熊水蓮 ，袁秀紅 ，侯 莉

（1.江西制藥有限責(zé)任公司質(zhì)量檢驗(yàn)部，南昌 330052；2.中藥固體制劑制造技術(shù)國(guó)家工程研究中心，南昌 330006）

腎寶合劑藥理作用是調(diào)節(jié)陰陽(yáng)，溫陽(yáng)補(bǔ)腎，扶正固本；主要用于腰腿酸痛、精神不振、夜尿頻多、畏寒怕冷及婦女月經(jīng)過(guò)多、白帶清晰等。為確保產(chǎn)品質(zhì)量，本文采用高效液相色譜法（HPLC）測(cè)定腎寶合劑中淫羊藿苷的含量，獲得良好效果，為腎寶合劑的質(zhì)量控制提供一種簡(jiǎn)便快速的方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1100型高效液相色譜儀，包括G1379A真空脫氣機(jī)，G1310A四元泵，G1313A自動(dòng)進(jìn)樣器，G1314A紫外檢測(cè)器。色譜柱Diamonsil C18，5 μm，4.6 mm×250 mm。

1.2 藥品和試劑

淫羊藿苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào): 200501），腎寶合劑樣品（江西制藥有限責(zé)任公司，批號(hào):1107062、1107063、1107064、1107065、1 107066）。甲醇、乙腈均為色譜純，試驗(yàn)用水:新鮮純化水。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱為 Diamonsil C18，5 μm，4.6 mm×250 mm；流動(dòng)相為乙腈-水（27∶73）；流速:1.0 mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)為 270 nm，柱溫:30 ℃ ，進(jìn)樣量:20 μL。

2.2 溶液的制備

1）對(duì)照品溶液的制備:精密稱取105℃干燥至恒重的淫羊藿苷對(duì)照品10.3 mg，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻；再精密吸取1 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。

2）供試品溶液的制備:精密量取本品2 mL置25 mL量瓶中，加甲醇適量，超聲處理10 min，放冷至室溫，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45 μm）濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。

2.3 線性關(guān)系的考察

分別吸取對(duì)照品溶液 1、2、4、6、8 mL，用甲醇稀釋并定容至10 mL量瓶中，分別吸取20 μL，注入液相色譜儀中，以對(duì)照品選擇量為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

回歸方程為:Y=2.188217×104X-2415.6，r=0.9998。 線性范圍為:1.04～8.32 μg·mL-1。

2.4 精密度測(cè)定

取同批樣品5份，按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)所述的色譜條件分別進(jìn)樣平行測(cè)定5次，計(jì)算RSD為0.9%。說(shuō)明精密度高，重復(fù)性好。

2.5 穩(wěn)定性考察

按本品供試品溶液的制備方法制備供試品溶液，室溫密閉放置，于 0、2、4、6、8、10 h，分別進(jìn)樣20 μL，結(jié)果RSD為0.9%。結(jié)果表明本品按本法檢測(cè)，其結(jié)果穩(wěn)定性較好。

2.6 回收率實(shí)驗(yàn)

精密吸取已知含量的樣品5 mL，置25 mL量瓶中，定量加入淫羊藿苷對(duì)照品溶液,加甲醇稀釋至刻度，搖勻。共測(cè)定同批號(hào)的5個(gè)樣品，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.7 樣品測(cè)定

取各批次樣品按“2.2”項(xiàng)下方法制備供試品溶液，按“2.1”項(xiàng)所述的色譜條件，分別精密量取對(duì)照品溶液及供試品溶液各20 μL，測(cè)定峰面積。按外標(biāo)法計(jì)算，結(jié)果表2。結(jié)果表明，該5批腎寶合劑樣品的含量均符合規(guī)定（每mL本品淫羊藿苷不少于0.10 mg）。

表2 5批次腎寶合劑含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

腎寶合劑其有效成分淫羊霍苷含量測(cè)定方法原為薄層色譜掃描法。但原測(cè)定方法在檢測(cè)時(shí)樣品處理較為復(fù)雜，實(shí)驗(yàn)耗時(shí)長(zhǎng)，若處理不當(dāng)，雜質(zhì)較多，且難分離；相對(duì)誤差較大，結(jié)果重現(xiàn)性差［1］。

為改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法，本文采用HPLC測(cè)定腎寶合劑中淫羊藿苷的含量，用乙腈－水（27∶73）為流動(dòng)相，樣品分離度好。

因HPLC檢測(cè)器為紫外檢測(cè)器，所以HPLC波長(zhǎng)的選擇和紫外波長(zhǎng)選擇一致，均為選擇最大吸收。通過(guò)全波長(zhǎng)掃描，讀取對(duì)應(yīng)物質(zhì)吸收峰最大時(shí)候的波長(zhǎng)為270 nm，因而選用此波長(zhǎng)，基線平穩(wěn)，使理論板數(shù)和分離度達(dá)到高要求。

本研究結(jié)果顯示用HPLC測(cè)定腎寶合劑中淫羊藿苷的含量具有操作簡(jiǎn)便、測(cè)定時(shí)間短、檢測(cè)成本低、精密度高、重現(xiàn)性好、結(jié)果準(zhǔn)確可靠的優(yōu)點(diǎn)，可作為腎寶合劑的質(zhì)量控制方法。

［1］郭拓云，于新蘭，李革.腎寶合劑高效液相含量測(cè)定方法的研究［J］.新疆中醫(yī)藥，2010，28（3）:283-284.