王煥群，劉瀟然，王巍巍，孟黎明，朱峰，孫振國，王金霞

(吉林省藥物研究院藥理研究室，吉林 長春 130061)

近年來，隨著人們生活水平的不斷提高，血栓性疾病的發(fā)病率在不斷上升、發(fā)病年齡也呈年輕化的趨勢，由血栓栓塞所致的心肌梗死、腦梗死等的死亡率為各種疾病之首[1-3]，而阿司匹林和氯吡格雷都具有抑制血小板聚集、抗血栓的功效，在治療中起到了很好的作用[4]，但兩者之間存在著一些差異，本次試驗以膠原為誘導(dǎo)劑就兩者對于抑制血小板聚集進行探討。

1 實驗動物、材料與方法

1.1 實驗動物 雄性Wistar大鼠40只、體重(270±20)g，由白求恩醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，生產(chǎn)批號：SCXK-(吉)2003-0001。

1.2 試劑與儀器 膠原(西格瑪公司)?？鼓齽鸿蹤此徕c(通化市化工研究所實驗廠，生產(chǎn)批號910401)。血小板聚集儀(LBY-NJ4型，北京普利生醫(yī)療器械科技有限公司)；控溫多用高速組織搗碎機(江蘇江陰科研器械廠)；高速離心機 LDZ5-2型(北京醫(yī)用離心機廠)。

1.3 方法

1.3.1 動物分組與給藥劑量 大鼠隨機分為A，B，C，D 4組，每組10只。A，D組等體積蒸餾水灌胃5 ml/(kg·d)；B組，按100 mg/(kg·d)給藥量灌胃給阿司匹林；C組，按20 mg/(kg·d)給藥量灌胃給氯吡格雷。每日一次，連續(xù)給藥3 d，自由飲食飲水，試驗前12 h禁食不禁水。

1.3.2 血小板血漿的制備 各組動物在末次給藥后2 h心臟取血，用3.8%枸櫞酸鈉抗凝(全血與抗凝劑的比例為9：1)，800 r/min離心7 min，制備富血小板血漿(platelet-rich plasma，PRP)，剩余部分3 000 r/min離心15 min，制備貧血小板血漿(platelet-poor plasma，PPP)。

1.3.3 體內(nèi)給藥血小板聚集試驗測定 調(diào)PRP中血小板濃度為(600～700)×109個/L。按照Born氏比濁法，將盛有300 μl PRP及磁力攪拌棒的比濁管置于血小板聚集儀中，37 ℃恒溫2 min，經(jīng)PPP標(biāo)定后，在攪拌的情況下，加入膠原20 μl作為誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)聚集，測定血小板最大聚集率。

1.3.4 體外給藥血小板聚集試驗測定 D組大鼠心臟取血每一試管中取PRP注入方杯中，每方杯注入300 μl，分別標(biāo)號1，2，3。1號為空白組，2號加入25 μl阿司匹林(12 mg/ml)為阿司匹林組，3號加入25 μl氯吡格雷(12 mg/ml)為氯吡格雷組。調(diào)PRP中血小板濃度為(600～700)×109個/L。按照Born氏比濁法，將盛有300 μl PRP及磁力攪拌棒的比濁管置于血小板聚集儀中，37 ℃恒溫2 min，經(jīng)PPP標(biāo)定后，在攪拌的情況下，加入膠原20 μl作為誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)聚集，測定血小板最大聚集率，并計算血小板聚集抑制率。血小板聚集抑制率=(正常對照組血小板聚集率- 給藥組血小板聚集率) / 正常對照組血小板聚集率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS10.0統(tǒng)計軟件，采用t檢驗進行統(tǒng)計學(xué)處理。

2 結(jié)果

通過體內(nèi)體外試驗，阿司匹林與氯吡格雷對血小板最大聚集率均有降低，與對照組比較，差異均有顯著性，在體內(nèi)試驗中氯吡格雷對血小板最大抑制率明顯強于阿司匹林，但在體外試驗中阿司匹林對血小板最大抑制率強于氯吡格雷。見表1，2。

表1 體內(nèi)給藥阿司匹林與氯吡格雷對大鼠血小板 最大聚集率、血小板聚集抑制率的影響

注：與對照組比較1)P<0.05

表2 體外給藥阿司匹林與氯吡格雷對大鼠血小板最 大聚集率、血小板聚集抑制率的影響

注：與對照組比較1)P<0.05

3 討論

阿司匹林與氯吡格雷均為臨床常用治療血栓及心肌梗死方面的藥物。兩者對血小板最大聚集率均有明顯的降低作用。通過體內(nèi)體外試驗發(fā)現(xiàn)，氯吡格雷的抑制血小板能力要優(yōu)于阿司匹林，與任樹文[5]發(fā)表阿司匹林與氯吡格雷對比的試驗結(jié)果一致。體外試驗也證明阿司匹林與氯吡格雷對血小板聚集有明顯抑制作用。

參考文獻：

[1]Mackman N，Becker RC． DVT：a new era in anticoagulant therapy[J]． Arterioscler Thromb Vasc Biol，2010，30：369-371．

[2]Sakuma M，Nakamura M，Yamada N，et al． Venous thromboembolism deep vein thrombosis with pulmonary embolism，deep vein thrombosis alone， and pulmonary embolism alone and pulmonary embolism alone[J]． Circ J，2009，73：305-309．

[3]Gross PL，Weitz JI． New anticoagulants for treatment of venous thromboembolism[J]． Arterioseler Thromb Vasc Biol，2008，28：380-386．

[4]Bowry AD，Brookhart MA， Choudhry NK． Meta-analysis of the efficacy and safety of clopidogrel plus aspirin as compared to antiplatelet monotherapy for the prevention of vascular events[J]． Am J Cardiol，2008，101(7)：960-966．

[5]任樹文．氯吡格雷與阿司匹林治療老年冠心病療效124例對比研究[J]．吉林醫(yī)學(xué)，2012，33(9)：1875．