摘要：建立了高效液相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)甘藍(lán)中魚(yú)藤酮?dú)埩袅康姆椒?。甘藍(lán)經(jīng)乙腈提取，過(guò)Carbon/NH2柱凈化，采用MGШ-C18色譜柱，以乙腈∶0.1%甲酸水溶液（60∶40，V/V）為流動(dòng)相，運(yùn)用電噴霧正離子（ESI+）選擇離子模式，以m/z 395為定量檢測(cè)離子，魚(yú)藤酮保留時(shí)間在4.8 min。在0.001～1.000 mg/L內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)為0.999 98。在甘藍(lán)樣品中添加0.01、0.10、0.50 mg/kg 3個(gè)濃度的魚(yú)藤酮，其回收率在70.5%～112.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（n=5）小于20.9%。最低檢出量（S/N=10）為2.5×10-11 g。該方法準(zhǔn)確度和精密度均能滿足檢測(cè)要求。

關(guān)鍵詞：魚(yú)藤酮；殘留；液相色譜-質(zhì)譜

中圖分類(lèi)號(hào)：O657.7+2；O657.63 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2012）21-4868-02

Determination of Rotenone Residue in Cabbage by LC-MS

LIU Jun1，LI Xian-bo1，2，SHEN Jing1

（1.Agricultural Quality Standards and Inspection Technology Research Institute， Hubei Academy of Agricultural Science， Wuhan 430064，China； 2.College of Science， Huazhong Agricultural University， Wuhan 430070，China）

Abstract： A method for determination of rotenone residue in cabbage was established by LC-MS. Rotenone residue was extracted from sample with acetonitrile， cleaned up by ProElut Carbon/NH2 SPE to achieve sample preparation， and separated on the MGШ-C18 column using a mixture of acetonitrile and 0.1% formic acid solution （60∶40） as mobile phase. Determination was performed by using ESI+ and under the mode of SIM. Quantitative detection of ions at m/z 395， the retention time of rotenone was about 4.8 min. Linearities were held in the ranges of 0.001～1.000 mg/L with the correlation coefficient for 0.999 98. The average recoveries of rotenone in cabbage at the spiked amounts of 0.01、0.10、0.50 mg/kg were 70.5%～112.6%， and the relative standard deviation was lower than 20.9%（n=5）. The limit of detectable amount （S/N=10） was 2.5×10-11 g. The accuracy and precision of this method could meet the detection requirements.

Key words： rotenone； residue； LC-MS

魚(yú)藤酮是豆科藤本植物魚(yú)藤根部的一種天然殺蟲(chóng)劑，具有高效、低毒、廣譜、殺蟲(chóng)快、對(duì)農(nóng)作物不產(chǎn)生藥害和不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)防治果樹(shù)、蔬菜、茶葉、花卉和糧食作物上的數(shù)百種害蟲(chóng)及蚊、蠅等衛(wèi)生害蟲(chóng)有良好效果。但過(guò)量使用會(huì)造成環(huán)境污染，對(duì)人類(lèi)健康帶來(lái)危害，特別是其對(duì)中樞神經(jīng)的毒性作用日益引起社會(huì)各界的關(guān)注[1]。因此，魚(yú)藤酮在得到廣泛應(yīng)用的同時(shí)，開(kāi)展魚(yú)藤酮的殘留檢測(cè)方法研究就顯得非常重要。目前，有報(bào)道采用液相色譜、液相色譜-質(zhì)譜、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜以及氣相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)魚(yú)藤酮在蜂蜜[2，3]、魚(yú)肉[4]、河水[5]、果蔬[6]、食品[7]、血漿[8]、魚(yú)藤[9]以及水產(chǎn)品[10]中的殘留。但甘藍(lán)中魚(yú)藤酮的殘留檢測(cè)方法未見(jiàn)報(bào)道，本研究建立了高效液相色譜-質(zhì)譜法檢測(cè)甘藍(lán)中魚(yú)藤酮的殘留量，該方法快速、準(zhǔn)確，準(zhǔn)確度和靈敏度均能滿足殘留檢測(cè)要求。

1 材料與方法

1.1 儀器及試劑

LC 210ADvp高效液相色譜儀（日本島津公司），配有LC-MS 2010 EV質(zhì)譜檢測(cè)器和電噴霧離子源，自動(dòng)進(jìn)樣器，LC-MS工作站。

魚(yú)藤酮標(biāo)樣（99.0%，德國(guó)Dr. Ehrenstorfer公司），甲醇和乙腈均為色譜純（J. T. Baker公司），甲酸（99.0%，Acros Organics公司），氯化鈉（分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），超純水用 Barnstead超純水機(jī)制備，其他試劑均為分析純。

1.2 樣品前處理

稱(chēng)取經(jīng)搗碎處理的甘藍(lán)樣品10.00 g于100 mL離心管中，加入20 mL乙腈，以21 000 r/min勻質(zhì)2 min，加入3.0 g氯化鈉，再勻質(zhì)1 min。以3 500 r/min離心5 min，吸取上清液5 mL（相當(dāng)于2.5 g樣品）于100 mL燒杯中，于80 ℃水浴蒸發(fā)近干，加入2 mL乙腈∶甲苯（3∶1，V/V）待凈化。

1.3 樣品凈化

用5 mL乙腈∶甲苯（3∶1，V/V）預(yù)淋洗Carbon/NH2柱（6 mL，500 mg），待淋洗液接近固體層面時(shí)迅速倒入上述待凈化液，同時(shí)收集淋洗液，再用6 mL乙腈∶甲苯（3∶1，V/V）分兩次淋洗，合并上述淋洗液，于45 ℃水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)近干，2.5 mL甲醇定容，待質(zhì)譜檢測(cè)。

1.4 液相色譜-質(zhì)譜條件

色譜柱：MGШ-C18（100 mm×2.0 mm，5 μm）；流動(dòng)相采用乙腈∶0.1%甲酸溶液（60∶40，V/V）；流速：0.2 mL/min；進(jìn)樣體積：5 μL；柱溫：35 ℃；離子源 ESI （+），SIM 掃描模式（m/z 395）；CDL溫度：250 ℃； 加熱模塊溫度：200 ℃；霧化氣流速（N2）：1.5 L/min；干燥氣（N2）壓力：40 kPa；檢測(cè)電壓：1.65 V。

2 結(jié)果與分析

2.1 定量離子的選擇

在上述色譜條件下選擇SCAN （+）模式，直接進(jìn)100 mg/L的魚(yú)藤酮標(biāo)樣溶液，掃描范圍m/z 50～450得到全掃描質(zhì)譜圖。由圖1可見(jiàn)m/z 395 （M+H）的強(qiáng)度最大，所以選擇 m/z 395 為定量離子。以m/z 395為定量離子采用SIM（+） 模式，魚(yú)藤酮的添加和標(biāo)樣圖譜以及甘藍(lán)空白譜圖見(jiàn)圖2。

2.2 線性范圍和檢出限

配制魚(yú)藤酮標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度分別為0.001、0.005、0.010、0.050、0.100、1.000 mg/kg進(jìn)行檢測(cè)，以m/z 395質(zhì)量色譜圖峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的魚(yú)藤酮質(zhì)量濃度（mg/kg）為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖3，其線性回歸方程為：y =672 954 0x+112 02，相關(guān)系數(shù)為0.999 98。按S/N=10計(jì)算魚(yú)藤酮最低檢出量為2.5×10-11 g。

2.3 方法的回收率、精確度和最小檢出濃度

在未施用魚(yú)藤酮的菜地采集空白甘藍(lán)樣品，分別添加0.01、0.10、0.50 mg/kg 3個(gè)水平魚(yú)藤酮標(biāo)準(zhǔn)溶液，每個(gè)水平5次重復(fù)，檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1，添加樣品中魚(yú)藤酮加標(biāo)回收率為70.5%～112.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）在4.1%～20.9%。魚(yú)藤酮在甘藍(lán)中的最小檢測(cè)濃度為0.01 mg/kg。回收率、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差和最小檢測(cè)濃度能滿足農(nóng)藥登記殘留試驗(yàn)的要求。

3 小結(jié)與討論

采用乙腈提取，Carbon/NH2柱凈化，液相色譜-質(zhì)譜檢測(cè)農(nóng)藥魚(yú)藤酮在甘藍(lán)中的殘留，該方法操作方便，其添加回收率、精確度和最小檢出濃度均能達(dá)到農(nóng)藥登記殘留試驗(yàn)的要求。

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收稿日期：2012-06-01

基金項(xiàng)目：農(nóng)業(yè)部農(nóng)藥檢定所農(nóng)藥登記試驗(yàn)項(xiàng)目（2011P325）

作者簡(jiǎn)介：劉 軍（1979-），男，安徽壽縣人，助理研究員，碩士，主要從事食品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)工作，（電話）15387038657（電子信箱）

lj_308@163.com；通訊作者，沈 菁，副研究員，從事農(nóng)藥登記殘留試驗(yàn)工作，（電子信箱）myshenjing@126.com。