姚林虎，李　雪，孟景紅，魏　平

(河北醫(yī)科大學第三醫(yī)院免疫風濕科，石家莊 050051)

CD4+T細胞在B細胞應答以及體液免疫中發(fā)揮著重要的作用，最近有研究表明濾泡輔助性T細胞(follicular helper T cells，Tfh)才是真正意義上輔助B細胞產(chǎn)生抗體反應的CD4+T細胞亞群[1]。已有研究認為Tfh在系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythmatosus，SLE)、類風濕關節(jié)炎(rheumatoid arthritis，RA)、干燥綜合征(sjogren’s syndrome，SS)等風濕性疾病中均表達異常[2]，提示Tfh可能在其發(fā)病機制中發(fā)揮了一定的作用。本文將對Tfh與風濕性疾病的關系的研究進展進行綜述。

Tfh的特征與功能

CD4+T細胞根據(jù)其分泌的細胞因子及其介導的不同功能可分為輔助性T細胞(T help cell，Th)1、Th2、Th17、調節(jié)性T細胞(regulatory T，Treg)及Tfh。Th1主要通過分泌人白細胞介素(interleukin，IL)-2、干擾素(interferon，IFN)-γ、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor, TNF)-β介導細胞免疫；Th2主要通過分泌IL-4、IL-5、IL-6介導體液免疫；Th17主要通過分泌IL-17促進炎性反應；Treg主要以效應細胞為作用對象調控Tfh介導的免疫應答；Tfh主要通過分泌IL-21發(fā)揮效應從而輔助B細胞產(chǎn)生抗體反應。

Tfh的生物學特性

2000年Breitfeld等[3]與Sehaerli等[4]幾乎同時將一種定位于次級淋巴器官、輔助B細胞產(chǎn)生抗體反應、表型為CXCR5+CD40L+ICOS+的T細胞亞群命名為“濾泡輔助性T細胞”，其中CXCR5為趨化因子受體5(chemokine receptor-5)、CD40L為腫瘤壞死因子相關激活蛋白(TNF associated activation protein, TRAP)、ICOS為誘導性協(xié)同刺激分子(inducible co-stimulator)。Tfh是一類獨特的輔助性T細胞，其獨特性在于獨特的基因表達譜(Bcl-6，B-cell CLLlymphoma-6，zinc finger protein 5)、表面表達標記物[CXCR5、程序性死亡受體-1(programmed death-1，PD-1)、ICOS、CD40L]及分泌的細胞因子[5]。Tfh定位于B淋巴細胞濾泡形成的生發(fā)中心，生發(fā)中心反應能夠促發(fā)T細胞依賴的抗體反應，也是T細胞直接向抗原特異性初始B細胞提供輔助的場所[6]。

Tfh相關因子

CXCR5是CXC亞族趨化因子受體，主要表達于Tfh和B細胞，其相應的配體為bca 1(b cell attracting chemokine 1CXCL13)。當初始T細胞進入外周淋巴器官T細胞區(qū)域時，CXCR5可一過性地表達于活化的CD4+T細胞表面，其中繼續(xù)表達CXCR5且同時能夠表達ICOS、CD40L和分泌IL-21從而定位于淋巴濾泡發(fā)揮輔助B細胞功能的稱為“濾泡輔助性T細胞”。另外，CXCR5+Tfh在濾泡樹突狀細胞產(chǎn)生的CXCL13的趨化作用下被募集到淋巴濾泡，引導B細胞的共定位及相互作用[7]。因此，CXCR5是Tfh細胞遷移和定位的重要“轉運分子”，也是Tfh細胞表面的重要標志。

ICOS是一種CD28樣的共刺激分子，主要表達于T細胞活化后的Tfh，在T細胞依賴的抗體反應中起著重要作用。ICOS配體(ICOS ligand，ICOSL)主要表達在B細胞上，與Tfh上的ICOS相互作用進而促進Tfh產(chǎn)生、維持、生發(fā)中心及記憶B細胞的形成。已有研究顯示人和小鼠缺乏ICOS時可以導致Tfh大量減少，并且出現(xiàn)B細胞成熟以及免疫球蛋白同型轉換的障礙，說明ICOS在Tfh的分化中起著十分重要的作用[8]。

IL-21由Tfh分泌，是Tfh執(zhí)行效應功能的主要細胞因子，在Tfh產(chǎn)生分化、生發(fā)中心形成、B細胞增殖以及免疫球蛋白類別轉換中發(fā)揮著重要作用[9]。白細胞介素-21受體(interleukin-21 receptors，IL-21R)是Ⅰ型細胞因子受體，可以表達于CD4+T細胞、CD8+T細胞、B細胞、自然殺傷細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞等細胞上。因此，IL-21的生物學效應十分廣泛，如誘導T、B及活化細胞增殖以自然殺傷細胞，且具有一定的抗腫瘤作用，可預示自身免疫性疾病的發(fā)病情況等。IL-21可以通過誘導Tfh分化、促進Tfh表面CXCR5的表達、誘導Tfh的誘導性協(xié)同刺激分子表達來調節(jié)Tfh，另外效應Tfh也可能通過IL-21與其他細胞因子聯(lián)合作用調節(jié)抗體之間的類別轉換。

Bcl-6是Tfh必不可少的轉錄因子。雖然Bcl-6在生發(fā)中心中的表達只有10%～15%，但是其可以通過調節(jié)生發(fā)中心、抑制Th1、Th2、Th17細胞系的分化途徑從而促使Tfh的生成。已有研究表明，活化后的輔助性T細胞在轉錄因子Bcl-6的調控下可以分化為Tfh，其分泌IL-21及CXCR-5與CXCL13相互結合后，刺激ICOS等分子并分別與ICOSL結合，進而刺激初始B細胞活化成為具有抗體分泌功能的漿細胞[10]。另外，Bcl-6的表達嚴格限制于生發(fā)中心B細胞，且與Tfh的分化密切相關[11]。目前，學者們傾向認為Bcl-6是Tfh的特征性轉錄因子，但是尚缺乏直接證據(jù)。

Tfh的功能

Tfh的功能是通過其上表達的CD40L和ICOS分別與B細胞上的CD40和ICOSL結合、分泌IL-21、刺激B細胞增殖分化及免疫球蛋白類別轉換進而輔助B細胞產(chǎn)生抗體反應。因此，Tfh的主要功能包括活化B細胞分泌IgG、誘導B細胞分化成為漿細胞、維持機體的初始免疫應答以及再次免疫應答反應。

Tfh與風濕性疾病

由于Tfh的多種生物學特性，其功能的缺陷或者亢進都將導致免疫的紊亂。Tfh及其相關分子的功能缺陷會導致B細胞的抗體反應不能正常進行；而Tfh及其相關分子的功能亢進會導致自身免疫性疾病的發(fā)生。正常情況時，CXCR5+Tfh定位于淋巴組織中的B細胞濾泡，若發(fā)生自身免疫，可能由于病損部位產(chǎn)生CXCL13而導致Tfh遷移到非淋巴組織，此時的Tfh可以產(chǎn)生大量IL-21進一步參與和導致慢性自身免疫性疾病的發(fā)生，而人類自身免疫病常常發(fā)生在非淋巴組織，在病損部位卻形成含有異位生發(fā)中心的淋巴樣組織，其可能通過體細胞高頻突變而產(chǎn)生高親和力的抗體。目前已有越來越多的證據(jù)表明，Tfh在人類和小鼠自身免疫性疾病自身抗體的產(chǎn)生中起著至關重要的作用[5]。

Tfh與SLE

SLE是一種累及多系統(tǒng)，且體內(nèi)存在多種病理性抗體的自身免疫性疾病。已有動物實驗證實，在狼瘡小鼠的模型中可以見到在次級淋巴器官中出現(xiàn)異位生發(fā)中心，而其內(nèi)的Tfh協(xié)助B細胞產(chǎn)生抗體反應[12]。Cappione等[13]的研究也證實了SLE患者自身反應性B細胞積極參與生發(fā)中心的形成，從而最終產(chǎn)生病理性自身抗體。2011年，俞寧等[14]的研究結果顯示，SLE患者的外周血中CD4+CXCR5+Tfh的表達率高于健康對照組，并且在治療后有所下降，提示CD4+CXCR5+Tfh的數(shù)量異常可能參與了SLE的急性炎性反應及疾病進展。

Tfh與RA

RA是一種累及多關節(jié)的系統(tǒng)性炎性自身免疫性疾病。目前，RA的發(fā)病機制尚不是十分明確，比較認可的機制是外源性的感染作用于易感個體，從而導致機體內(nèi)的T細胞和B細胞失衡[15]。國外有研究發(fā)現(xiàn)IL-2l對人體內(nèi)B細胞的激活、分化、凋亡起著十分重要的作用，可以通過促進自身抗體的產(chǎn)生加快自身免疫性疾病的進展，因此可以通過阻斷IL-21來干預病理性抗體的過量產(chǎn)生[16]。近期，有國內(nèi)學者研究發(fā)現(xiàn)，RA患者外周血中Tfh表達率高于健康對照組，并且在治療后RA患者的Tfh表達率有所下降，提示Tfh的過度表達可能參與了RA的急性炎性反應及疾病進展[2]。

Tfh與SS

SS是一種主要累及外分泌腺體的慢性自身免疫性疾病。Simpson等[17]在研究SLE患者外周血Tfh表達率時，檢測了17例SS患者外周血中Tfh的比例，發(fā)現(xiàn)Tfh表達率在其中6例SS患者中顯著升高。

Tfh與系統(tǒng)性硬化病

系統(tǒng)性硬化病(systemic sclerosis，SSc)是一種多系統(tǒng)受累，同時出現(xiàn)血管異常、自身免疫異常、結締組織硬化萎縮的風濕性疾病。已有研究證實，IL-21mRNA、IL-21RmRNA的表達不依賴于SSc發(fā)病過程中的關鍵細胞因子，如IL-1、轉化生長因子-β等[18]。

展　望

綜上所述，Tfh已成為輔助B細胞產(chǎn)生抗體的新型CD4+T細胞亞群，在機體發(fā)揮正常的體液免疫的過程中起著十分重要的作用。Tfh的分化及與其功能相關的細胞因子的異常均可以引起免疫紊亂從而產(chǎn)生病理性抗體，最終導致慢性自身免疫性疾病的發(fā)生。然而，如何有效抑制Tfh相關因子從而達到治療風濕性疾病的目的，仍待進一步研究。隨著研究的不斷進展，Tfh終將成為治療某些風濕性疾病的新靶點。

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