田 蘊(yùn) 蔣向君 賀 燕 葛 敏

（江蘇省連云港市畜產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心，連云港 222001）

喹乙醇又稱喹酰胺醇，商品名為快育靈、倍育諾，是化學(xué)合成的喹嗯啉類廣譜抗菌藥物。20世紀(jì)70年代初由西德拜爾藥廠研究合成的飼料添加劑，有良好的廣譜抗菌效果，并具有蛋白同化作用，可提高動(dòng)物的飼料轉(zhuǎn)化率與瘦肉率，促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)。但由于喹乙醇有蓄積毒性，對(duì)大多數(shù)動(dòng)物有明顯的致畸作用，對(duì)人也有潛在的致畸形、致突變、致癌作用，不規(guī)范使用喹乙醇不僅直接危害動(dòng)物機(jī)體的健康，還能對(duì)人類健康造成極大的危害，因此喹乙醇在美國(guó)和歐盟都被禁止用作飼料添加劑，《中國(guó)獸藥典》（2010版）對(duì)喹乙醇也有明確規(guī)定喹乙醇禁用于禽、魚及體重超過35kg的豬，農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY 5029-2008《無公害食品 豬肉》中規(guī)定喹乙醇不得檢出。

依據(jù)GB/T 20797-2006肉與肉制品中喹乙醇?xì)埩袅康臏y(cè)定方法，對(duì)豬肉中喹乙醇含量測(cè)定過程中，加標(biāo)回收率較低，本文根據(jù)喹乙醇見光易分解的特性，減少了稱樣量，改進(jìn)了前處理過程，建立了一種測(cè)定豬肉中喹乙醇含量的有效方法，進(jìn)行了回收率試驗(yàn)，得到了滿意的回收率，在平時(shí)的檢測(cè)過程中，獲得了滿意的效果。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

Waters高效液相色譜儀（2487檢測(cè)器）；組織搗碎機(jī)；振蕩器；離心機(jī)；氮吹儀；旋渦混合器；喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)品（含量98.4%，中國(guó)獸醫(yī)藥品監(jiān)察所）；乙腈（色譜純）；甲醇（色譜純）；正已烷（色譜純）；超純水

1.2 儀器分析條件

色譜柱：symmetryC18柱（5μm，4.6×250mm）；流動(dòng)相：乙腈+水（10+90）；流速：1.0ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：380nm

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 添加回收樣的制作

取適量樣品，于組織搗碎機(jī)中搗碎，混合均勻后，稱取22份樣品，每份5g（精確到0.01 g），于50 ml離心管中。其中，2份作為空白樣品，5份加入50 μL10 μg/ml的標(biāo)樣，制成添加量為0.1 mg/kg的樣品；5份加入15 μL100 μg/ml的標(biāo)樣，制成添加量為0.3 mg/kg的樣品；5份加入50 μL100 μg/ml的標(biāo)樣，制成添加量為1 mg/kg的樣品；最后5份加入100 μL100 μg/ml的標(biāo)樣，制成添加量為2 mg/kg的樣品。

2.2 樣品提取

加入15 ml乙腈，振蕩提取10 min，4 000 r/min離心后將上清液轉(zhuǎn)入另一50ml離心管中，殘?jiān)?0 ml乙腈重復(fù)提取1次，振蕩離心后將2次上清液合并，加入5 ml正已烷振蕩10 min，靜置分層，取下層液于60 ℃水浴中用氮?dú)獯蹈桑? ml流動(dòng)相溶解殘留物，旋渦混勻，經(jīng)0.45 μm濾膜后供色譜測(cè)定。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線

準(zhǔn)確稱取50.81 mg喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)品（使用前于105℃干燥1.5h），于50 ml容量瓶，用甲醇溶解定容，配制成1.0 mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，取10 ml該溶液于100 ml容量瓶中，用甲醇定容，稀釋成100 μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

取適量100 μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用甲醇逐級(jí)稀釋成為0.2 μg/ml、0.5 μg/ml、1.0 μg/ml、2.0 μg/ml、5.0 μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，上機(jī)測(cè)定，此溶液臨用現(xiàn)配。

3 結(jié)果與討論

3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程及相關(guān)系數(shù)

在0.2～5.0 μg/ml濃度范圍內(nèi)，以峰面積為縱坐標(biāo)（y），喹乙醇濃度為橫坐標(biāo)（x），得出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程及相關(guān)系數(shù)見表1。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程及相關(guān)系數(shù)

3.2 不同濃度加標(biāo)回收率及精密度

空白樣品經(jīng)測(cè)定不含喹乙醇，不同濃度加標(biāo)回收率及精密度結(jié)果見表2。

3.3 樣品分析

按照本方法對(duì)實(shí)驗(yàn)室采集的30份豬肉樣品進(jìn)行分析。其中，2份檢出喹乙醇，檢出含量為0.25 mg/kg及1.20 mg/kg，測(cè)定結(jié)果令人滿意。

3.4 檢測(cè)過程注意事項(xiàng)

因喹乙醇見光易分解，整個(gè)操作過程要嚴(yán)格避光，有條件的最好在暗室內(nèi)操作，此舉非常關(guān)鍵，尤其是氮?dú)獯蹈蛇^程，通過試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在用氮?dú)獯蹈蛇^程中，如不注意避光，得到的回收率非常低，僅為百分之十幾，甚至為零；另外，所有溶液盡量選用棕色容量瓶保存。

表2 不同濃度加標(biāo)回收率及精密度（n=5）

3.5 結(jié)論

本文提供的方法便捷快速，回收率高，重現(xiàn)性好，精密度高，向豬肉樣品中添加喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)品，添加量為0.1 mg/kg、0.3 mg/kg、1.0 mg/kg、2.0 mg/kg時(shí)分別測(cè)得回收率為71.1%、77.1%、84.9%、90.7%，在實(shí)際的檢測(cè)過程中，測(cè)定結(jié)果令人滿意。