趙麗蕓 單麗囡 何建茹
1廣東省第二中醫(yī)院(廣東廣州 510095)
2廣州中醫(yī)藥大學(xué)(廣東廣州 510405)
射干麻黃湯對哮喘祛痰作用的動物實驗研究
趙麗蕓1單麗囡2何建茹1
1廣東省第二中醫(yī)院(廣東廣州 510095)
2廣州中醫(yī)藥大學(xué)(廣東廣州 510405)
目的 觀察射干麻黃湯對哮喘祛痰作用的作用機制。方法 通過小鼠氣管酚紅實驗及家鴿氣管纖毛運動實驗評價射干麻黃湯祛痰療效。結(jié)果 射干麻黃湯高劑量組小鼠氣管酚紅排泄量明顯增加,家鴿纖毛運動加快,中、低劑量組亦有一定的作用。結(jié)論 射干麻黃湯可降低痰液黏度,增加氣管纖毛運動,對哮喘祛痰作用明顯。
射干麻黃湯 哮喘 祛痰
哮喘是一種常見的呼吸道疾病,容易反復(fù)發(fā)作,主要表現(xiàn)為喘息、氣促、胸悶、咳嗽、痰多,同時,因為痰液阻塞呼吸道,使得呼吸更為困難,哮喘癥狀加重[1]。射干麻黃湯出自《金匱要略》,為治療肺癰的經(jīng)方,現(xiàn)臨床上常用作治療哮喘、支氣管炎等。本研究從該藥入手,在對其祛痰作用進(jìn)行研究的同時,為中藥發(fā)揮多靶點整體療效提供實驗依據(jù)。
1.1 試藥 射干麻黃湯(射干,麻黃,款冬花,細(xì)辛,紫菀,五味子,半夏,生姜,大棗;上藥以 3∶3∶2∶1∶2∶1∶3∶3∶1 的比例配制),制成高、中、低3種劑量,分別為成人用量的 20、10、5倍;化痰片(輔仁藥業(yè)集團有限公司,批號:20090608)。酚紅(分析純,天津市化學(xué)試劑一廠);氯化鈉(分析純,廣州化學(xué)試劑廠);墨汁。
1.2 儀器 722型可見分光光度計(上海第三分析儀器廠);LDZ5-2離心機(北京醫(yī)用離心機廠);電子天平(廣州白云正力廠)。
1.3 動物 昆明種小鼠,健康SPF級,體質(zhì)量20~25g;廣州中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心,合格證號:2009A032;健康家鴿,體質(zhì)量為 300~350g,購于市場。
1.4 小鼠氣管酚紅實驗 隨機選取小鼠50只,雌雄各半,分為5個組,分別為空白組,對照組,中藥低、中、高劑量組。中藥各劑量組灌胃相應(yīng)劑量射干麻黃湯,對照組灌胃化痰片(成人用量的10倍),正常組給予等容積生理鹽水。每日1次,連續(xù)3d。于第3d禁食不禁水12h,末次給藥30min后,腹腔注入0.5%酚紅,0.5h后脫臼處死動物,剝離氣管周圍組織,剪下自甲狀軟骨下至氣管分支處的一段氣管,放入盛有3mL生理鹽水的試管中,再加0.1mL 5%氫氧化鈉,3000r/min離心15min。取上清液,于波長546nm測OD值,祛痰指數(shù)(%)=給藥組OD值/正常組OD值×100%。
1.5 家鴿氣管纖毛運動速度實驗 隨機選取家鴿50只,隨機均分成5組。分別為正常組﹑對照組,中藥高、中、低劑量組。中藥各劑量組灌胃相應(yīng)劑量射干麻黃湯,對照組灌胃化痰片(成人用量的10倍),正常組給予等容積生理鹽水。每日1次,連續(xù)3d。于末次給藥后0.5、1、2h,在暗室內(nèi)持家鴿頸部拉直與水平面平行,拔除頸部毛,不麻醉,背部固定,沿頸中線切開,剝離氣管,將周圍軟組織分離清楚,使氣管自甲狀軟骨到胸骨段充分暴露,并將氣管表面外膜剝離干凈。然后從靠心臟端將4號針頭垂直插入氣管后,再將針頭偏向胸骨端,使針頭斜面貼近氣管壁,注入約0.02mL墨汁,在冷光源下,觀察并記錄1min內(nèi)墨汁向前運動的距離。
1.6 統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行處理,計量資料以(±s)表示,采用單因素方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 射干麻黃湯對小鼠氣管酚紅實驗的影響[2-3]見表1。結(jié)果表明,中藥高、中、低劑量組與空白組比較,均能顯著促進(jìn)小鼠氣管酚紅排泄量(P<0.05);射干麻黃湯高、中、低劑量組分別與空白組比較祛痰指數(shù)均超過100%,且呈量-效關(guān)系,提示射干麻黃湯具有較強的祛痰作用。
表1 各組小鼠氣管酚紅排泄量比較 (±s)
表1 各組小鼠氣管酚紅排泄量比較 (±s)
與空白組比較,△P<0.05,△△P<0.01。 下同。
祛痰指數(shù)(%)空白組 -對照組 121.99組 別n OD值0.141±0.031 0.172±0.032△0.443±0.211△0.345±0.053△0.241±0.043△10 10中藥高劑量組314.18中藥中劑量組 244.68 10 10中藥低劑量組170.92 10
2.2 射干麻黃湯對家鴿氣管纖毛運動速度的影響 見表2。結(jié)果顯示,中藥各劑量組與空白組比較,均能加快墨汁的推進(jìn)(P<0.05或0.01),且其藥效作用呈量-效關(guān)系,但高、中劑量組更為明顯(P<0.01),提示射干麻黃湯能加快家鴿的纖毛運動。
表2 各組家鴿氣管纖毛運動速度比較 (mm/min,±s)
表2 各組家鴿氣管纖毛運動速度比較 (mm/min,±s)
組 別 n 0.5h空白組 10 1.561±0.234對照組 10 1.621±0.243 1h 1.212±0.213 1.735±0.143△△2h 1.621±0.724 1.695±0.432中藥高劑量組 10 1.632±0.344 1.932±0.423△△ 1.801±0.223中藥中劑量組 10 1.596±0.123 1.731±0.421△△ 1.642±0.253中藥低劑量組 10 1.574±0.235 1.550±0.357△1.635±0.131
小鼠腹腔注射酚紅指示劑,經(jīng)腹腔吸收后,可部分地由支氣管黏液腺分泌,而對于通過增加支氣管分泌液而達(dá)到祛痰作用的藥物,在本實驗中呼吸道黏膜排出的酚紅量也隨之增多,因而可從藥物對氣管內(nèi)酚紅排泄量的影響,來觀察其祛痰作用。在本實驗中,通過與對照組比較和計算祛痰指數(shù)來研究此復(fù)方的祛痰效果。
目前,雖然豚鼠用作哮喘模型較為理想,但是其極易致敏甚至死亡的特點并不適合作為評價祛痰療效的理想模型,因此本實驗選用較易觀察結(jié)果的小鼠及家鴿。
中醫(yī)學(xué)認(rèn)為“肺為氣之主,腎為氣之根”,當(dāng)哮喘病發(fā)作時,肺道不能主氣,腎虛不能納氣,則氣逆于上,而發(fā)于喘急。而脾為生化之源,脾虛生痰,痰阻氣道,導(dǎo)致喘咳,氣短[4]。而痰一旦形成又會成為一種致病因素,正所謂“百病痰作崇”,而現(xiàn)代醫(yī)學(xué)通常認(rèn)為痰是呼吸道炎癥的產(chǎn)物,可刺激呼吸道黏膜引起咳嗽,加重喘息癥狀[1,4]。因此,無論從中醫(yī)還是西醫(yī)角度,祛痰對治療哮喘都尤為重要。
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2011-05-17)