譚 昆 王書(shū)安 胡 焰 劉衛(wèi)東 王 健

徐州市醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所，江蘇 徐州 221006

微量元素是占人體總重量的1/10000以下，每人每日需要量在100 mg以下的元素。其含量雖微，但對(duì)機(jī)體代謝起著極其重要的作用。嬰幼兒微量元素缺乏對(duì)智力、免疫功能、生長(zhǎng)發(fā)育等有較大影響[1-2]。目前，我國(guó)嬰幼兒微量元素缺乏較為普遍。王冬蓮等[3]研究表明臺(tái)州地區(qū)兒童微量元素缺鐵達(dá)到17.5%，缺鋅達(dá)到32%，缺鈣達(dá)到29.6%?；鹧嬖游展庾V法測(cè)定微量元素直接采集末梢血稀釋、測(cè)定，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，適用于臨床檢驗(yàn)的需要。本研究通過(guò)對(duì)徐州市鼓樓區(qū)部分幼兒全血直接稀釋?zhuān)没鹧嬖游展庾V法測(cè)定微量元素含量，旨在分析本地區(qū)幼兒體內(nèi)微量元素水平，為臨床提供一定的理論依據(jù)，以便于早期預(yù)防。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

徐州市鼓樓區(qū)2011年2月1171名0～6歲正常體檢兒童，其中 0～1歲組 191名，2～3歲組 382名，4～6歲組 598名。

1.2 主要儀器設(shè)備及試劑

AA-6300C原子吸收分光光度計(jì)（日本島津），鐵、鋅、鈣空心陰極燈；鐵、鋅、鈣標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1 mg/mL（國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心），稀釋液為0.5%曲拉通X-100（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑廠）；超純水。所用的容器均用HNO3處理過(guò)。

1.3 方法學(xué)評(píng)價(jià)

所有檢測(cè)均是在儀器正常維護(hù)保養(yǎng)、檢測(cè)結(jié)果在控的情況下進(jìn)行的。

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 用含1%HNO3的0.5%曲拉通X-100依次稀釋鐵、鋅、鈣標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，稀釋后的各標(biāo)準(zhǔn)濃度如下，鐵：0、0.50、1.00、1.50、2.00、3.00 mg/L；鋅：0、0.10、0.25、0.50、0.75、1.00 mg/L；鈣：0、0.20、0.40、0.60、0.80 mg/L。 以各溶液濃度 C（mg/L）為橫坐標(biāo)，吸光度A為縱坐標(biāo)，在常規(guī)條件下檢測(cè)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3.2 批內(nèi)及批間精密度測(cè)定 取多份標(biāo)本充分混合，連續(xù)測(cè)定20次，計(jì)算批內(nèi)精密度，再用該份標(biāo)本每天測(cè)一次，連續(xù)測(cè)20 d，計(jì)算批間精密度，計(jì)算其平均值（x）、標(biāo)準(zhǔn)差（S）及變異系數(shù)（CV）。

1.3.3 回收率試驗(yàn) 隨機(jī)抽取1份標(biāo)本，按樣品分析方法測(cè)標(biāo)本中的鐵、鋅、鈣的含量，同時(shí)做加標(biāo)回收試驗(yàn)，鐵元素測(cè)定加入濃度為100 mg/L，鋅元素測(cè)定加入濃度為10 mg/L，鈣元素測(cè)定加入濃度為50 mg/L，平行測(cè)5次。

1.4 樣品的采集和處理

采集兒童左手無(wú)名指腹內(nèi)側(cè)指端末梢血40 μL加到1.56 mL含1%HNO3的0.5%曲拉通X-100稀釋液中混勻（稀釋40倍），用移液器吸取500 μL加入到2.0 mL0.5%曲拉通X-100稀釋液中混勻（稀釋5倍），總稀釋200倍，待測(cè)。

1.5 樣品測(cè)定

用AA-6300C原子吸收分光光度計(jì)在常規(guī)條件下測(cè)定鐵、鋅、鈣元素，根據(jù)稀釋倍數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算元素的含量。

2 結(jié)果

2.1 血樣品中各元素線性回歸結(jié)果

結(jié)果顯示，各元素回歸曲線線性良好，回歸方程如下，鐵： A=0.99728C，r=0.9984； 鋅：A=0.065018C，r=0.9919；鈣：A=0.063859C，r=0.9998。

2.2 方法的精密度測(cè)定結(jié)果

通過(guò)實(shí)驗(yàn)測(cè)定計(jì)算出批內(nèi)變異系數(shù)Fe：3.7%，Zn：1.9%，Ca：1.5%，批間變異系數(shù) Fe：4.5%，Zn：2.5%，Ca：2.7%。 見(jiàn)表1。

表1 血樣品中元素含量均值及變異系數(shù)

2.3 測(cè)定微量元素回收率結(jié)果

各微量元素回收率的測(cè)定結(jié)果，見(jiàn)表2。2.40～6歲兒童微量元素異常分布情況

表2 樣品分析及回收率結(jié)果

結(jié)果顯示，該方法測(cè)定徐州市鼓樓區(qū)正常兒童1171名全血鐵、鋅、鈣的含量，正常人全血微量元素的參考值為，鐵：421～662 mg/L；鋅：4.9～9.8 mg/L；鈣：46～84 mg/L。 微量元素異常分布結(jié)果，見(jiàn)表3。

表3 0～6歲兒童微量元素異常分布

由表3可知，缺鐵、缺鋅在0～1歲嬰兒較嚴(yán)重，缺鈣的百分率相對(duì)缺鐵、缺鋅稍低，3個(gè)年齡組隨著年齡的增長(zhǎng)所缺乏的微量元素逐漸好轉(zhuǎn)。

3 討論

目前，微量元素常用的檢測(cè)方法有分光光度法、電感耦合等離子體發(fā)射光譜法、原子吸收光譜法等。分光光度法操作簡(jiǎn)單，易于推廣，但靈敏度較低，選擇性不佳；電感耦合等離子體發(fā)射光譜法靈敏、準(zhǔn)確快速、干擾小，可同時(shí)檢測(cè)多種元素，但儀器價(jià)格昂貴，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，很難在臨床推廣。原子吸收分光光度法由于特異性高、精密度好、檢出限低、操作簡(jiǎn)便、分析速度快等特點(diǎn)成為微量元素檢測(cè)的推薦方法。全血檢測(cè)采血量小，操作簡(jiǎn)便，易于為家長(zhǎng)和兒童所接受，成為臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)嬰幼兒微量元素最常用的方法。本研究通過(guò)對(duì)鐵、鋅、鈣元素檢測(cè)進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)，表明原子吸收光譜法線性好、精密度佳，準(zhǔn)確度可靠。

微量元素的檢測(cè)是為了研究微量元素在疾病的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中與疾病的相互關(guān)系，現(xiàn)已證實(shí)，許多疾病與各種微量元素的代謝密切相關(guān)[4]。因此準(zhǔn)確地檢測(cè)體內(nèi)微量元素含量對(duì)疾病的診斷、治療和預(yù)防有重要的意義[5]。

鐵是人體含量最高的微量元素，主要合成血紅蛋白，運(yùn)輸和貯存氧，構(gòu)成細(xì)胞色素酶、過(guò)氧化物酶等人體必需酶類(lèi)，參與能量代謝和調(diào)節(jié)免疫功能等[1]。缺鐵易導(dǎo)致貧血，注意力不集中、倦怠乏力、煩躁等。本次調(diào)查顯示1歲以下兒童缺鐵較嚴(yán)重，缺乏率達(dá)37%，隨年齡增長(zhǎng)，鐵缺乏逐漸得到糾正。加強(qiáng)幼兒保健，合理喂養(yǎng)，對(duì)較大兒童糾正偏食，多吃一些禽類(lèi)、黑色食品、葉菜類(lèi)、菌類(lèi)、動(dòng)物血等可有效補(bǔ)充鐵元素。

鋅主要通過(guò)十二指腸和空腸吸收分布至全身，由糞便、尿、汗、頭發(fā)等排泄，以視網(wǎng)膜、胰腺及前列腺含鋅量高。鋅促進(jìn)機(jī)體生長(zhǎng)發(fā)育，是體內(nèi)多種酶的功能成分，在蛋白質(zhì)、脂肪、糖和核酸代謝中發(fā)揮重要作用。兒童生長(zhǎng)發(fā)育迅速，鋅的需求量大，再加上嬰兒較小，吃的食物較單一，易導(dǎo)致鋅的缺乏[6]。缺鋅易導(dǎo)致消化功能減退、免疫力降低、厭食、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、毛發(fā)枯黃、智力水平發(fā)展低下等[7-8]。缺鋅的防治可采用飲食及鋅劑來(lái)治療，如多食瘦肉、蛋黃、動(dòng)物肝臟等，葡萄糖酸鋅由于口感柔和，適合兒童口味，是兒童補(bǔ)鋅的首選鋅劑。

鈣鹽是體內(nèi)含量最多的無(wú)機(jī)鹽，主要存在于骨骼和牙齒中。兒童長(zhǎng)期缺鈣易患佝僂病、骨軟化病等。近年來(lái)，全民補(bǔ)鈣的意識(shí)在增強(qiáng)，缺鈣的兒童在減少，結(jié)果顯示，隨著兒童年齡的增長(zhǎng)，攝入食物的多樣化，缺鈣情況好轉(zhuǎn)，這與家長(zhǎng)的合理膳食有關(guān)。

因此，了解兒童體內(nèi)微量元素的含量，對(duì)糾正偏食挑食，加強(qiáng)兒童合理膳食，適時(shí)補(bǔ)充微量元素有指導(dǎo)作用。

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