郭大洪

（江西省上饒市江西鳳凰醫(yī)院，江西 上饒 334000）

交叉配血試驗是輸血前必不可少的，是保證輸血安全的重要措施。臨床上患者血清中冷凝素抗體滴度增高，會帶來交叉配血試驗困難，在對這些患者交叉配血試驗時，冷凝素抗體被發(fā)現(xiàn)就顯得尤為重要，得以進(jìn)一步確保臨床用血安全[1-4]。

1 材料與方法

1.1 研究對象

25例患者均為我院2008年5月至2012年3月凝聚胺法交叉配血試驗出現(xiàn)凝集的住院患者，年齡在45～70歲不等，其中以血透患者、腫瘤患者、發(fā)熱患者為主，血紅蛋白在35g/L至69g/L之間，都達(dá)到了臨床輸血指征。

1.2 檢測方法與試劑

凝聚胺法交叉配血，凝聚胺試劑由珠海貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，冷凝素抗體滴度測定。

1.3 操作步驟

1.3.1 交叉配血試驗

取干燥潔凈試管2只，標(biāo)主、次管，主管加受血者血漿2滴，獻(xiàn)血者3%～5%的紅細(xì)胞懸液1滴；次管加獻(xiàn)血者血漿2滴，受血者3%～5%紅細(xì)胞1滴；每管各加低離子介質(zhì)溶液0.6mL，混勻，室溫孵育1min；每管各加1滴凝聚胺溶液，混勻后靜止15s；以3500r/min離心15秒，傾去上清液，不要瀝干，輕輕搖動試管，目測紅細(xì)胞有無凝集，有凝集每管加入1滴重懸液，并輕輕混合，肉眼觀察凝集是否散開，再以顯微鏡判定結(jié)果。

1.3.2 冷凝集素試驗

取患者靜脈血2mL，置37℃溫度中，凝固后分離血清；取患者抗凝血1mL，以溫生理鹽水洗滌紅細(xì)胞3次，最后配成2%的紅細(xì)胞懸液；取10支小試管，每管加生理鹽水0.2mL，第一管加血清0.2mL，逐管稀釋至第9管，混勻后棄去0.2mL，第10管作對照；每管加2%紅細(xì)胞懸液0.2mL，搖勻，置4攝氏度冰箱2～4h后看結(jié)果，記錄有明顯凝集的最后一管之滴度，如第9管仍凝集，可繼續(xù)稀釋觀察其最高滴度。

2 結(jié) 果

25例患者凝聚胺法交叉配血試驗，主、次管都有不同程度的凝集顆粒出現(xiàn)，部分較明顯，后放入37攝氏度水浴5～10min，輕輕搖動，顆粒慢慢散開，倒入玻片，顯微鏡下可見紅細(xì)胞散在、彌漫排列，可以排除其他亞型抗體導(dǎo)致免役反應(yīng)影響結(jié)果，交叉配血成功。凝集素抗體滴度的測定結(jié)果，25例患者冷凝集素抗體滴度結(jié)果為1/64～1/512之間。

3 討 論

冷凝集素是一種自身IgM完全抗體，這種抗體在低溫時可使自身或同型紅細(xì)胞發(fā)生可逆性凝集。凝集反應(yīng)的高峰在0～4℃，當(dāng)溫度回升到37℃時凝集又消失。部分人群都存在一定濃度的冷凝集素抗體，但是一般情況下正常人血清中的冷凝集素效價都在1/16以，不會引起臨床癥狀，但在某些病理情況下，冷凝集素效價可異常增高而引起比較嚴(yán)重的臨床癥狀為冷凝集素綜合征。

冷凝集素的存在也經(jīng)常會造成一些常用檢驗項目的失真，最常見的影響就是對血常規(guī)，血型測定的影響，特別是對血交叉配血試驗影響尤為注意。

典型病例∶患者女，53歲，因人軟乏力伴發(fā)熱7d。患者自訴于3個月前患有帶狀皰癥疹史，治愈后感人軟乏力，患者一直未引起重視，7d前癥狀加重，并反復(fù)出現(xiàn)發(fā)熱，到我市一所三甲醫(yī)院就診，考慮感染性貧血，給予相關(guān)對癥治療，后由于血交叉試驗出現(xiàn)凝集反應(yīng)現(xiàn)象，未經(jīng)輸血治療。轉(zhuǎn)來我院，門診擬貧血待查，收住入院。血常規(guī)化驗結(jié)果為WBC1.4×109/L，RBC0.52×1012/L，Hb33g/L，PLT46×109/L。經(jīng)過各項檢查，最終確定該患者血液內(nèi)有高度冷凝集素抗體存在，在臨床醫(yī)師提出輸血治療申請后，我科血庫工作人員用凝聚胺法進(jìn)行交叉配血，嚴(yán)格按照冷凝集素抗體存在的情況下操作，患者血液最終交叉配血成功，最后用抗人球蛋白微柱凝膠法也交叉成功，先后成功輸入4個單位的懸紅濾白。

通過25例冷凝集素患者的臨床交叉配血病例分析，高效價的冷凝集素抗體導(dǎo)致血交叉試驗不合，雖主、次管都有不同程度的凝集顆粒存在，但經(jīng)過37℃水浴5～10min后，凝集顆粒會慢慢散開。對于臨床檢驗及血庫工作人員，在交叉配血試驗過程中，難免會碰到冷凝集素的干擾，只要在工作中仔細(xì)、認(rèn)真，結(jié)果的判定客觀準(zhǔn)確，這些問題還是比較容易解決的。

最后為了輸入冷凝集素抗體被激活出現(xiàn)血液凝集現(xiàn)象，建議血液在輸入之前在37℃水浴適當(dāng)加溫，輸入過程中緩慢滴入，這樣可以使患者更安全用血。

[1] 周建月，韋喜敢，楊海燕.冷抗體對血型鑒定和交叉配血的干擾及處理方法[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2011，8(1)：55-57.

[2] 林國連，詹奕榮，劉紅杏，等.冷凝集素對血型鑒定和交叉配血的影響相關(guān)研究分析[J].河北醫(yī)學(xué)，2010，16(3)：302-304.

[3] 楊世明，曹麗妍，張勇萍，等.自身冷抗體對血型鑒定和交叉配血試驗的影響[J].第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報，2009，30(8)：50.

[4] 姜燕娟，龐桂芝，張趁利.高效價冷自身抗體引起血型鑒定及配血困難1例[J].臨床血液學(xué)雜志：輸血與檢驗版，2008，21(5)：520-520.