摘要：對(duì)采自湖北省煙草（Nicotiana tabacum Linn.）種植地的8份根圍土和根組織線蟲樣本進(jìn)行分離，通過(guò)系統(tǒng)的形態(tài)學(xué)觀測(cè)，共鑒定出6屬8種植物線蟲：異頭絲尾墊刃線蟲（Filenchus heterocephalus）、咖啡短體線蟲（Pratylenchus coffeae）、刻痕短體線蟲（Pratylenchus crenatus）、扁尾螺旋線蟲（Helicotylenchus platyurus）、擬強(qiáng)壯紐帶線蟲（Hoplolaimus pararobustus）、花生根結(jié)線蟲（Meloidogyne arenaria）、南方根結(jié)線蟲（Meloidogyne incognita）和燕麥真滑刃線蟲（Aphelenchus avenae），其中異頭絲尾墊刃線蟲、刻痕短體線蟲和擬強(qiáng)壯紐帶線蟲為中國(guó)煙草上首次報(bào)道的植物線蟲。對(duì)鑒定出的部分線蟲種類進(jìn)行了詳細(xì)的形態(tài)學(xué)描述，并討論了8種植物線蟲對(duì)煙草的經(jīng)濟(jì)重要性。

關(guān)鍵詞：植物線蟲；煙草（Nicotiana tabacum Linn.）；種類鑒定；湖北省

中圖分類號(hào)：S432.4+5；S435.72 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2012）21-4795-04

Identification of Plant Nematode Species on Tobacco in Hubei Province

LI Jian-li1，ZHAO Hong-hai1，LI Xi-hong2，KONG Fan-yu3

（1. College of Agronomy and Plant Protection， Qingdao Agricultural University， Qingdao 266109， Shandong， China；

2. Hubei Research Institute of Tobacco Sciences，Wuhan 430030， China；

3. Tobacco Research Institute， Chinese Academy of Agricultural Sciences，Qingdao 266101，Shandong，China）

Abstract： Eight rhizosphere soil and root samples of tobacco（Nicotiana tabacum Linn.） were collected from Hubei province during 2010 to 2011， from which nematodes were isolated and morphologically identified. From six plant nematode genera， eight plant nematode species were identified - Filenchus heterocephalus， Pratylenchus coffeae， P. crenatus， Helicotylenchus platyurus， Hoplolaimus pararobustus， Meloidogyne arenaria， M. incognita， and Aphelenchus avenae， among which F. heterocephalus， P. crenatus and H. pararobustus were firstly reported on tobacco in China. The former five species were described in detail， and all eight species were discussed on the economic importance to tobacco.

Key words： plant nematode； tobacco （Nicotiana tabacum Linn.）； species identification； Hubei Province

煙草有害生物是限制煙葉生產(chǎn)的主要因素之一，而近10年來(lái)煙草病蟲害發(fā)生日趨復(fù)雜。植物線蟲是煙草上的病原物之一，在世界范圍內(nèi)根結(jié)線蟲（Meloidogyne）、短體線蟲（Pratylenchus）和球孢囊線蟲（Globodera）可引起煙草嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失[1，2]。湖北省煙葉種植面積達(dá)5萬(wàn)多公頃，在中國(guó)煙葉生產(chǎn)中占有比較重要的地位。然而，湖北省煙草上只有根結(jié)線蟲為害的報(bào)道[3]。因此，有必要系統(tǒng)調(diào)查湖北省煙草上的植物線蟲種類，為煙草植物線蟲病害的綜合防控提供指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 樣本來(lái)源和采集方法

8個(gè)土壤和根組織樣本來(lái)自湖北省十堰市、咸豐縣等地，均采自煙草種植地。2010年和2011年8月份煙葉生長(zhǎng)中后期，采用對(duì)角線5點(diǎn)取樣法，選定5株煙草，先用鐵鍬鏟去比較干燥的2～3 cm表層土，在每株煙草上取根圍土和適宜根組織作為1個(gè)小樣，每個(gè)小樣量約400 g，然后將其混合成1個(gè)2 000 g左右的混合樣，裝入塑料袋中，標(biāo)記后帶回[4]。

1.2 線蟲的分離、殺死、固定和鑒定

采用淘洗—過(guò)篩—重糖離心法分離線蟲，用溫和熱（60～65 ℃）殺死法殺死線蟲，用TAF固定液固定線蟲[4]。在實(shí)體解剖鏡下挑取線蟲，在Nikon ECLIPSE 80i顯微鏡下觀測(cè)線蟲，形態(tài)學(xué)鑒定及描述術(shù)語(yǔ)參見文獻(xiàn)[5]。

2 結(jié)果與分析

2.1 鑒定結(jié)果

在8個(gè)煙草土壤和根組織混合樣本中共鑒定出植物線蟲6屬8種（表1）。在鑒定出的8種植物線蟲中，花生根結(jié)線蟲、南方根結(jié)線蟲和燕麥真滑刃線蟲在我國(guó)報(bào)道和詳細(xì)描述很多，并且在煙草上也有許多報(bào)道。其他5種植物線蟲在我國(guó)報(bào)道較少，詳細(xì)描述則更少，特別是異頭絲尾墊刃線蟲、刻痕短體線蟲和擬強(qiáng)壯紐帶線蟲屬我國(guó)煙草上首次發(fā)現(xiàn)的植物線蟲種類[6，7]，因此有必要對(duì)這5種植物線蟲進(jìn)行詳細(xì)的形態(tài)學(xué)描述。

2.2 部分種類的形態(tài)描述

2.2.1 異頭絲尾墊刃線蟲（Filenchus heterocephalus Xie Feng，1996[8]）

1）測(cè)量數(shù)據(jù)。♀♀（n=10）：L（體長(zhǎng)）=（470.1±13.2） μm；W（體寬）=（13.6±1.5） μm；a（體長(zhǎng)/體寬）=（35.0±4.5）；b（體長(zhǎng)/食道-腸瓣門到頭端的距離）=（5.3±0.4）；c（體長(zhǎng)/尾長(zhǎng)）=（4.1±0.1）；c′（尾長(zhǎng)/肛門處體寬）=（8.6±0.8）；AM （頭端至中食道球中央的距離）=（34.3±2.0） μm；EP（排泄孔至頭端的距離）=（66.5±2.5） μm； V[（陰門至頭端距離/體長(zhǎng)）×100]=（61.7±0.6）；ABW（肛門處體寬）=（10.7±0.5） μm；PUS（后陰子宮囊長(zhǎng)度）=（10.5±1.6） μm；T（尾長(zhǎng)）=（115.2±5.9） μm。

2）形態(tài)特征。雌蟲（圖1）：蟲體小。熱殺死后蟲體向腹面彎曲。角質(zhì)層環(huán)細(xì)。頭骨架骨化弱?？卺樇?xì)小，錐體部小于或?yàn)榭卺橀L(zhǎng)的1/3?？卺樆壳蛐。鼒A形。中食道球紡錘形，具瓣。食道腺長(zhǎng)梨形，與腸交界清楚。排泄孔位于食道腺前部水平處。陰門橫裂。陰道直。受精囊圓形或橢圓形，有精子，后陰子宮囊長(zhǎng)度為陰門處體寬的0.8（0.7～0.9）倍。尾細(xì)長(zhǎng)圓錐形，后部延長(zhǎng)呈絲狀，尾長(zhǎng)于肛陰距。雄蟲：未見。

2.2.2 咖啡短體線蟲[Pratylenchus coffeae （ Zimmermann，1898） Schuurmans Stekhoven，1941]

1）測(cè)量數(shù)據(jù)?！狻?（n=7）：L=（596.1±28.9） μm；W=（22.1±0.7） μm；a=（27.0±1.9）；b=（6.3±0.3）；b′=（4.9±0.9）；c=（18.0±1.7）；c′=（2.2±0.2）；ST（口針長(zhǎng)度）=（17.2±0.6） μm；MB（中食道球）=（50.6±8.6） μm；DGO（背食道腺開口至口針基球的距離）=（2.8±0.8） μm；EP=（90.4±4.6） μm；V=（79.8±1.9）；AM=（62.2±2.0） μm；T=（33.4±2.9） μm。

♂♂（n=14）：L=（508.7±40.3） μm；W=（18.7±1.4） μm；a=（27.3±2.3）；b=（5.7±0.5）；b′=（4.1±0.4）；c=（18.4±1.9）；c′=（2.3±0.3）；ST=（15.3±0.7） μm；AM=（56.0±4.1） μm；EP=（80.0±4.3） μm；DGO=（2.9±0.7） μm；T=（27.9±3.5） μm；Spi（交合刺長(zhǎng)）=（19.6±1.9） μm；Gub（引帶長(zhǎng)）=（4.2±0.3） μm。

2）形態(tài)特征。雌蟲（圖2）：蟲體粗短，熱殺死后蟲體僵直或成闊“C”形。體表皮紋明顯。唇區(qū)低，稍縊縮，前端平，唇環(huán)2條，唇拐角鈍圓。頭骨架中度骨化。口針發(fā)達(dá)，口針基部球圓形，寬3.9～4.7 μm，高2.4～2.7 μm。背食道腺開口距口針基部球約2.8 μm。中食道球卵圓形，占食道長(zhǎng)的42.3%～62.3%，食道腺腹面覆蓋腸。排泄孔位于食道-腸瓣門的前方，距體前端82.2～97.8 μm，半月體緊靠在排泄孔的前面，約占2個(gè)體環(huán)寬。前生單卵巢，卵母細(xì)胞單行排列，前端較直或有回折。受精囊明顯，長(zhǎng)卵圓形，受精囊中有精子。后陰子宮囊長(zhǎng)度是體直徑的1.0～1.6倍，末端有分化，是一個(gè)退化的卵巢。有陰道。尾成亞圓柱形，末端無(wú)紋，通常尾端具一明顯的凹痕，少數(shù)平截、鈍圓或不規(guī)則齒狀。

雄蟲：常見。體前部與雌蟲相似，僅體較短。交合刺纖細(xì)（圖2），長(zhǎng)度為16.6～24.8 μm，引帶長(zhǎng)3.9～4.9 μm，交合傘邊緣具有微弱刻痕。

2.2.3 刻痕短體線蟲（Pratylenchus crenatus Loof，1960）

1）測(cè)量數(shù)據(jù)?！狻猓╪=2）：L=（548.0±7.4） μm；W =（21.0±0.4） μm；a=（26.2±0.9）；b=（5.9±0.3）；b′=（3.9±0.02）；c =（18.8±0.7）；c′=（2.0±0.06）；ST=（17.5±0.6） μm；DGO=（3.3±0.1） μm；EP=（87.8±3.5） μm；AM=（63.9±4.8） μm；V=（80.0±1.9）；T=（29.2±1.4） μm。

2）形態(tài)特征。雌蟲（圖3）：經(jīng)溫?zé)釟⑺篮笙x體直形或尾部稍彎，體環(huán)紋明顯。唇區(qū)較高，縊縮，具3條唇環(huán)，唇前端平。頭架中等骨化，向后延伸至一個(gè)體環(huán)處?？卺樰^發(fā)達(dá)，有較大的基部球，基部球高為2.3～2.5 μm，寬為3.9～4.1 μm。中食道球近卵圓形，占食道長(zhǎng)的43.2%～46.9%。食道腺?gòu)母姑娓采w腸的前端。排泄口在食道與腸交界處的前方。半月體長(zhǎng)約2 個(gè)體環(huán)寬，緊靠在排泄口的前方。單卵巢，前伸，卵母細(xì)胞單行排列，在生殖區(qū)偶爾雙行排列，陰門通常位于體長(zhǎng)的78.6%～81.3%處，受精囊空。后陰子宮囊長(zhǎng)度約為陰門處體寬的2 倍。尾常呈棒狀，末端鈍圓，具明顯的表皮紋。雄蟲：未見。

2.2.4 扁尾螺旋線蟲（Helicotylenchus platyurus Perry in Perry，Darling Thorne，1959 ）

1）測(cè)量數(shù)據(jù)?！狻猓╪=2）：L=（882.3±99.0） μm；W=（28.1±4.3） μm；a=（31.5±1.3）；b=（6.6±0.3）；b′=（5.6±0.4）；c=（39.2±1.9）；c′=（1.4±0.07）；ST=（25.5±0.5） μm；AM=（76.9±1.0） μm；V=（58.1±3.1）；ABW=（15.9±1.0） μm；T=（22.5±1.4） μm。

2）形態(tài)特征。雌蟲（圖4）：體螺旋形。唇區(qū)高，半球形，有4～5個(gè)唇環(huán)。唇區(qū)與蟲體連續(xù)?？卺樆壳驁A形，前緣平。背食道腺開口于基部球后9～11 μm處，中食道球圓形。排泄孔距蟲體前端約117.9 μm，通常位于食道-腸瓣膜之前。半月體位于排泄孔前2～3體環(huán)處。陰門橫裂，卵巢直伸。尾部背面彎弧大，末端半球形，有9～17個(gè)腹環(huán)。雄蟲：未見。

2.2.5 擬強(qiáng)壯紐帶線蟲（Hoplolaimus pararobustus （Schuurmans Stekhoven Teunissen，1938） Sher，1963）

1）測(cè)量數(shù)據(jù)。♀♀（n=5）：L=（1 347.2±49.3） μm；W=（51.5±4.8） μm；a=（26.3±2.4）；b=（8.3±0.5）；b′=（6.7±0.7）；c=（51.5±4.2）；c′=（0.8±0.06）；ST=（42.1±0.8） μm；DGO=（6.6±1.4） μm；O=（15.5±3.2）；MBW（中食道球?qū)挾龋?（20.8±2.4） μm；V=（56.7±1.5）；T=（26.2±1.9） μm。

2）形態(tài)特征。雌蟲（圖5）：體為圓筒形，溫和熱殺死后蟲體呈“C”形，體表環(huán)紋明顯，唇區(qū)半球形，縊縮，通常有4個(gè)明顯唇環(huán)，唇基環(huán)較寬。頭架高度骨化。口針強(qiáng)壯，口針基桿與錐體部幾乎等長(zhǎng)，口針基部球?yàn)橛艚鹣阈?，?個(gè)或2個(gè)以上的前緣凸。排泄孔明顯，半月體兩體環(huán)長(zhǎng)，位于排泄孔后。無(wú)側(cè)區(qū)，側(cè)尾腺口大，盾片狀，不對(duì)稱。背食道腺開口到口針基部球的距離為5.5～8.1 μm；中食道球近圓形，肌肉化明顯，中央有1個(gè)非常明顯的瓣門；食道腺?gòu)谋趁婊騻?cè)背面覆蓋腸。卵巢1對(duì)。受精囊球狀，有精子。尾短，長(zhǎng)為26.2 μm，尾長(zhǎng)小于肛門處蟲體寬度，末端鈍圓，通常有7～15條環(huán)紋。雄蟲：未見。

3 小結(jié)與討論

在湖北省十堰市、咸豐縣等地8個(gè)煙草線蟲樣本中鑒定出6屬8種線蟲，分別為異頭絲尾墊刃線蟲、咖啡短體線蟲、刻痕短體線蟲、扁尾螺旋線蟲、擬強(qiáng)壯紐帶線蟲、花生根結(jié)線蟲、南方根結(jié)線蟲和燕麥真滑刃線蟲，其中異頭絲尾墊刃線蟲、刻痕短體線蟲和擬強(qiáng)壯紐帶線蟲為我國(guó)煙草土壤中新發(fā)現(xiàn)的植物線蟲種類。

煙草根結(jié)線蟲病是一種世界性病害，我國(guó)除黑龍江、吉林等省外，幾乎各主要植煙?。ㄖ陛犑?、自治區(qū)）均有發(fā)生，發(fā)生較重的有四川、重慶、云南、廣西、湖北、河南和山東等省（直轄市、自治區(qū)），通過(guò)此次調(diào)查我們發(fā)現(xiàn)近十年來(lái)湖北省煙草上根結(jié)線蟲的種類和優(yōu)勢(shì)種發(fā)生了一定變化，原來(lái)以南方根結(jié)線蟲和爪哇根結(jié)線蟲為主[3]，目前看優(yōu)勢(shì)種群為花生根結(jié)線蟲和南方根結(jié)線蟲。短體線蟲又名根腐線蟲，是煙草等作物上的又一類重要病原線蟲，它們侵染煙草后可造成根系壞死，并誘發(fā)青枯病、根腐病等土傳病。在湖北省煙草土壤中發(fā)現(xiàn)了2種短體線蟲，說(shuō)明煙草受短體線蟲為害的風(fēng)險(xiǎn)較大。絲尾線蟲和真滑刃線蟲是土壤中常見線蟲，其寄生性不詳，煙草受其為害的風(fēng)險(xiǎn)極小。紐帶線蟲和螺旋線蟲屬外寄生植物線蟲，只有當(dāng)群體密度很大時(shí)，才能對(duì)寄主植物造成一定為害，煙草受其為害的風(fēng)險(xiǎn)較小。

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收稿日期：2012-04-01

基金項(xiàng)目：中國(guó)煙草總公司資助項(xiàng)目（110200902065）

作者簡(jiǎn)介：李建立（1986-），女，天津人，在讀碩士研究生，研究方向?yàn)橹参锞€蟲學(xué)，（電話）15275225228（電子信箱）lijiujiu222@163.com；

通訊作者，趙洪海，男，副教授，主要從事植物線蟲學(xué)研究工作，（電子信箱）hhzhao@qau.edu.cn。