陳 煜 陜西省富平縣醫(yī)院藥劑科（富平711700）

中風（Stroke）是中醫(yī)學對急性腦血管病的統(tǒng)稱，西醫(yī)稱之為腦卒中，分為出血性和缺血性兩類。高血壓、動脈硬化、腦血管畸形、腦動脈瘤等可導致出血性中風［1］；經(jīng)過醫(yī)務工作者多年努力和臨床驗證，我國傳統(tǒng)中藥在中風方面的作用已受到了醫(yī)藥界的普遍重視［2］?；钛ńj口服液為我院院內制劑，由黃芪、當歸、赤芍、地龍、川芎、紅花、桃仁、全蝎、牛膝、桑枝、?蟲、川斷等12味中藥組成，具有益氣溫陽，活血化瘀之功效，主治氣虛血瘀之胸痹心痛心悸之證。方中黃芪為君藥，黃芪微溫補氣，氣旺血行；黃芪辛散微寒，祛瘀生新，活血不傷正，寒溫并用，瘀去絡通。當歸、紅花辛溫發(fā)散，活血行氣，為血中氣藥。又得到黃芪的固攝而不致于出現(xiàn)氣虛氣陷之狀。地龍、全蝎祛風通絡，再配合牛膝、續(xù)斷、桑枝，補益肝腎，強骨舒絡利關節(jié)，以達補氣活血、化瘀通絡之目的。其組方嚴謹，益氣溫陽，活血祛瘀，攻補兼施，祛邪不傷正，相益得彰，治療虛實夾雜胸痹心痛療效甚佳。但該制劑的制備工藝未進行系統(tǒng)研究，導致其質量不穩(wěn)定，影響療效。為了更進一步保證制劑的質量，筆者本著優(yōu)化工藝參數(shù)，并盡可能降低成本的原則，在舊工藝的基礎上，以阿魏酸為考察指標，對活血通絡口服液提取工藝中乙醇的濃度、用量及提取時間和次數(shù)等工藝參數(shù)進行科學系統(tǒng)的考察，篩選出穩(wěn)定可靠、高效經(jīng)濟的提取工藝，為其生產(chǎn)工藝改造提供科學依據(jù)。

1 儀器與試藥 LC2010－CHT液相色譜儀（Shimadzu），LCsolution化學工作站；PB3002－S電子分析天平。阿魏酸標準品（中國生物制品檢定所）；色譜分析用乙腈購自MERCK公司，其余試劑均為分析純。

藥物提?。喊刺幏奖壤Q取黃芪、當歸、赤芍、地龍、川芎、紅花、桃仁、全蝎、牛膝、桑枝、?蟲、川斷等12味中藥，共9份（藥材均購自西安萬壽路藥材市場，全部符合2010版《中國藥典》一部對應藥材項下規(guī)定）。按正交設計表加入乙醇，回流提取，回收乙醇后，冷卻抽濾，濾液待測。

2 方 法 2.1 指標選擇 復方中當歸活血通絡為主藥，其含量測定方法成熟，提取物中阿魏酸含量可用液相色譜法檢測，故此選為質量控制指標。

2.2 阿魏酸含量測定方法 供試品溶液制備：藥物提取所得濾液濃縮至約50mL，轉移至50mL量瓶中，加稀乙醇定容搖勻。精密量取濾液0.5mL，置100mL量瓶中，加入稀乙醇稀釋至刻度搖勻，過濾取濾液。

對照品溶液制備：精密稱取阿魏酸對照品適量，加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液。

測定：LC2010－CHT 液相色譜儀；C18柱（250mm×4.6mm ，5μm），流動相：乙腈－水（30：70）；檢測波長270nm，柱溫25℃；流速：1.0mL·min－1；樣品處理后自動進樣，進樣量50μL，記錄峰面積，按外標法計算阿魏酸提取量。

標準曲線繪制：制備阿魏酸梯度標準工作液進樣，測定并繪制標準曲線。得回歸曲線Y＝1367.2X＋24.231，R2＝0.9996，阿魏酸在檢測濃度范圍內線性良好。

2.3 正交試驗 為篩選出活血通絡口服液最佳制備工藝，采用正交設計試驗對其醇提水沉工藝進行優(yōu)選：即選取對提取效率最關鍵的醇濃度（A）、加醇量（B）、提取時間（C）和提取次數(shù)（D）4個影響因素，每個因素選3個水平（見表1），按L9（34）正交表進行試驗并進行方差分析，確定優(yōu)化工藝（見表2～3）。

表1 因素水平表

表2 L9（34）正交設計表

表3 阿魏酸方差分析表

3 結果與討論 由方差分析結果顯示，四個因素對阿魏酸的轉移率影響主次關系為A＞D＞C＞B，其中A因素影響最為顯著（P＜0.01），其次為C、D兩因素 （P＜0.05），而B因素的影響無顯著性意義（P＞0.05），為了節(jié)約能源和時間，我們綜合考慮選擇A2B1C2D2，即加70%乙醇6倍量提取，每次提取時間1.5h，提取2次做為最佳提取工藝。

本研究以活血通絡口服液中當歸所含成分阿魏酸為考察指標，保證了制劑質量和藥效，文獻中有關以阿魏酸為指標的當歸提取方法很多，有水蒸氣蒸餾后水提工藝［3］、乙醇回流提取工藝［4］、乙醇滲漉工藝［5］、以及近年來出現(xiàn)的SFE－CO2（超臨界 CO2）提取工藝［6］。本工藝選取最簡便操作的乙醇回流提取工藝進行了考察，在阿魏酸檢測中對流動相進行了反復試驗，確定乙腈－水（30：70）條件下樣品分離良好，并減少以往水相中加酸對儀器和色譜柱的損害。

［1］ Butcher Ken.Inflammation in intracerebral hemorrhage：clearly present，but what is its role ［J］.Neurol India，2006，54（4）：352－353.

［2］ Murphy BD，F(xiàn)ox AJ，Lee DH，et al.Identification of Penumbra and Infarct in Acute Ischemic Stroke Using Compu－ted Tomography Perfusion－Derived Blood Flow and Blood Volume Measurements［J］.Stroke，2006，37（7）：1771－1777.

［3］ 孫代華，蘆金清，周祖坤.正交試驗優(yōu)選當歸芍藥膠囊的提取工藝研究［J］.中成藥，2004，6（1）：38－40.

［4］ 胡 杰，馮麗莉，崔福德.當歸川芎中阿魏酸提取的研究［J］.時珍國醫(yī)國藥，2004，15（11）：732－733.

［5］ 趙迪加，張水寒，王宇紅.婦炎寧中當歸滲漉法提取工藝的研究及其與雙提法樣品的鎮(zhèn)痛作用比較［J］.中成藥，2007，29（9）：1360－1362.

［6］ 李桂生，馬成俊，劉志峰，等.超臨界CO2萃取法與水蒸氣蒸餾法提取當歸揮發(fā)油的比較［J］.中草藥，2001，32（7）：581－583.