劉平，程璐，張鷹，劉倩，胡志強

(1.武漢中聯集團四藥藥業(yè)有限公司，430223;2.武漢市第一醫(yī)院藥劑科，430022)

復方爐甘石洗劑是武漢市第一醫(yī)院的醫(yī)院制劑(制劑文號:鄂藥制字 H20083012)，由爐甘石、氧化鋅、樟腦、薄荷腦等成分組成，其中含樟腦0.5%、薄荷腦1.0%，主要功效為止癢，消炎，收斂。臨床上用于治療物理性及過敏性皮膚病、皮膚瘙癢癥等。其中樟腦、薄荷腦能選擇性地刺激人體皮膚或黏膜的冷覺感受器，引起皮膚黏膜血管收縮，從而產生消炎止癢的作用。樟腦和薄荷腦均為易揮發(fā)成分，含量測定多用氣相色譜法［1-2］。原標準中采用滴定法對其中的氧化鋅和爐甘石進行含量測定，為更好地控制產品質量，筆者建立了毛細管氣相色譜法測定復方爐甘石洗劑中樟腦和薄荷腦的含量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 氣相色譜儀(日本島津GC-14C)，浙江大學N2000色譜工作站，電子天平(德國 Sartorius ME215S)。

1.2 試藥 樟腦對照品(中國藥品生物制品檢定所，含量測定用，批號:110747-200507)，薄荷腦對照品(中國藥品生物制品檢定所，批號:110728-200506)，萘(中國藥品生物制品檢定所，內標物，批號:111673-200602)，復方爐甘石洗劑(武漢市第一醫(yī)院生產，批號:090520，090611，090624，090819)，環(huán)己烷(色譜純，天津市四友精細化學品有限公司)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱:島津CBP-M25-025(25 m×0.22 mm，0.25 μm);載氣:氮氣;流速:45 mL ·min-1;柱溫:130℃;進樣口溫度:180℃;檢測器溫度:180℃;氫氣:30 mL·min-1;空氣:400 mL·min-1;進樣量1μL。樟腦、薄荷腦和內標物的分離度應符合要求。

2.2 內標溶液的制備 取萘適量，精密稱定，加環(huán)己烷制成每毫升中含1 mg的溶液，作為內標溶液。

2.3 供試品溶液的制備 用內容量移液管精密量取本品2 mL，置20 mL量瓶中，加內標溶液適量，超聲使溶解，加內標溶液稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.4 對照品溶液的制備 精密稱取樟腦、薄荷腦對照品各適量，加內標溶液制成每毫升含樟腦0.5 mg、薄荷腦1.0 mg的混合溶液，即得。

2.5 專屬性實驗 照本品處方及生產工藝分別制備缺樟腦、缺薄荷腦以及缺樟腦和薄荷腦的陰性樣品，同“2.3”項下制備法制得空白對照溶液。按擬定的色譜條件進行測定，結果供試品溶液主峰的保留時間與對照品溶液主峰的保留時間一致，空白對照在樟腦、薄荷腦對照品色譜峰相應的保留時間處沒有出峰，表明樣品中樟腦、薄荷腦峰與其他組分色譜峰達到分離效果，陰性樣品中色譜峰對測定無干擾，見圖1。

2.6 線性關系考察 精密稱取樟腦對照品105.3 mg、薄荷腦對照品202.6 mg，置20 mL量瓶中，加內標溶液溶解并稀釋至刻度，得對照品儲備液。精密吸取該儲備液0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 mL 分別置10 mL量瓶中，用內標溶液稀釋至刻度，搖勻，分別吸取1μL注入氣相色譜儀，以對照品濃度為橫坐標(X)，對照品峰面積與內標物峰面積比為縱坐標(Y)，繪制標準曲線，計算得樟腦、薄荷腦回歸方程分別為:Y=1 460.7X+631.5，r=0.999 6(n=6);Y=1 483.6X+201.7，r=0.999 8(n=6)。結果表明，樟腦、薄荷腦濃度分別在0.26 ～2.63 mg·mL-1及0.51 ～5.06 mg·mL-1范圍內有良好的線性關系。

2.7 精密度實驗 取線性關系項下的儲備溶液1μL，注入氣相色譜儀，重復進樣6次，以樟腦、薄荷腦與內標物峰面積比計算RSD，結果樟腦RSD為0.59%，薄荷腦RSD為0.71%，結果表明精密度良好。

圖1 5種溶液的氣相色譜圖A.缺薄荷腦的陰性樣品;B.缺樟腦的陰性樣品;C.缺樟腦和薄荷腦的陰性樣品;D.對照品;E.樣品;1.樟腦;2.薄荷腦;3.萘(內標物)

2.8 穩(wěn)定性實驗 取復方爐甘石洗劑(批號:090611)適量，按“2.3”項下制備供試品溶液，在相同色譜條件下分別于0，2，4，6，8 h 測定，以樟腦、薄荷腦與內標物峰面積比計算 RSD，結果樟腦RSD為0.39%，薄荷腦RSD為0.62%，結果表明供試品溶液在8 h內基本穩(wěn)定。

2.9 重復性實驗 取復方爐甘石洗劑(批號:090611)，按“2.3”項下制備方法平行制備6份，照供試品測定方法測定其含量，結果樟腦、薄荷腦分別為標示含量的 97.8%，98.5%，RSD分別為 1.42%，1.09%，說明本法重復性良好。

2.10 回收率實驗 精密稱取樟腦對照品63.9 mg、薄荷腦對照品141.3 mg，置20 mL量瓶中，加內標溶液溶解并稀釋至刻度，得對照品儲備液。精密量取已知含量的供試品(批號:090611)1.0，2.0，3.0 mL各3份，分別精密加入對照品儲備液1.0，2.0，3.0 mL，按“2.3”項下方法操作，測定并計算回收率。結果樟腦、薄荷腦的平均回收率分別為99.4%，99.0%;RSD分別為1.14%，1.02%，見表1。

2.11 樣品含量測定 取批號分別為090520，090611，090624，090819)的復方爐甘石洗劑，按照“2.3”項下方法制備并按擬訂色譜條件測定并計算百分含量，結果見表2。

表1 樟腦和薄荷腦加樣回收實驗結果

表2 樣品中樟腦和薄荷腦的含量測定結果 %

3 討論

［3-6］方法，實驗了10%聚乙二醇-20M的填充柱及島津 CBP-M25-025毛細管柱(25 m×0.22 mm，0.25μm)。結果表明，填充柱不能達到各組分的分離效果，毛細管柱分離效果良好，且柱效高，保留時間較短，達到快速分析的目的。

柱溫是色譜峰分離的一個重要參數，直接影響分離效果和分析速度。文獻中測定樟腦和薄荷腦的含量采用程序升溫的方法［6-7］，筆者在本實驗比較了一系列程序升溫條件，結果發(fā)現采用程序升溫方法色譜峰的拖尾因子較高，重復性差，采用130℃恒溫時可以達到各色譜峰基線分離，且分離度＞1.5，峰形對稱，重復性好。

本實驗分別選用了萘、正辛醇、水楊酸甲酯作為內標物，綜合考慮相對分子質量、沸點及出峰情況等因素，最好選定萘為最佳的內標物，且供試品溶液在萘峰的位置上沒有出現色譜峰，對實驗沒有干擾。由于該樣品是混懸液，所以應振搖均勻后再取樣，避免由于取樣造成的實驗結果偏差過大。

［參考文獻］

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［2］ 李國穎.氣相色譜法測定薄荷水和薄荷油中薄荷腦的含量［J］.廣東藥學院學報，2002，18(3):191-193.

［3］ 劉杰，董文玲.4種中藥橡膠膏劑中樟腦、薄荷腦、冰片和水楊酸甲酯含量的氣相色譜法測定［J］.中成藥，2004，26(10):795-798.

［4］ 張水龍，王紅梅，葉基榮.氣相色譜法測定虎標萬金油中薄荷腦及樟腦的含量［J］.中國藥品標準，2003，4(2):44-46.

［5］ 何強.氣相色譜法測定皮炎平軟膏中樟腦、薄荷腦的含量［J］.廣東藥學，2003，13(6):13-14.

［6］ 宋敏，黃慧芬，戴黎黎.氣相色譜法測定樟霜中樟腦和薄荷腦的含量［J］.中國藥師，2008，11(10):1202-1203.

［7］ 周剛，王巨才，禹鳳英，等.毛細管氣相色譜法測定復方薄荷腦滴鼻液中薄荷腦和樟腦的含量［J］.解放軍藥學學報，2006，22(2):150-151.