孟艷平 張生 曹興華

UF1000尿沉渣全自動流式細胞儀誤差研究

孟艷平 張生 曹興華

目的比對UF-1000尿沉渣全自動流式細胞儀、尿11A干化學法、尿顯微鏡鏡檢法三種方法檢測結(jié)果，總結(jié)影響因素。方法留取本院800例住院患者新鮮晨尿，同時用三種方法檢測。結(jié)果UF-1000尿沉渣全自動流式細胞儀檢測尿液紅細胞、白細胞、管型方面均有誤差。結(jié)論三種方法聯(lián)合應(yīng)用，降低檢驗誤差，提高尿液檢驗質(zhì)量。

UF-1000尿沉渣全自動流式細胞儀；尿11A干化學法；顯微鏡鏡檢法

隨著醫(yī)學檢驗技術(shù)的發(fā)展,尿沉渣自動分析技術(shù)逐漸推廣。日本sysmex公司的UF-1000是采用流式細胞儀的工作原理,將一定量的尿液中各種有形成分用熒光染料染色后,進入流式通道,測定激光照射下各種有形成分的前向散射光強度、側(cè)向散射光強度和脈沖幅度、熒光強度和熒光脈沖幅度和細胞電阻值的大小,由計算機根據(jù)特定分析軟件區(qū)別和計算各種有形成分。該儀器使用起來快速、簡便，具有很高的臨床價值。但是,任何儀器都有它的局限性。在我們的臨床工作中發(fā)現(xiàn)尿中的真菌、結(jié)晶、細菌等可能會影響UF-1000尿沉渣全自動流式細胞儀的檢測結(jié)果。為排除其誤、漏診因素,提高尿沉渣檢驗的準確性。本文就尿檢中使用UF-1000流式細胞儀、干化學法、顯微鏡法三種方法做一對比研究?，F(xiàn)結(jié)果如下。

1 臨床資料

1.1儀器和試劑 日本sysmex公司UF-1000流式細胞儀及其原裝試劑，URIT-1500優(yōu)利特干化學分析儀，優(yōu)利特干化學試紙，Cχ21FS1光學顯微鏡。

1.2標本來源和方法 收集河南省漯河市中心醫(yī)院患者新鮮中段晨尿800份，混勻后倒10 ml入潔凈玻璃管，先在URIT1500優(yōu)利特干化學分析儀上進行干化學分析，再在UF-1000流式細胞儀上進行尿沉渣自動分析，最后1500r/min離心5 min后棄去上清液做尿沉渣顯微鏡檢查。

1.3判斷標準 UF-1000流式細胞儀紅細胞參考范圍為0-25/μl,白細胞參考范圍為0-25/μl，管型0-3/μl[1]；尿干化學陽性結(jié)果為異常，陰性結(jié)果為正常；尿沉渣鏡鏡檢紅細胞正常范圍0-3/HP,白細胞正常范圍0-5/HP，生理性管型偶見。超出正常范圍的為陽性結(jié)果。

1.4統(tǒng)計學方法 對陽性結(jié)果進行χ2檢驗(P<0.05)為差異具有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

UF-1000流式細胞儀紅細胞陽性例數(shù)126，陽性率15.8%，白細胞陽性例數(shù)192，陽性率24%，管型陽性率例數(shù)44，陽性率5.5%。干化學法紅細胞陽性例數(shù)108，陽性率13.5%，白細胞陽性例數(shù)163，陽性率20.3%。顯微鏡法紅細胞陽性例數(shù)94,陽性率11.8%，白細胞陽性例數(shù)154，陽性率19.2%。

3 結(jié)論

UF-1000流式細胞儀檢測陽性率偏高，與干化學法和顯微鏡法進行χ2檢驗，(P<0.05)，提示差異有統(tǒng)計學意義。

4 討論

4.1紅細胞誤差原因 UF-1000流式細胞儀與其他兩種方法比較紅細胞結(jié)果不符標本共26例，其中假陽性24例,假陰性2例.

4.1陽性 尿中有形成分是靠流式細胞儀的散射光和熒光區(qū)分的。尿液中成分復雜，其形態(tài)，大小，染色性只要與紅細胞相似，都可能被儀器誤認為紅細胞。大致可分為以下幾種：①菌尿。尿中含有大量細菌時(主要為球菌和鏈球菌)，儀器會將較大細菌誤認為是紅細胞而出現(xiàn)假陽性[2]。此時應(yīng)結(jié)合干化學潛血試驗和顯微鏡檢查作出準確判斷。在此研究中菌尿?qū)е碌募訇栃詷吮竟?例。②尿中含有類酵母菌時，儀器會將類酵母菌誤認為是紅細胞而做出假陽性結(jié)果[3]。此時應(yīng)結(jié)合干化學潛血試驗和顯微鏡檢查。特別是插尿管的患者尿中易產(chǎn)生類酵母菌，有時干化學潛血陰性，但尿沉渣儀器檢測到的紅細胞數(shù)量非常多，所謂的紅細胞大部分都是類酵母菌，對這種患者盡量要做尿顯微鏡檢查。在這次試驗中有6例假陽性結(jié)果就是由于患者尿中含大量酵母菌引起的。③尿中含有精子時,其大小形態(tài)與紅細胞相似,熒光強度與散射光強度也與紅細胞相似,常被尿沉渣分析儀誤認為紅細胞。在此研究中精子引起的紅細胞假陽性共3例。④尿中含有結(jié)晶時，主要是草酸鈣結(jié)晶和無定型鹽結(jié)晶，草酸鈣結(jié)晶形狀多為球形或啞鈴形,無定形鹽常凝集成團,這些結(jié)晶形狀類似紅細胞,經(jīng)常會被儀器誤認為紅細胞而使結(jié)果出現(xiàn)假陽性。尿中含有結(jié)晶時顏色比較渾濁,所以遇到渾濁尿時應(yīng)盡量做顯微鏡檢查作出準確判斷。結(jié)晶尿引起的紅細胞假陽性較高,在此研究中共占13例,所占比率為54%.

4.1.2假陰性 尿液中紅細胞如果破碎或數(shù)量很少,所產(chǎn)生的熒光很弱,處于低熒光區(qū), UF-1000流式細胞儀檢測不到,結(jié)果就會為陰性,此時干化學隱血試驗非常有效的彌補這一不足.

4.2白細胞誤差原因 UF-1000流式細胞儀與其他兩種方法比較白細胞結(jié)果不符標本共46例，其中假陽性38例,假陰性8例.

4.2.1假陽性 尿中含有小圓上皮細胞時，其形態(tài)大小與白細胞相似,尿沉渣儀器會將其誤認為白細胞而出現(xiàn)假陽性結(jié)果，此時應(yīng)結(jié)合干化學法及顯微鏡檢查作出準確判斷。在此研究中小圓上皮細胞引起的白細胞假陽性共30例。

4.2.2渾濁尿 尿中含非晶形結(jié)晶或大量細菌時,這些物質(zhì)凝集成團,尿沉渣儀器會將其誤認為白細胞而出現(xiàn)假陽性結(jié)果，在此研究中小圓上皮細胞引起的白細胞假陽性共18例。

4.2.3假陰性 干化學法檢測白細胞是通過白細胞中的白細胞酯酶與干化學試紙條上的化學試劑反應(yīng)檢測的，當白細胞受各種外因發(fā)生破碎時，干化學試紙條可以檢測到白細胞但尿沉渣儀器卻不能測到。另外還有一種情況，即淋巴細胞中的白細胞酯酶含量很低，如果患者患有尿中以淋巴細胞為主的疾病，如腎結(jié)核，器官移植術(shù)后等，尿中白細胞多數(shù)是淋巴細胞，干化學檢測會出現(xiàn)假陰性結(jié)果。而尿沉渣儀器此時卻可以檢測到，顯示陽性結(jié)果。所以當干化學法與尿沉渣法兩者結(jié)果不相符時要仔細做尿顯微鏡檢查，仔細鑒別是哪種情況引起的白細胞假陰性。

4.3管型誤差原因 尿中含有粘液線時，由于其形狀與管型很相似,并易附著被熒光染料著色的物質(zhì)。尿沉渣儀器很容易將其誤認為管型而作出假陽性結(jié)果。另外尿液中含有較多雜質(zhì)時，尿沉渣儀器也會誤認為管型造成假陰性，與文獻報告一致[4]。

綜上所述，流式細胞儀速度快，重復性好，簡便易操作，可以精確計數(shù)，能節(jié)省大量人力物力，但其靈敏度太高，紅細胞和管型容易出現(xiàn)假陽性，適合做大批量的篩查。干化學法快速，簡便，對紅細胞和蛋白檢測靈敏度高。但不能定量檢測，也不能檢測出淋巴細胞。可見再先進的儀器都有其不足之處，都代替不了人工的顯微鏡檢查，因此建議在平時工作時應(yīng)將三種方法結(jié)合起來，在減低工作量，提高工作效率的同時也要減少檢驗誤差，提高檢驗質(zhì)量。

[1] 叢玉隆，馬俊龍，李云蓮，等.尿沉渣測定四種方法的參考范圍調(diào)查.中華醫(yī)學檢驗雜志，1997，20：229-231.

[2] 吳教仁，林敏，李楊.UF-100全自動尿沉渣分析儀檢測尿液紅細胞的應(yīng)用預(yù)防醫(yī)學論壇，2005，11(4)：421-422.

[3] 馬麗，袁漢堯，王小梅.酵母菌對UF-100全自動尿沉渣分析儀紅細胞檢測結(jié)果影響.上海醫(yī)學雜志，2001，16(3)：161-162.

[4] 鄭宇瓊，焦曉陽.流式尿沉渣全自動分析儀，尿干化學分析儀及顯微鏡的臨床意義探討.江西醫(yī)學檢驗雜志，2001，19(1)：5-6.

462000 河南省漯河市中心醫(yī)院檢驗科