李金菊， 朱 平，， 原慶泓， (山西天星制藥有限公司化驗(yàn)室， 太原 03003;山西華元醫(yī)藥集團(tuán);通訊作者，E-mail:zp836@sohu.com)

頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液是依據(jù)中國(guó)專利注射劑組合［1］研制而成的組合式即配型輸液，是將注射用頭孢唑肟鈉(規(guī)格:1.0 g，按頭孢唑肟計(jì))，與氯化鈉注射液(軟袋裝，規(guī)格 100 ml∶0.9 g)、無(wú)菌輸液加藥器三者相容性試驗(yàn)符合要求后，組合在一起而成。臨床靜脈滴注時(shí)，將頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液中的注射用頭孢唑肟鈉與氯化鈉注射液，用無(wú)菌輸液加藥器連通，使注射用頭孢唑肟鈉溶解于氯化鈉注射液中，配制成可供靜脈滴注的溶液。該溶液符合臨床用藥濃度、合理用藥要求和對(duì)藥液的質(zhì)量要求，減少了常規(guī)配制過(guò)程中的二次污染。

本文參考中國(guó)藥典2010版收載的頭孢唑肟鈉含量測(cè)定方法，參考有關(guān)藥物研究的指導(dǎo)原則和文獻(xiàn)［2－4］，研究建立了將頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液配制成可供靜脈滴注的溶液后，高效液相色譜法(high performance liquid chromatography，HPLC)測(cè)定該溶液中頭孢唑肟含量的方法。

1 材料與儀器

1.1 材料 頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液(注射用頭孢唑肟鈉 1.0 g、氯化鈉注射液 100 ml∶0.9 g、無(wú)菌輸液加藥器 1只，批號(hào):110301、110302、110303，自制)，頭孢唑肟對(duì)照品(含量 98.1%，批號(hào):130504－200701，中國(guó)藥品生物制品檢定所);水(超純水)，乙腈(色譜純)，磷酸氫二鈉、枸櫞酸、磷酸二氫鉀(均為分析純)。

1.2 儀器 島津高效液相色譜儀:LC-10ATVP泵、SPD-10A VP紫外檢測(cè)器(島津儀器蘇州有限公司);N2000色譜工作站(浙江大學(xué)智能信息工程有限公司)。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 色譜柱:依利特 SinoChrom ODSBP C18柱(4.6 mm ×200 mm，5 μm)，流動(dòng)相:pH 3.6緩沖液(取枸櫞酸1.42 g、磷酸氫二鈉 2.31 g，加水溶解并稀釋至1 000 ml)－乙腈(9∶1);流速:1.0 ml/min;進(jìn)樣量:20 μl;檢測(cè)波長(zhǎng):254 nm;柱溫:25℃。

2.2 溶液的配制 取磷酸二氫鉀3.63 g、磷酸氫二鈉14.33 g，加水溶解并稀釋至1 000 ml，作為 pH 7.0磷酸鹽緩沖液;取頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液，配制成可供靜脈滴注的溶液，精密量取2 ml，置200 ml量瓶中，加pH 7.0磷酸鹽緩沖液，稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液;取頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液中氯化鈉注射液，精密量取2 ml，同法制成不含頭孢唑肟的溶液，作為空白溶液;取頭孢唑肟對(duì)照品適量，精密稱定，加pH 7.0磷酸鹽緩沖液，制成每1 ml中約含0.1 mg頭孢唑肟的溶液，作為對(duì)照品溶液。

2.3 系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 稱取頭孢唑肟對(duì)照品5 mg，置10 ml量瓶中，加0.1 mol/L氫氧化鈉溶液1 ml，放置30 min，用pH 7.0磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻;取20 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，頭孢唑肟峰與其相對(duì)保留時(shí)間約0.8處堿降解物峰的分離度應(yīng)不小于3.0，見(jiàn)圖1。

圖1 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)Fig 1 The system suitability test

2.4 空白試驗(yàn) 取空白溶液20 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，空白試驗(yàn)無(wú)干擾，具有專屬性，見(jiàn)圖2。

圖2 空白試驗(yàn)Fig 2 The blank test

2.5 線性相關(guān)性試驗(yàn) 取頭孢唑肟對(duì)照品約20 mg，精密稱定，置100 ml量瓶中，加 pH 7.0磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻;分別精密量取3.0，4.0，5.0，6.0，7.0 ml，分別置10 ml量瓶中，加 pH 7.0 磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，制成 60.04，80.05，100.05，120.07，140.09 μg/ml的溶液。精密量取上述溶液各20 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。見(jiàn)表1。

表1 線性相關(guān)性試驗(yàn)結(jié)果Tab 1 Results of linear correlation analysis

以頭孢唑肟對(duì)照品峰面積A為縱坐標(biāo)(Y)，以濃度c為橫坐標(biāo)(X)，按最小二乘法進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為Y=20 920X+31 143(r=0.999 9)。

結(jié)果表明，頭孢唑肟在 60.04 －140.09 μg/ml濃度范圍內(nèi)，峰面積與濃度線性關(guān)系良好，見(jiàn)圖3。

圖3 頭孢唑肟標(biāo)準(zhǔn)曲線圖Fig 3 The calibration curve of ceftizoxime

2.6 精密度試驗(yàn) 照2.2項(xiàng)下的方法配制成對(duì)照品溶液，精密量取20 μl，注入液相色譜儀，重復(fù)6次，分別記錄色譜圖，計(jì)算RSD。結(jié)果表明，精密度良好，見(jiàn)表2。

表2 精密度試驗(yàn)結(jié)果Tab 2 Results of precision test

2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液，配制成可供靜脈滴注的溶液，精密量取6份，每份2 ml，分別照2.2項(xiàng)下的方法配制成供試品溶液;再照2.2項(xiàng)下的方法配制對(duì)照品溶液，按外標(biāo)法測(cè)定每份供試品溶液中頭孢唑肟的含量，計(jì)算RSD。結(jié)果表明，本測(cè)定方法重復(fù)性良好，見(jiàn)表3。

表3 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果 (%)Tab 3 Results of repeatability test (%)

2.8 回收率試驗(yàn) 取頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液中注射用頭孢唑肟鈉16，20，24 mg各3份，精密稱定，分別置200 ml量瓶中，各加頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液中氯化鈉注射液2 ml溶解，再分別加pH 7.0磷酸鹽緩沖液稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取上述溶液各20 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。照2.2項(xiàng)下的方法配制頭孢唑肟對(duì)照品溶液，精密量取20 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。按外標(biāo)法計(jì)算含量，計(jì)算回收率、平均回收率、RSD。結(jié)果表明，本測(cè)定方法回收率良好，見(jiàn)表4。

表4 回收率試驗(yàn)結(jié)果Tab 4 Results of recovery test

2.9 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液，配制成可供靜脈滴注的溶液，按2.2項(xiàng)下的方法，配制成供試品溶液，室溫放置，于 0，2，4，6，8，10 h分別精密量取20 μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計(jì)算RSD。結(jié)果表明，室溫下，供試品溶液在10 h內(nèi)穩(wěn)定性良好，見(jiàn)表5。

表5 穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果Tab 5 Results of stability test

2.10 樣品含量測(cè)定 取頭孢唑肟對(duì)照品、樣品，按2.2項(xiàng)下的方法，配制對(duì)照品溶液和供試品溶液。精密量取對(duì)照品溶液、供試品溶液各20 μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法計(jì)算，得頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液配制成可供靜脈滴注的溶液后，該溶液中頭孢唑肟的含量，見(jiàn)表6。

表6 樣品含量測(cè)定結(jié)果 (%)Tab 6 Results of sample assay (%)

3 討論

本文研究的是組合的即配型輸液中活性成分的含量測(cè)定方法，目前還沒(méi)有這方面的文獻(xiàn)報(bào)道。頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液中頭孢唑肟的含量，指的是將頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液配制成可供靜脈滴注的溶液后，該溶液中頭孢唑肟的含量。

系統(tǒng)適用性試驗(yàn)采用的是主成分經(jīng)堿破壞后的試驗(yàn)，重點(diǎn)考察主成分頭孢唑肟經(jīng)堿破壞后，頭孢唑肟峰與其堿降解物峰的分離度?？瞻自囼?yàn)色譜圖中所出現(xiàn)的峰，是pH 7.0磷酸鹽緩沖液所產(chǎn)生的峰，對(duì)本文研究建立的測(cè)定方法沒(méi)有影響。

本文研究建立的HPLC測(cè)定法，主成分峰分離度好、空白無(wú)干擾，線性關(guān)系、精密度、重復(fù)性良好，測(cè)定溶液穩(wěn)定，回收率高，既可用于頭孢唑肟鈉氯化鈉即配型輸液組合前相容性試驗(yàn)中的頭孢唑肟含量測(cè)定，又可用于組合后成品檢驗(yàn)中的頭孢唑肟含量測(cè)定。

［1］ 山西天星制藥有限公司.注射劑組合［P］.中國(guó):ZL 200720138312.4，2008 －09 －24.

［2］ 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典，二部［S］.2010年版.北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:204－205，附錄194－附錄195.

［3］ 山西天星制藥有限公司提出，國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布.國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn):注射用頭孢唑肟鈉，YBH21882005［S］.

［4］ 朱平，李娜，原慶泓.高效液相色譜法測(cè)定氟羅沙星葡萄糖注射液中氟羅沙星的含量［J］.山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2008，39(2):152－154.