北京四環(huán)科寶制藥有限公司（100070）曹相林 陳婧 陳懷鑫

鹽酸奧洛他定片可用于過敏性鼻炎及蕁麻疹的治療，可改善皮膚病伴瘙癢癥狀[1]。鹽酸奧洛他定原料有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定方法在USP34中有收載，我們通過大量實(shí)驗(yàn)建立了一種有效控制鹽酸奧洛他定片有關(guān)物質(zhì)的方法，并將自擬方法和USP34方法進(jìn)行對(duì)比分析。檢測(cè)數(shù)據(jù)顯示兩種方法均能對(duì)各已知雜質(zhì)進(jìn)行較好地分離檢測(cè)，對(duì)未知雜質(zhì)的檢測(cè)，USP方法相比于自擬方法對(duì)有些未知降解產(chǎn)物影響較小，檢測(cè)出來的雜質(zhì)個(gè)數(shù)也較自擬方法少，因此選用自擬方法作為鹽酸奧洛他定片的有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)方法，并申請(qǐng)了專利。

1 儀器與試藥

島津LCSolution高效液相色譜儀（日本島津公司）； CP225D型電子天平（德國賽多利斯公司）；鹽酸奧洛他定對(duì)照品（批號(hào)：101001）常州市亞邦醫(yī)藥研究所有限公司；雜質(zhì)（E）-異構(gòu)體（批號(hào)：070712）常州市亞邦醫(yī)藥研究所有限公司；雜質(zhì)B（批號(hào)：FOJ016）USP藥典委員會(huì)；乙腈為色譜純，水為純化水，其余試劑均為分析純。

2 HPLC測(cè)定方法的建立與驗(yàn)證

2.1色譜條件的建立 參考相關(guān)文獻(xiàn)，初步確定采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，并進(jìn)行了如下篩選：①離子對(duì)試劑：本品的保留隨離子對(duì)試劑的濃度增加而增加，但20mmol/L以上時(shí)增加不明顯。②磷酸鹽：本品的保留隨磷酸鹽濃度的增加而增加，但20mmol/L以上時(shí)增加不明顯。③pH值：因成離子對(duì)，pH值為酸性，3.0與3.5無明顯差別。綜合上述研究，確立了本品的色譜條件。

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)的確定 將鹽酸奧洛他定對(duì)照品、起始原料及合成中間體溶于流動(dòng)相進(jìn)行紫外掃描，結(jié)果表明起始原料和中間體均在230nm和275nm處有較大吸收，鹽酸奧洛他定在298nm和212nm處有較大吸收，在275nm左右為最小吸收，因此最終選擇230nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。

2.3靈敏度試驗(yàn) 通過試驗(yàn)確立了本品的最小檢測(cè)限為0.4ng，最小定量限為2ng。靈敏度符合要求。

附表1 有關(guān)物質(zhì)色譜條件的對(duì)比

附表2 自擬方法和USP方法檢測(cè)數(shù)據(jù)對(duì)比

附表3 自制樣品與原研樣品的對(duì)比檢測(cè)

2.4輔料干擾試驗(yàn) 經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證選用本HPLC測(cè)定方法，空白輔料不干擾樣品的雜質(zhì)檢測(cè)。

2.5系統(tǒng)適用性 取鹽酸奧洛他定對(duì)照品、（E）-異構(gòu)體和雜質(zhì)B用流動(dòng)相配制成各約含0.02mg/mL的混合溶液，作為系統(tǒng)適用性溶液，進(jìn)樣檢測(cè)，（E）-異構(gòu)體與鹽酸奧洛他定的分離度為7.7；雜質(zhì)B與鹽酸奧洛他定的分離度為1.9。

2.6自擬方法與USP方法對(duì)比檢測(cè) 我們分別采用USP34方法和自擬方法檢測(cè)經(jīng)強(qiáng)酸、高溫、強(qiáng)堿、光照破壞和氧化破壞的原料及制劑樣品，結(jié)果表明采用自擬方法檢測(cè)破壞試驗(yàn)的樣品，所產(chǎn)生的雜質(zhì)峰分離度能達(dá)到要求，輔料、空白溶劑峰無干擾。對(duì)USP34方法和自擬方法的檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比可知，兩種方法均能對(duì)各已知雜質(zhì)進(jìn)行較好地分離檢測(cè)，對(duì)未知雜質(zhì)的檢測(cè)，USP方法相比于自擬方法對(duì)有些未知降解產(chǎn)物響應(yīng)較小，檢測(cè)出來的雜質(zhì)個(gè)數(shù)也較自擬方法少。USP方法和自擬方法的色譜條件見附表1，制劑樣品破壞試驗(yàn)具體數(shù)據(jù)見附表2。

2.7耐用性 為考察測(cè)定條件發(fā)生細(xì)小變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果的承受程度，我們考察了以下因素：色譜儀（島津SPD-M20A和安捷倫1260）、色譜柱品牌（Agilent和DIKMA）。

取本品研細(xì)的粉末適量（約相當(dāng)于含鹽酸奧洛他定5mg），精密稱定，加流動(dòng)相配制成1mL中含鹽酸奧洛他定200μg的溶液，過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液，按測(cè)定法檢測(cè)，結(jié)果表明：色譜儀和色譜柱等有小的變動(dòng)時(shí)，對(duì)檢測(cè)結(jié)果無明顯影響。

2.8自制樣品與原研樣品的對(duì)比檢測(cè) 取3批自制樣品與協(xié)和發(fā)酵麒麟株式會(huì)社富士工廠生產(chǎn)的原研制劑，采用修訂后的有關(guān)物質(zhì)檢查方法進(jìn)行對(duì)比檢測(cè)，數(shù)據(jù)見附表3。結(jié)果表明，三批自制樣品的雜質(zhì)水平優(yōu)于原研制劑。

3 討論

本文通過進(jìn)行流動(dòng)相的篩選、檢測(cè)波長(zhǎng)的確定、靈敏度試驗(yàn)、輔料干擾試驗(yàn)、系統(tǒng)適用性、耐用性、破壞試驗(yàn)及與美國藥典方法的對(duì)比檢測(cè)等相關(guān)研究，建立了鹽酸奧洛他定片的有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法，經(jīng)驗(yàn)證該方法靈敏度高，快速準(zhǔn)確，重現(xiàn)性好，輔料不干擾檢測(cè)，各雜質(zhì)的分離度能達(dá)到要求，且對(duì)本品未知雜質(zhì)的檢出能力優(yōu)于美國藥典方法。本方法可以很好地控制鹽酸奧洛他定片的質(zhì)量。