王佳

冷凝集素對(duì)血型鑒定和交叉配血的干擾及處理方法

王佳

目的通過研究進(jìn)而分析出高效價(jià)冷凝集素對(duì)血型鑒定和交叉配血試驗(yàn)的影響。方法將紅細(xì)胞或二巰基乙醇(2-me)放入37℃～45℃的生理鹽水反復(fù)洗滌，達(dá)到對(duì)紅細(xì)胞的處理目的，在進(jìn)行正反定型及交叉配血前需對(duì)此前的紅細(xì)胞與血清做吸收放散處理。結(jié)果處理以后的標(biāo)本正反定型及交叉配血未出現(xiàn)異常反應(yīng)。結(jié)論含高效價(jià)冷凝集素標(biāo)本經(jīng)過不同方法的檢驗(yàn)處理后再進(jìn)行正方定型結(jié)果未出現(xiàn)異常反應(yīng)；經(jīng)過輸血后，不良反應(yīng)情況也未在交叉配血的患者上出現(xiàn)。

冷凝集素；血型鑒定；交叉配血

高效價(jià)冷凝集素大部分情況下是源于病理因素，一般有16以上的效價(jià)，高達(dá)32℃的作用溫度。高效價(jià)冷凝集素在給ABO血型和Rh血型鑒定、抗體鑒定及交叉配血帶來困難的同時(shí)還將具有臨床意義的同種異型抗體的存在事實(shí)掩蓋。其中18例存在高效價(jià)冷凝集素的標(biāo)本經(jīng)過多種方法檢測(cè)后，血型鑒定和交叉配血的難點(diǎn)被解開，貧血癥患者輸血以后癥狀緩解，病情有所好轉(zhuǎn)。

1 資料與方法

1.1一般資料 18例患者冷凝集素出現(xiàn)增高現(xiàn)象，其中15例為男性，3例為女性，年齡跨度為10～90歲。其中，14例為腎移植患者，3例患有感染性心內(nèi)膜炎，1例患有慢性肺心病。效價(jià)跨度為521～4096。

1.2試劑 二巰基乙醇應(yīng)用液(2-me)、抗人球蛋白試劑、譜紅細(xì)胞試劑、抗體篩查試劑、ABO反定型細(xì)胞、ABO血型鑒定試劑和Rh血型鑒定試劑。

1.3方法 對(duì)紅細(xì)胞進(jìn)行處理將紅細(xì)胞從抗凝管里取出，在37℃的水中將自身凝集的紅細(xì)胞進(jìn)行30 min的水浴處理；或放置到37℃的生理鹽水中進(jìn)行洗滌，3遍后，若洗滌后的紅細(xì)胞經(jīng)過檢測(cè)未出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，就可進(jìn)行ABO正定型、Rh血型鑒定、直接抗人球蛋白試驗(yàn)、自身吸收試驗(yàn)，最后確認(rèn)無異?，F(xiàn)象就可交叉配血;若出現(xiàn)凝集現(xiàn)象，則將標(biāo)本重復(fù)上述操作，檢測(cè)無凝集才可往下進(jìn)行。

血清處理需要用到二巰基乙醇，將血清從干燥管中取出來，將與血清等量的二巰基乙醇混合后，放置在37℃中進(jìn)行水浴，40 min取出標(biāo)本后，進(jìn)行正反定型、抗體篩查和交叉配血的后續(xù)工作。將處理后無凝集的患者紅細(xì)胞與等量自身血清混合，放到4℃的冰箱內(nèi)進(jìn)行冷藏吸收處理30 min，可多次重吸收冷凝集較強(qiáng)的血清標(biāo)本，再進(jìn)行ABO反定型、抗體篩查和交叉配血的后續(xù)工作。

血清學(xué)試驗(yàn)因血型正、反定型不一致的標(biāo)本未進(jìn)行檢測(cè)，經(jīng)過處理后ABO正反定型一致、RhD鑒定呈陽性。

測(cè)定冷凝集素效價(jià)未稀釋的患者血清與O型成人紅細(xì)胞發(fā)生凝集后做效價(jià)滴定測(cè)驗(yàn)，并記錄數(shù)據(jù)，以此判定冷凝集素所具有的特異性。

2 結(jié)果

在23℃環(huán)境下進(jìn)行的ABO血型鑒定結(jié)果正定型都為AB型的患者出現(xiàn)18例，反定型為O型，自身對(duì)照出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。處理后標(biāo)本或水浴中血型正反定型結(jié)果及用二巰基乙醇處理后的血標(biāo)本正反定型的結(jié)果：O型患者正反定型均為O型的患者有14例，B型患者正反定型均為B型的為3例，A型患者正反定型為A型為1例。血型物質(zhì)檢測(cè)為分泌型有18例，經(jīng)過血型物質(zhì)檢測(cè)含有H物質(zhì)的正定型為O型的患者有14例，正定型均含有B、H物質(zhì)的為B型，正定型均含有A、H物質(zhì)的為A型。通過直接抗人球蛋白試驗(yàn)檢測(cè)的為陽性，抗C3 d也均為陽性，并且冷凝集素存在抗-I特異性。本次研究的18例患者血液內(nèi)含有的冷凝集素去除后經(jīng)交叉配血都未出現(xiàn)不合現(xiàn)象，輸血后，溶血現(xiàn)象也未發(fā)生。

3 討論

生理性冷凝集素是當(dāng)效價(jià)不高于16的冷凝集素，在室溫和37℃進(jìn)行血型血清學(xué)試驗(yàn)基本不受到影響的一種冷凝集素;冷凝集素處于病理狀態(tài)時(shí)，效價(jià)會(huì)出現(xiàn)升高現(xiàn)象，這是由某些病理因素所致，而出現(xiàn)ABO和Rh血型鑒定、抗體效價(jià)和交叉配血困難情況是因?yàn)槔淠匦r(jià)和反應(yīng)溫度較高。本調(diào)查中18例患者冷凝集素效價(jià)都不低于16，效價(jià)跨度為521～4096，在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，處于室溫環(huán)境下血型鑒定正反定型結(jié)果出現(xiàn)不一致，而經(jīng)37℃水浴或經(jīng)洗滌處理后正反定型結(jié)果則一致。所以對(duì)標(biāo)本進(jìn)行37℃水浴或37℃生理鹽水洗滌3次的處理后，才可懷疑是由冷凝集素引起血型鑒定時(shí)正反定型不符。

冷凝集素具有以下特點(diǎn)：①大多數(shù)是IgM型抗體。少數(shù)是IgG型抗體，后者又稱為雙相抗體。②反應(yīng)的最適溫度是4℃，在20℃以下時(shí)可以凝集自己的紅血球，加溫至30～37℃又會(huì)和紅血球分離，如再遇補(bǔ)體即會(huì)發(fā)生溶血。③它與補(bǔ)體的親和力較大，在冷處和溫處都可與補(bǔ)體結(jié)合。在冷處與補(bǔ)體結(jié)合后，當(dāng)溫度上升至30～32℃以上時(shí)，或環(huán)境中呈微酸性時(shí)(pH6.5-7.0)，即發(fā)生溶血，所以在患者血管內(nèi)可發(fā)生溶血，出現(xiàn)血紅蛋白尿。④大多是不完全抗體，少數(shù)是完全抗體。⑤這種抗體與紅血球及補(bǔ)體結(jié)合后，容易從紅血球上彌散而只留補(bǔ)體在紅血球表面上。

本文18例受冷凝集素影響的ABO正反定型病例，通過二巰基乙醇滅活后使IgM抗體聚合力喪失，從而使正反定型結(jié)果一致。有資料顯示，血清中的抗-A、抗-B、抗-AB抗體大多數(shù)是IgM性質(zhì)的抗體，也有IgG成分，在正常獻(xiàn)血員中，IgG1和IgG2多于IgG3和IgG4，因此IgG成分的反定型通過間接抗人球蛋白試驗(yàn)會(huì)得出與正定型一致的結(jié)論。本文與報(bào)道相似，故經(jīng)二巰基乙醇處理后的18例患者血清因IgM未得到徹底清除而直接離心出存在A、B、O、AB血型，而IgG效價(jià)的評(píng)定未受影響，所以反定型試驗(yàn)與正定型試驗(yàn)得出的結(jié)論一致。

若血型鑒定和交叉配血因高效價(jià)冷凝集素受到影響，最好用上述幾種方法配合應(yīng)用，從而使輸血順利、安全進(jìn)行。

[1] 林國(guó)連,詹奕榮,劉紅杏,等.冷凝集素對(duì)血型鑒定和交叉配血的影響相關(guān)研究分析.河北醫(yī)學(xué),2010,03:302-304.

[2] 吳松遠(yuǎn),魏淑英,孔祥騫.冷凝集素對(duì)血型鑒定的影響與處理.實(shí)用醫(yī)技雜志,2010,12:1143-1144.

[3] 王華.冷凝集素在血型鑒定和交叉配血不合中的鑒別.實(shí)用心腦肺血管病雜志,2011,10:1758.

Coldagglutinintobloodtypeidentificationandcrossmatchinginterferenceandprocessingmethod

WANGJia.

Departmentofbloodtransfusion,The264HospitalofthePLA,Taiyuan,30001,China

ObjectiveThrough the research and analysis of the high price of cold agglutinin blood typing and cross matching test influence.MethodsThe red blood cells or 2 mercaptoethanol (2-me) in 37 ℃～45 ℃ of physiological saline repeated washing,treatment was on red blood cells,In the positive and negative Settings and cross matching need previous erythroid and serum absorbed radiation therapy.ResultsThe experimental results didn’t appear abnormal reaction.ConclusionWith a high price cold agglutinin specimen after different methods of inspection of the reentry after processing square finalize the design results are not abnormal reaction,a blood transfusion after,adverse reaction was not appear on the patient.

Cold agglutinin；Blood grouping；Cross matching

030001 太原，解放軍二六四醫(yī)院