林向東，韋加梅，鄒冬梅，任 萍，果 虹

(1、南京市浦口區(qū)疾病預(yù)防控制中心，江蘇 南京 210031；2、南京市浦口區(qū)婦幼保健所，江蘇 南京 211800)

婦科白帶涂片多功能染色液(即BTR)為一種液態(tài)雙試劑，是利用化學(xué)反應(yīng)分子之間的相互吸附原理：病原體、細(xì)胞等含有多種氨基酸，其極性基帶有不同的電荷，與帶不同電荷的染料親合，而染成不同的顏色，達(dá)到對(duì)細(xì)胞、病原形態(tài)的鑒別作用。用BTR 染色檢測(cè)發(fā)現(xiàn)淋病可疑患者，現(xiàn)將檢測(cè)情況報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 檢測(cè)對(duì)象 581例淋病可疑患者，其中男89例,女492例,年齡18～77歲。

1.2 試劑來源

1.2.1 BTR (即婦科白帶涂片多功能染色液) 由湖南省株洲康樂檢測(cè)試劑有限公司提供。生產(chǎn)日期/批號(hào)為：2009年11月2 日/09、2011年11月15日/08，避光常溫保存，無需冷藏,有效期兩年。

1.2.2 生理鹽水 由浙江濟(jì)民制藥有限公司提供；Lot:09112543,EXP:201310。

1.3 檢測(cè)方法

1.3.1 BTR 染色方法 分泌物直接涂片,待干后,加R1 液(red)2 滴，染液蓋滿涂膜,染色5～10s，水洗；加R2 液(blue) 2～4 滴，染液蓋滿涂膜，染色10～20s，水洗。趁濕片用低倍鏡和高倍鏡檢查；待片干后，換油鏡仔細(xì)檢視。根據(jù)染色后淋球菌的形態(tài)加以判定：淋病奈瑟菌染黑藍(lán)色，呈典型的腎形相對(duì)雙球菌，可分散或成團(tuán)出現(xiàn)于中性白細(xì)胞內(nèi)外。結(jié)果以腎形相對(duì)雙球菌，分中性白細(xì)胞內(nèi)外發(fā)報(bào)告。

1.3.2 清潔度 取陰道分泌物，用生理鹽水涂片，高倍鏡檢查，根據(jù)所含白細(xì)胞(膿細(xì)胞)、上皮細(xì)胞、桿菌、球菌的多少，分成Ⅰ～Ⅳ度。清潔度在Ⅰ～Ⅱ度內(nèi)視為正常，Ⅲ、Ⅳ度為異常[1]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 陰道清潔度與淋病奈瑟檢出率,見表1。

2.2 581例淋病可疑患者檢查情況,見表2。

2.3 BTR 染色法淋病奈瑟菌檢出71例與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果比較,見表3。

3 討論

3.1 人類是淋病奈瑟菌的唯一宿主 淋病奈瑟菌對(duì)單層柱狀上皮和移行上皮敏感，通過淋病奈瑟菌菌毛的黏附因子黏附于有親和力的部位，如尿道、宮頸和輸卵管黏膜上皮，然后通過菌毛毒素(脂多糖、內(nèi)毒素)與補(bǔ)體,IgM等共同作用,在局部形成炎癥反應(yīng)[2]。淋病奈瑟菌感染后，黏膜上皮及粘膜下組織充血、水腫、滲出、壞死，上皮脫落，白細(xì)胞聚集形成膿液。因此，淋病奈瑟球菌常存在于女性陰道清潔度Ⅳ度的標(biāo)本中。由表1可知，在女性陰道清潔度Ⅳ度的標(biāo)本中淋病奈瑟菌檢出率達(dá)64.52%。

表1 陰道清潔度與淋病奈瑟菌檢出率

表2 581例淋病可疑患者檢查情況

表3 BTR 染色法淋病奈瑟菌檢出71例與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果比較

3.2 由表2可知 BTR 染色結(jié)果，男性淋病奈瑟菌檢出率明顯高于女性(χ2=55.08,P＜0.01)，說明男性尿道取材特異性高。

3.3 由表3可知 用BTR 染色法檢出淋病奈瑟菌71例，與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果比較，陽性檢出相差2例。這2例經(jīng)認(rèn)真總結(jié)考慮是由于女性宮頸取材特異性低，宮頸分泌物中雜菌多，有的在形態(tài)上很象淋病奈瑟菌的緣故。

3.4 實(shí)驗(yàn)對(duì)照結(jié)果分析表明 BTR 染色法淋病奈瑟菌陽性檢出結(jié)果與細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果基本一致(χ2=55.08,P＜0.01)。由于BTR 染色法操作簡(jiǎn)便,只需一臺(tái)顯微鏡即可開展項(xiàng)目、試劑含有固定劑和滅菌劑，且蒸餾水配制，不含甲醇；染色時(shí)間短，只需15～30s，2min 內(nèi)即可發(fā)出報(bào)告，細(xì)胞和病原體形態(tài)清楚，背景清晰，結(jié)果準(zhǔn)確，陽性率高，因此我們認(rèn)為BTR 染色法是初篩淋病的一個(gè)好方法。對(duì)于無條件開展淋病奈瑟菌培養(yǎng)的基層醫(yī)療單位和農(nóng)村特別經(jīng)濟(jì)適用，可以廣泛開展應(yīng)用。

[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].第3.版南京:東南大學(xué)出版社,2006:324.

[2]叢玉隆，尹一兵，陳 瑜.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)高級(jí)教程[M].北京：人民軍醫(yī)出版社,2010:878～879.