近日來，媒體報道某白酒公司生產(chǎn)的產(chǎn)品中共檢測出3種塑化劑成分，分別為鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）、鄰苯二甲酸二異丁酯（DIBP）和鄰苯二甲酸二丁酯（DBP），引發(fā)公眾廣泛關(guān)注。在此之前，衛(wèi)生部規(guī)定食品中部分塑化劑限量，如DBP殘留不超過0.3mg/kg，因此白酒中塑化劑的分析成為食品安全實驗室的高度關(guān)注項目。

目前，國家標(biāo)準(zhǔn)委員會現(xiàn)已發(fā)布標(biāo)準(zhǔn)《GB/T21911-2008 食品中鄰苯二甲酸酯的測定》，使用氣相質(zhì)譜儀標(biāo)準(zhǔn)用于分析食品中塑化劑。但是考慮到氣質(zhì)方法中樣品處理后待分析液體中不能含有水這一因素，標(biāo)準(zhǔn)推薦氣質(zhì)方法不適合用于白酒中的塑化劑的分析。此外，塑化劑種類包含800多種，單依靠氣相質(zhì)譜法難以滿足逐漸擴(kuò)大的塑化劑范圍，所以國家各相關(guān)部門正在醞釀新液相色譜法來覆蓋更多的塑化劑檢測。

在媒體報道白酒中檢測出塑化劑成分后，AB SCIEX公司亞太應(yīng)用支持中心上海實驗室迅速開發(fā)了以白酒為基質(zhì)的樣品中鄰苯二甲酸酯二甲酯（DMP）、鄰苯二甲酸二異丁酯（DIBP）、鄰苯二甲酸二丁酯（DBP）、鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）、鄰苯二甲酸二異壬酯（DINP）5種常見塑化劑的解決方案。針對液相系統(tǒng)中普遍存在DBP、DIBP、DEHP等的本底干擾問題，專門開發(fā)了采用預(yù)吸附柱去除干擾的方法，以保證這些常見塑化劑的準(zhǔn)確測定。

實驗內(nèi)容

1.儀器設(shè)備和試劑

AB SCIEX公司4000 QTRAP系統(tǒng)配島津UFLC液相，Phenomenex公司Kinetex C18，100A，2.6u，100mm×4.6mm色譜柱；預(yù)吸附柱Agilent poroshell EC-C18，2.7μm，4.6mm×50mm。

標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（純品）、甲醇（色譜純）、乙醇（色譜純）、去離子水（Millipore超純水，電阻≥18.2M？·cm）。

2.色譜條件

流動相A：含0.1%甲酸水溶液，B：甲醇，流速及梯度程序見表1。

3.質(zhì)譜條件

（1）離子源參數(shù)

電離模式為ESI+；碰撞氣CAD設(shè)置6（medium）；氣簾氣Curtain gas設(shè)置25；霧化氣Gas1/Gas2設(shè)置55/55；噴霧電壓IS設(shè)置5500V；離子源溫度TEM設(shè)置600℃。

（2）化合物參數(shù)（見表2）

注：①本實驗只針對5種常見的塑化劑進(jìn)行檢測；②因為此類化合物在容器、流動相及色譜中廣泛存在，應(yīng)盡可能避免使用peek管，在液相部分盡可能用金屬管路代替peek管。

4.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

5種塑化劑用甲醇稀釋到1000mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，使用時用甲醇∶水為1∶1的溶劑稀釋到50、100、500、1000ng/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作濃度。

5.樣品制備

移取搖勻后的白酒試樣直接進(jìn)樣待質(zhì)譜測定。

實驗結(jié)果與討論

1.標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品色譜峰

DBP、DIBP、DEHP液相系統(tǒng)存在本底干擾，分析中采用預(yù)吸附柱將系統(tǒng)干擾。圖1中顯示通過使用預(yù)分析柱將色譜系統(tǒng)的雜質(zhì)干擾峰與標(biāo)準(zhǔn)溶液的色譜峰分開，這里保留時間7.3～7.8分鐘之間色譜峰為DBP、DIBP系統(tǒng)干擾，保留時間10.6分鐘色譜峰為DEHP系統(tǒng)干擾。即使利用預(yù)吸附柱能夠?qū)⒁合嘞到y(tǒng)中的干擾排除，實驗過程中仍需應(yīng)盡可能減少干擾或污染，以免影響數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。

圖1 相關(guān)色譜圖（上圖為常見5種鄰苯二甲酸酯類標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖，濃度為100ng/mL；下圖為白酒樣品色譜圖；其中保留時間在7.3～7.8分鐘之間的兩組峰為來自色譜系統(tǒng)的雜質(zhì)干擾）

從圖1中可以明顯看到，在白酒樣品中檢出DMP、DIBP、DBP、DEHP和DINP 5種鄰苯二甲酸酯類化合物。

2.穩(wěn)定性和準(zhǔn)確度

以乙醇、去離子水按照1∶1模擬空白基質(zhì)，通過添加標(biāo)準(zhǔn)溶液考察方法重現(xiàn)性。通過添加50ng/mL、100ng/mL、1000ng/mL這3個濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個樣品制備重復(fù)3次，采集數(shù)據(jù)重復(fù)3次（n=9），計算方法重現(xiàn)性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)各組分結(jié)果相對標(biāo)準(zhǔn)偏差均小于4%。通過考察不同品牌的白酒樣品，塑化劑均不同程度檢出。

塑化劑鑒定

實驗中塑化劑分子量小，背景干擾嚴(yán)重，定量結(jié)果容易出現(xiàn)假陽性。借助AB SCIEX公司QTRAP系統(tǒng)，采用增強(qiáng)子離子掃描（EPI）、三級子離子掃描（MS3）、三級離子定量（MRM3）模式用于化合物定性，實現(xiàn)一次進(jìn)樣定性定量。實驗證實，以塑化劑DMP為例，采集MRM數(shù)據(jù)定量的同時得到準(zhǔn)分子離子峰m/z195的EPI質(zhì)譜圖（圖2），通過與標(biāo)準(zhǔn)溶液質(zhì)譜圖的對比，確證疑似色譜峰的真?zhèn)?，鑒定陽性樣品。或者在阱內(nèi)生成三級碎片，利用三級子離子與標(biāo)準(zhǔn)溶液的對比鑒定化合物的真?zhèn)危▓D3a、c、d）。此外，選擇特定的三級子離子采集MRM3數(shù)據(jù)，可有效提高質(zhì)譜選擇性，減少背景、基質(zhì)干擾，提高定量準(zhǔn)確度（圖3b、e）。

此外，在運行MRM→IDA→EPI基礎(chǔ)上，通過譜庫檢索模式，得到化合物與標(biāo)準(zhǔn)譜庫的相似度（匹配度、反相匹配度），可同時實現(xiàn)色譜峰定量定性分析。

結(jié)論

AB SCIEX公司一直致力于為用戶提供全方位的解決方案，在本次塑化劑曝光事件發(fā)生后，迅速組織專業(yè)人員建立相關(guān)的檢測方法，在第一時間為用戶提供高效液相串聯(lián)質(zhì)譜法測定白酒中塑化劑的整體解決方案。方法重現(xiàn)性好，穩(wěn)定性高、適合白酒中塑化劑的確證和定量檢測。