劉 羽 焦志凱 李 勇 范立僑 趙 群 郝英杰 檀碧波

(河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院外三科，河北 石家莊 050011)

胃癌是我國(guó)常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其病死率居各種惡性腫瘤之首。早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷對(duì)胃癌的防治具有重要意義。目前胃癌主要依靠胃鏡及活檢病理確診，有一定痛苦，患者不易接受，且不適合對(duì)大樣本高危人群動(dòng)態(tài)觀察，血清、血漿腫瘤標(biāo)志物由于檢查方便、快速、無(wú)創(chuàng)，易于被患者接受，已成為最方便、最廣泛應(yīng)用于臨床的輔助檢查方法。近年來(lái)，腫瘤標(biāo)志物的研究已成為防治胃癌的熱點(diǎn)〔1～3〕，但對(duì)其報(bào)道一般僅限于患者的外周血，對(duì)胃癌患者骨髓的研究尚未見(jiàn)報(bào)道，本研究選用癌胚抗原(CEA)、糖類(lèi)抗原 72-4(CA72-4)、胃癌相關(guān)抗原(MG7-Ag)三種腫瘤標(biāo)志物，進(jìn)行胃癌患者血清及骨髓中三種腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)，分析其單項(xiàng)、聯(lián)合檢測(cè)的意義，為臨床早期診斷胃癌提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象 選取河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院外三科2009年10月至2010年12月入院的胃癌患者61例，均行根治性手術(shù)切除，未接受過(guò)放、化療。其中男49例，女12例，年齡30～76〔平均(59.51±9.30)〕歲。取血清及骨髓為研究對(duì)象，均得到患者或委托人同意并簽字。正常組標(biāo)本均來(lái)自健康志愿捐獻(xiàn)者，共計(jì)32例。

1.2 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器 CEA放射免疫分析試劑盒(北京北免東雅生物技術(shù)研究所)，MG7-Ag ELISA試劑盒(Altru Biomedical Inc USA)，CA72-4 ELISA 試劑盒(Altru Biomedical Inc USA)。超低溫冰箱(日本SANYO MDFU50V)，酶標(biāo)儀(澳大利亞biocell ht2)，恒溫水溫箱(溫州永強(qiáng)醫(yī)療器械廠)，放射免疫γ計(jì)數(shù)器(上海原子核研究所日環(huán)儀器一廠SN-684型)。

1.3 方法

1.3.1 外周血及骨髓采集方法

1.3.1.1 外周血采集 術(shù)前由外周靜脈取血3 ml，不加抗凝劑，離心機(jī)2000 r/min離心10 min，分離上清儲(chǔ)存至低溫冰箱備用。

1.3.1.2 骨髓采集 以骨髓檢測(cè)常用的髂前上棘穿刺法取髓3 ml，不加抗凝劑，離心機(jī)2000 r/min離心10 min，分離上清儲(chǔ)存至低溫冰箱備用。

1.3.2 CA72-4、MG7-Ag、CEA檢測(cè) ELISA法檢測(cè)外周血及骨髓中CA72-4、MG7-Ag的含量，RIA法檢測(cè)外周血及骨髓中CEA的含量。

1.3.3 結(jié)果判定 根據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)，CA72-4、MG7-Ag均以＞6 U/ml為陽(yáng)性表達(dá)，CEA＞20 ng/ml為陽(yáng)性表達(dá)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件，結(jié)果以±s表示，采用兩樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)、相關(guān)分析等方法。

2 結(jié)果

2.1 胃癌患者與正常人血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量比較 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量明顯高于相應(yīng)的正常組(P＜0.01);胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量與胃癌血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量對(duì)比差異無(wú)顯著性(P＞0.05)，正常骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量與正常血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量對(duì)比差異無(wú)顯著性(P＞0.05)。見(jiàn)表1。

表1 各組血清及骨髓中 CA72-4、MG7-Ag、CEA含量(±s)

表1 各組血清及骨髓中 CA72-4、MG7-Ag、CEA含量(±s)

與正常組比較:1)P＜0.01

組別 n CEA(ng/ml) CA72-4(U/ml) MG7-Ag(U/ml)血清正常組 32 11.52±6.75 2.85±1.56 3.21±2.56胃癌組 61 29.73±35.521) 17.37±29.611) 21.76±42.011)骨髓正常組 32 10.58±8.24 3.05±1.16 3.22±1.98胃癌組 61 34.82±35.501) 17.81±23.201) 25.96±43.321)

2.2 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA單獨(dú)及聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性表達(dá) 胃癌血清及骨髓檢測(cè)陽(yáng)性率在單一指標(biāo)檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)均高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＜0.01)。胃癌血清三者聯(lián)合陽(yáng)性率較單一指標(biāo)CEA、CA72-4為高;胃癌骨髓三者聯(lián)合陽(yáng)性率均高于單一指標(biāo)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＜0.05)。胃癌血清、骨髓三者聯(lián)合檢測(cè)分別為70.49%、78.69%，雖較二指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)陽(yáng)性率有所升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見(jiàn)表2。

表2 各組血清及骨髓CEA、CA72-4、MG7-Ag單一檢測(cè)和聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性表達(dá)情況〔n(%)〕

2.3 胃癌患者血清及骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相關(guān)性分析

2.3.1 胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相關(guān)性分析 胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量?jī)蓛上啾染嬖陲@著相關(guān)。CA72-4含量與CEA含量呈明顯正相關(guān)(r=0.722，P＜0.01);MG7-Ag含量與CEA含量呈明顯正相關(guān) (r=0.745，P＜0.01);CA72-4含量與MG7-Ag含量呈明顯正相關(guān)(r=0.921，P ＜0.01)。

2.3.2 胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量的相關(guān)性分析 胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量?jī)蓛上啾染@著相關(guān)。CA72-4含量與CEA含量呈明顯正相關(guān)(r=0.826，P＜0.01);MG7-Ag含量與CEA含量呈明顯正相關(guān)(r=0.906，P＜0.01);CA72-4含量與 MG7-Ag含量呈明顯正相關(guān)(r=0.862，P ＜0.01)。

2.4 CA72-4、MG7-Ag、CEA各自分別在胃癌患者血清及骨髓中含量的相關(guān)性分析 CA72-4在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明顯正相關(guān)(r=0.871，P＜0.01);MG7-Ag在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明顯正相關(guān)(r=0.973，P＜0.01);CEA在胃癌患者血清和骨髓中的含量呈明顯相關(guān)(r=0.757，P＜0.01)。

3 討論

CA72-4屬糖蛋白類(lèi)癌胚抗原，由乳腺癌肝轉(zhuǎn)移細(xì)胞的細(xì)胞膜成分免疫小鼠所得，對(duì)惡性腫瘤特異性高，在健康人和良性疾病患者血液中極少出現(xiàn)，對(duì)癌癥的正確診斷具有一定價(jià)值，文獻(xiàn)報(bào)道其陽(yáng)性檢測(cè)率為36% ～94%〔4〕;MG7-Ag是由鼠源性抗人胃癌單克隆抗體MG7發(fā)現(xiàn)的胃腸道腫瘤相關(guān)抗原，亦屬糖蛋白抗原，對(duì)胃癌有較高的敏感性和特異度〔5，6〕;CEA是研究較為成熟的腫瘤標(biāo)志物，在診斷、監(jiān)測(cè)預(yù)后和指導(dǎo)治療中均有一定意義，且具有價(jià)廉等優(yōu)點(diǎn)，適用于消化道腫瘤的聯(lián)合檢測(cè)及對(duì)比研究〔7〕。本研究結(jié)果顯示胃癌患者血清中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量明顯高于相應(yīng)的對(duì)照組，與文獻(xiàn)報(bào)道一致。同時(shí)我們還檢測(cè)了胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA的含量，旨在為腫瘤診斷尋找新的領(lǐng)域，結(jié)果顯示胃癌患者骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量亦明顯升高，可能的解釋為:抗原物質(zhì)經(jīng)血液循環(huán)進(jìn)入造血系統(tǒng);骨髓中有轉(zhuǎn)移的癌細(xì)胞或形成轉(zhuǎn)移灶，進(jìn)而產(chǎn)生抗原物質(zhì)。結(jié)果還顯示CA72-4、MG7-Ag、CEA在胃癌血清、骨髓中存在明顯的正相關(guān)性，說(shuō)明骨髓中有著與血中類(lèi)似的表達(dá)趨勢(shì)，因此，檢測(cè)骨髓中CA72-4、MG7-Ag、CEA含量對(duì)胃癌診斷也具有一定價(jià)值。

單一檢測(cè)某項(xiàng)腫瘤標(biāo)志物有一定的局限性，因此近年來(lái)許多學(xué)者著重于聯(lián)合檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物，以提高診斷的敏感性和特異性，其中 CEA、CA724、MG7-Ag 二二聯(lián)合檢測(cè)常見(jiàn)報(bào)道〔8〕，但三種指標(biāo)的聯(lián)合檢測(cè)在文獻(xiàn)上并不多見(jiàn)。我們將CEA、CA724、MG7-Ag進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其陽(yáng)性率均高于70%，且其含量?jī)蓛杀容^均顯著正相關(guān)，提示它們?cè)诋a(chǎn)生和分泌的機(jī)制上可能有共同之處，在胃癌的侵襲轉(zhuǎn)移中可能發(fā)揮著類(lèi)似或協(xié)同的作用，同時(shí)聯(lián)合檢測(cè)時(shí)相互之間可能會(huì)有互補(bǔ)作用，從而提高陽(yáng)性率并保持一定的特異性。

總之，本研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)合檢測(cè)腫瘤標(biāo)志物具有提高胃癌陽(yáng)性檢出率的優(yōu)點(diǎn)，較單一指標(biāo)具有優(yōu)勢(shì)。但本研究樣本較小，應(yīng)進(jìn)一步擴(kuò)大研究規(guī)模，以期為聯(lián)合檢測(cè)診斷胃癌提供依據(jù)。

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