白興武，安永宏，項(xiàng)薇薇，王傳生，高立生

(承德護(hù)理職業(yè)學(xué)院，河北承德 067000)

短篇報(bào)道

CD44v3 mRNA在滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤中的表達(dá)及臨床意義*

白興武，安永宏，項(xiàng)薇薇，王傳生，高立生

(承德護(hù)理職業(yè)學(xué)院，河北承德 067000)

正常絨毛；葡萄胎；絨癌；CD44v3mRNA；原位雜交

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象 收集2010年7月-2012年12月承德市及承德地區(qū)多家醫(yī)院石蠟包埋組織標(biāo)本共110例，包括正常絨毛30例、良性葡萄胎40例、惡性葡萄胎20例及絨癌20例。所有的病例臨床病理資料完整，標(biāo)本均行連續(xù)切片，片厚5μm。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 CD44v3 mRNA原位雜交試劑盒及DAB顯色劑，均購(gòu)自武漢博士德生物工程有限公司。

1.3 方法 采用原位雜交技術(shù)檢測(cè)CD44v3 mRNA的表達(dá)情況。參照試劑盒說(shuō)明書(shū)操作，所有器械為確保無(wú)RNA酶干擾，均做防RNA酶污染處理。常規(guī)設(shè)立陽(yáng)性、陰性對(duì)照:陽(yáng)性對(duì)照為試劑公司隨試劑盒附帶的陽(yáng)性切片，陰性對(duì)照用2×SSC代替探針。

1.4 結(jié)果判定 以細(xì)胞漿出現(xiàn)深淺不一的棕黃色顆粒為陽(yáng)性反應(yīng)。采用CMIAS病理彩色圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行圖像分析:①計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞的百分比，根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞百分比記分:＜10%為0分，10%-45%為1分，46%-70%為2分，＞70%為3分。②根據(jù)染色反應(yīng)的深度記分，染色深度以大多數(shù)細(xì)胞的呈色反應(yīng)為準(zhǔn):不著色為0分，淺黃色為1分，深黃色為2分，棕黃色為3分。根據(jù)①、②的記分之和將CD44v3 mRNA陽(yáng)性結(jié)果分為4級(jí):陰性(-)為0分，弱陽(yáng)性(+)為1-2分，陽(yáng)性(++)為3-4分，強(qiáng)陽(yáng)性(+++)為5-6分。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS 13．0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，行卡方檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

CD44v3 mRNA在正常胎盤(pán)絨毛、良性葡萄胎、惡性葡萄胎和絨癌中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為13．3%、35．0%、65．0%和95．0%，CD44v3 mRNA陽(yáng)性表達(dá)率兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0．05)。見(jiàn)附表。

附表 CD44v3mRNA在滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤中的表達(dá)情況

3 討論

CD44是普遍存在于細(xì)胞表面的一種跨膜糖蛋白，是近年來(lái)倍受關(guān)注的一類(lèi)黏附因子，人類(lèi)CD44基因位于11號(hào)染色體短臂上(11p13)，根據(jù)基因中所含外顯子類(lèi)型的不同分為標(biāo)準(zhǔn)型和變異型(CD44s和CD44v)，其中CD44s主要參與正常的生理黏附作用，而CD44v則主要出現(xiàn)在病理變化的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中。CD44v包括CD44v1-CD44v10，其中與腫瘤細(xì)胞侵襲與轉(zhuǎn)移能力密切相關(guān)的是CD44v3、CD44v6和CD44v9[1]。高勇等應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)發(fā)現(xiàn)[2]，CD44v3蛋白在腫瘤細(xì)胞的遷徙轉(zhuǎn)移及組織侵襲過(guò)程中起協(xié)同作用，CD44v3對(duì)判斷胃癌進(jìn)展和預(yù)測(cè)轉(zhuǎn)移潛能有一定價(jià)值。姚德生等的研究顯示[3]，免疫組化法檢測(cè)CD44v3在卵巢癌中的陽(yáng)性表達(dá)率高于良性組和正常組，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，并且轉(zhuǎn)移灶的陽(yáng)性率顯著高于原發(fā)病灶，表明癌細(xì)胞CD44v3的出現(xiàn)與腫瘤的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移有關(guān)。本研究采用原位雜交技術(shù)檢測(cè)CD44v3 mRNA的表達(dá)，結(jié)果顯示:CD44v3 mRNA在正常絨毛、良性葡萄胎、惡性葡萄胎及絨癌組織中的表達(dá)呈上升趨勢(shì)，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。本研究從基因水平上提示，CD44v3 mRNA在滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要作用，這與本課題組采用免疫組化方法研究CD44v3蛋白在滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤中的表達(dá)是一致的[4]。腫瘤細(xì)胞黏附力的改變以及腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)、基底膜的相互作用是惡性腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的重要過(guò)程，因此，作為細(xì)胞黏附分子的CD44v3 mRNA在滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤發(fā)生、發(fā)展的過(guò)程中具有關(guān)鍵作用。

[1]Rall CJ,Rustgi AK.CD44 isoform expression in primary and metastatic pancreatic adenocarcinoma[J].Cancer Res,1995, 55(9):1831-1835.

[2]高勇，馬宇翔，金宏，等．黏附因子CD44v3在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義[J]．吉林醫(yī)藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2007，28(3):128-132．

[3]姚德生，李力，唐步堅(jiān)，等．CD44V3、CD44V6基因蛋白在卵巢惡性腫瘤中的表達(dá)及臨床意義[J]．腫瘤防治研究，1999，26(5):321-323．

[4]白興武．黏附因子CD44v3在正常絨毛和葡萄胎中的表達(dá)及相關(guān)性研究[J]．河北醫(yī)學(xué)，2011，17(4):451-452．

R737．33

B

1004-6879(2013)03-0250-02滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤嚴(yán)重危害生育期婦女的身心健康，并且發(fā)病率和死亡率在女性疾病中呈上升趨勢(shì)，臨床治療失敗和患者死亡的主要原因是惡性腫瘤的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移，因此，早期判斷滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤的惡性行為及浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移是臨床提高治愈率的關(guān)鍵。CD44v3是一種變異型CD44分子，主要功能是參與細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與基質(zhì)間的特異性粘連。本研究采用原位雜交技術(shù)檢測(cè)滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤CD44v3 mRNA的表達(dá)，探討CD44v3在滋養(yǎng)細(xì)胞腫瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用。

2012-11-28)

* 承德市科技局項(xiàng)目(20122194)