(jìn)行了稀釋，則填寫相應(yīng)的稀釋倍數(shù)，得到的測試結(jié)果要乘以稀釋倍數(shù)才是最終的試驗結(jié)果。

樣品名稱及檢測單位根據(jù)實際情況填寫。

（2）企業(yè)基本信息設(shè)置

企業(yè)基本信息設(shè)置里包括生產(chǎn)企業(yè)，被抽檢企業(yè)，食品名稱，產(chǎn)品商標(biāo)，生產(chǎn)批次及產(chǎn)品規(guī)格，對這些內(nèi)容根據(jù)實際的樣品信息進(jìn)行填寫。此部分用于對樣品的測試結(jié)果進(jìn)行報告分析，不會對測試結(jié)果產(chǎn)生直接影響。

（3）卡類型選擇

卡類型選擇滲濾化學(xué)顯色卡。

2.技術(shù)驗證數(shù)據(jù)

（1）方法的線性

對空白魚肉組織樣品分別添加0、1、2、5、10、20μg/kg孔雀石綠、隱色孔雀石綠、結(jié)晶紫、隱色結(jié)晶紫標(biāo)準(zhǔn)溶液，經(jīng)前處理過程得到待測物質(zhì)，上干式分析儀測相應(yīng)的灰度值，以濃度為橫坐標(biāo)，灰度值為縱坐標(biāo)，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖3、4、5、6所示。（X為待測物濃度，Y為灰度值）；線性范圍為0～20μg/kg。標(biāo)準(zhǔn)曲線分別為Y= -3.9747X+599.67（r=0.9912）；Y= -4.3260X+598.73（r=0.9929）；Y= -4.1417X+595.90（r=0.9814）；Y= -4.1118X+607.87（r=0.9908）；X為待測物濃度，Y為灰度值；線性范圍為0～20μg/kg。

（2）方法的檢出限、添加回收率及精密度

魚肉及蝦肉組織添加回收樣品，干式分析儀測定，回收率和精密度結(jié)果如表1。本方法在1、2、5、10、20μg/kg5個添加水平，每個濃度重復(fù)測定6次，方法的回收率均在70%～85%之間。從表1中，1μg/kg添加水平符合分析質(zhì)量要求的試驗結(jié)果，確定該方法孔雀石綠、隱色孔雀石綠、結(jié)晶紫、隱色結(jié)晶紫的檢出限均為1μg/kg。

（3）方法與國標(biāo)法實際樣品檢測對照結(jié)果

實際魚樣經(jīng)國標(biāo)法GB/T 20361—2006測定結(jié)果，陽性樣品孔雀石綠為5.0μg/kg、隱色孔雀石綠為2.0μg/kg 、結(jié)晶紫為1.0μg/kg、隱色結(jié)晶紫為5.0μg/kg。采用干式分析儀分析魚樣結(jié)果（每個樣品平行測定3次），結(jié)果如表2。從表2中可看出，干式分析的方法結(jié)果與國標(biāo)法檢出的結(jié)果偏差不大，可滿足基層檢測及執(zhí)法單位的需求。