于 澎,白 靜,劉 佳,衛(wèi)建光,3,楊琳琳,劉少麗,邢美茜

(1.長春中醫(yī)藥大學藥學院，吉林 長春 130117；2.白山市食品藥品檢驗所，吉林 白山 134300；3.四平市第一人民醫(yī)院，吉林 四平 136001)

藥對是中藥方劑組成的重要組成部分，具有協(xié)同增效或減毒作用。本文從簡單活血化瘀指標入手，為丹參、王不留行作為藥對使用的合理性進行初步探索，為其合理配伍與應(yīng)用提供依據(jù)。

1 實驗材料

1.1 動物 Wistar大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量180～220 g,購吉林大學實驗動物中心,合格證號為SCXK-(吉)2008-0005。

1.2 藥品和試劑 丹參(安徽亳州)、王不留行(安徽亳州);阿司匹林(吉林省銀河制藥廠，批號090213)；冰醋酸(北京北化精細化學品有限責任公司，批號：870322)；氯化鈉注射液(長春豪邦藥業(yè)有限公司，批號：10012310)；腎上腺素(鹽酸腎上腺素注射液，天津金輝氨基酸有限公司，批號：0712141)；烏來糖(國藥集團化學試劑有限公司，批號:T20091109)；肝素(上海生物化學制藥廠，批號：840720)。

1.3 儀器設(shè)備 電子天平(常德市意歐儀器儀表有限公司，型號：DT161)；臺式離心機(上海安亨科學儀器廠制造，型號：TDL80-2B);全自動自清洗血流變儀(北京普利生儀器有限公司，型號：CBY-N6B)；血沉架(Becton,Dickinson and Company，批號:14352)；血沉管(江蘇康健醫(yī)療用品有限公司，批號：110301)。

2 實驗方法

2.1 藥物提取 按照臨床給藥最大量經(jīng)體表面積法換算至大鼠給藥量,藥對用量為2個單味藥量之和取藥材飲片，各加水煎煮2次：第1次10倍量2.0 h，第2次8倍量1.5 h，合并濾液，濃縮成所需濃度備用。

2.2 動物分組 取大鼠50只,雌雄兼用，隨機分成5組，每組10只：空白對照組(蒸餾水)，模型組(蒸餾水)，丹參組，王不留行組，丹參-王不留行組。

2.3 對大鼠凝血時間、全血黏度及血沉的影響 各組動物每日灌胃給藥1次，連續(xù)給藥7 d，于給藥第6天，除空白對照組外，各組大鼠皮下注射0.1%腎上腺素0.2 mL/只,注射2 h后置0～4 ℃水中游泳5 min，再2 h后，皮下注射腎上腺素1次，制造冰水-腎上腺素型大鼠血瘀模型。第7天末次給藥1 h后大鼠剪尾采血2滴，分開滴于玻璃片上(直徑4～5 mm)，自血液滴在玻片上開始計時,每隔30 s用1 mL注射器針頭挑動血液1次，如見針尖挑起纖維蛋白絲，停止計時，記錄時間，再挑動另1滴未挑過的血液作對照，并以前1滴血作為結(jié)果報告。[1]比較各組動物的凝血時間的變化(見表1)。

表1 各組對大鼠凝血時間的影響(±s,n=10)

烏拉坦麻醉，腹主動脈取血5 mL，其中1.5 mL迅速裝入肝素抗凝管中，置35 ℃恒溫水浴備用,然后測定高切黏度150、中切黏度60、低切黏度10、還原黏度,[2]比較各組動物血液流變性變化(見表2)。

3 實驗結(jié)果

3.1 各組對大鼠凝血時間的影響 見表1。

3.2 各組對大鼠全血液黏度的影響 見表2。

表2 各組對大鼠全血黏度的影響(±s,n=10)

4 討論

本實驗采用冰水-腎上腺素型大鼠血瘀模型，該模型根據(jù)“內(nèi)感憂怒，外感寒邪”致血瘀而制作血瘀證動物模型：根據(jù)人類在暴怒時機體內(nèi)分泌大量腎上腺素和其他激素，急性心肌梗死時血中兒茶酚胺增高，同時伴有血液流變性異常的現(xiàn)象，給予大鼠注射大劑量腎上腺素模擬暴怒，以冰水浸泡模擬寒邪。該模型制作簡單、迅速，既反應(yīng)了血瘀證的部分病因，又與臨床血瘀證的血液流變學某些指標相近[3-4]。

根據(jù)實驗結(jié)果，丹參、王不留行、丹參-王不留行藥對在凝血時間上均能延長正常和模型大鼠的凝血時間，且結(jié)果表現(xiàn)為配伍后藥對的作用強于配伍前的單味藥。

本實驗表明，各藥對大鼠紅細胞沉降速率無明顯影響，同時模型動物血沉值與空白組比較也無統(tǒng)計學意義，可能說明血沉指標不是血瘀模型造模和治療的評價指標。

[1]陳奇.中藥藥理研究方法學[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993:564,513,484

[2]霍東增.王不留行湯加味治療慢性前列腺炎115例療效觀察[J].河北中醫(yī),2009,31(7):1052.

[3]毛騰敏.“血瘀”病理模型探索(二)[J].北京醫(yī)科大學學報,1991,23(2):100-102.

[4]張珊珊.寒凝血瘀證動物模型的研制[J].南京中醫(yī)學院學報,1992,8(1):21-23.