王豐偉，薛佩佩（1.瑞安市人民醫(yī)院，浙江瑞安3500；.溫州醫(yī)學(xué)院，浙江溫州35035）

二乙酰氨乙酸乙二胺注射液為我國(guó)自行研制的止血藥，能促使纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白，并能促使血小板釋放凝血活性物質(zhì)，加速血液凝固。主要應(yīng)用于消化道出血、眼鼻出血、婦科出血、痔瘡出血、外科出血等，均有較好療效，已廣泛應(yīng)用于臨床[1]。我院臨床上常將二乙酰氨乙酸乙二胺注射液與果糖氯化鈉注射液、5%果糖注射液、5%轉(zhuǎn)化糖注射液配伍使用，故考察其穩(wěn)定性具有一定的臨床意義。由于目前尚無(wú)相關(guān)報(bào)道，本文通過(guò)外觀性狀、pH值及含量變化，考察其配伍穩(wěn)定性，為臨床用藥提供參考。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

BECKMAN-126型高效液相色譜儀，包括125泵、166檢測(cè)器（美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司）；電熱恒溫水溫箱（上海醫(yī)用恒溫設(shè)備廠）；AB104-S電子天平（上海帥寧儀器有限公司）；PHSJ-4型酸度計(jì)（上海雷磁儀器廠）；TU-1901型雙光束紫外分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）。

1.2 試藥

果糖氯化鈉注射液（南京小營(yíng)藥業(yè)集團(tuán)有限公司，規(guī)格：500m L，批號(hào)：2010041501）；5%果糖注射液（江蘇正大豐海制藥有限公司，規(guī)格：250m L，批號(hào)：1007091）；5%轉(zhuǎn)化糖注射液（四川美大康佳樂(lè)藥業(yè)有限公司，規(guī)格：250 m L，批號(hào)：10102362）；二乙酰氨乙酸乙二胺注射液（華北制藥股份有限公司，規(guī)格：300mg，批號(hào)：101203）；二乙酰氨乙酸乙二胺對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100795-200401）；乙腈為色譜純，磷酸二氫鉀為分析純。

2 方法與結(jié)果[2]

2.1 色譜條件

色譜柱：ODS2（250mm×4.6mm，5μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.05 mol·L－1磷酸二氫鉀（2∶98，pH2.3）；流速：1.0m L·min－1；檢測(cè)波長(zhǎng)：210 nm；柱溫：30℃，進(jìn)樣量：20μL。

2.2 溶液的制備

2.2.1 二乙酰氨乙酸乙二胺貯備液：準(zhǔn)確稱(chēng)取二乙酰氨乙酸乙二胺對(duì)照品30mg，置于10m L量瓶中，甲醇溶解并定容，即得3mg·m L－1對(duì)照品溶液。

2.2.2 配伍液：取2支二乙酰氨乙酸乙二胺注射液，分別加5%果糖、果糖氯化鈉、5%轉(zhuǎn)化糖注射液（各3份）中溶解，搖勻，制得濃度為2 400μg·m L－1的溶液。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備

精密量取“2.2.1”項(xiàng)下二乙酰氨乙酸乙二胺貯備液0.25、0.5、1、1.5、2、2.5m L，分別置于10m L 量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得到對(duì)照品溶液A、B、C、D、E、F。在“2.1”項(xiàng)色譜條件下，分別取20μL進(jìn)樣測(cè)定，記錄峰面積，以濃度（c）為橫坐標(biāo)，峰面積（A）為縱坐標(biāo)，求得回歸方程A＝6 950.757c+50 512.13（r＝0.999 8）。結(jié)果表明二乙酰氨乙酸乙二胺檢測(cè)濃度在75～750μg·m L－1范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。

2.4 精密度試驗(yàn)

取“2.3”項(xiàng)下二乙酰氨乙酸乙二胺對(duì)照品溶液B，按含量測(cè)定方法，連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定6次，計(jì)算得峰面積的RSD為0.32%。

2.5 回收率試驗(yàn)

精密量取“2.3”項(xiàng)下3種不同濃度的對(duì)照品溶液（B、C、D）各2m L（每個(gè)濃度取3份），加入精密量取的已知濃度二乙酰氨乙酸乙二胺樣品溶液2m L，共取9份，搖勻，分別直接進(jìn)樣測(cè)定，代入相應(yīng)的回歸方程，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）Tab 1 Resultsof recovery tests（n＝9）

2.6 干擾試驗(yàn)

將5%果糖注射液、果糖氯化鈉注射液、5%轉(zhuǎn)化糖注射液與二乙酰氨乙酸乙二胺注射液及其配伍液用純化水稀釋到適宜的濃度，按“2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣，結(jié)果果糖、轉(zhuǎn)化糖與二乙酰氨乙酸乙二胺的色譜峰能較好地分離、無(wú)干擾。色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜圖A.5%果糖注射液；B.果糖氯化鈉注射液；C.5%轉(zhuǎn)化糖注射液；D.二乙酰氨乙酸乙二胺注射液；E.5%果糖與二乙酰氨乙酸乙二胺配伍液；F.果糖氯化鈉與二乙酰氨乙酸乙二胺配伍液；G.5%轉(zhuǎn)化糖與二乙酰氨乙酸乙二胺配伍液；1.果糖；2.二乙酰氨乙酸乙二胺Fig 1 HPLC chromatogram sA.5%Frutose injection；B.Frutose and sodium chloride injection；C.5%Calorose injection；D.Erthylenediamine diaceturate injection；E.5%fructose mixed with ethylenediamine diaceturate solution；F.fructose and sodium chloride mixed with ethylenediamine diaceturate solution；G.5%calorosemixed with erthylenediamine diaceturate solution；1.frutose；2.erthylenediamine diaceturate

2.7 配伍液穩(wěn)定性試驗(yàn)

取“2.2.2”項(xiàng)下9份配伍液，置于30℃恒溫水浴箱中，分別于0、0.5、1、2、4、6 h時(shí)取樣，作以下考察。

2.7.1 外觀性狀、pH值變化考察：5%果糖、果糖氯化鈉、5%轉(zhuǎn)化糖注射液分別作對(duì)照，用納氏比色管觀察顏色變化并測(cè)定pH值。結(jié)果表明，3種配伍液放置于30℃恒溫水浴箱中6 h內(nèi)無(wú)顏色變化，外觀透明澄清，無(wú)沉淀、氣體和混濁產(chǎn)生，pH值變化結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 3種配伍液的pH值隨時(shí)間變化結(jié)果Tab 2 pH value of 3 kinds of mixtures at different tim e points

2.7.2 含量變化：分別取3種配伍液，稀釋10倍得二乙酰氨乙酸乙二胺濃度為240μg·m L－1的試驗(yàn)樣品，各試驗(yàn)樣品進(jìn)樣3次，以峰面積平均值代入回歸方程，得出不同時(shí)間的藥物濃度，以配伍即刻（0 h）的含量為100%，計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)2種組分的相對(duì)含量。結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 3種配伍液中二乙酰氨乙酸乙二胺的相對(duì)含量變化結(jié)果Tab 3 Relative contents of erthylenediamine diaceturate in 3 kinds of mixtures

2.8 配伍結(jié)果

二乙酰氨乙酸乙二胺與3種輸液的配伍液在6 h內(nèi)其外觀性狀、pH值均無(wú)明顯的改變。與5%轉(zhuǎn)化糖注射液配伍的溶液基本穩(wěn)定，在6 h內(nèi)含量無(wú)明顯的改變；與果糖氯化鈉注射液配伍的溶液穩(wěn)定性稍差，在2 h內(nèi)含量無(wú)明顯的改變；與5%果糖注射液配伍的溶液穩(wěn)定性差，不宜配伍使用。

3 討論

由于夏天溫度偏高，藥品被降解的速度可能會(huì)加快，故選30℃恒溫水浴箱作為儲(chǔ)藏溫度。

本試驗(yàn)提示，二乙酰氨乙酸乙二胺與5%轉(zhuǎn)化糖注射液配伍后應(yīng)在6 h內(nèi)輸注完畢，與果糖氯化鈉注射液配伍后應(yīng)在2 h內(nèi)輸注完畢，不可與5%果糖注射液配伍使用。

本試驗(yàn)的流動(dòng)相嘗試過(guò)多種，有甲醇-水、乙腈-水、甲醇-磷酸二氫鉀等，但最終使用乙腈-0.5mol·L－1磷酸二氫鉀（2∶98）為流動(dòng)相時(shí)二乙酰氨乙酸乙二胺與這3種注射液分離的效果較好，因此選用其作為本試驗(yàn)流動(dòng)相。

[1]周文艷，趙少玲.高效液相色譜法測(cè)定二乙酰氨乙酸乙二胺注射液的有關(guān)物質(zhì)[J].安徽醫(yī)藥，2005，9（1）：43.

[2]楊繼章，趙增仁.注射用加替沙星與酚磺乙胺注射液的配伍穩(wěn)定性考察[J].中國(guó)藥房，2008，19（2）：116.