劉瑛

（大連大學職業(yè)技術(shù)學院，遼寧大連116001）

蟯蟲卵玻片標本不同制作方法比較

劉瑛

（大連大學職業(yè)技術(shù)學院，遼寧大連116001）

蟯蟲卵；玻片標本；制作方法

蟯蟲是人體常見的寄生在腸道的小型線蟲，蟲體呈乳白色，短線頭狀。其導(dǎo)致兒童常見的腸道寄生蟲病。蟯蟲成蟲寄生于人體的回盲部，雌蟲受精后移行于直腸，宿主睡眠后雌蟲移行至肛門周圍，受溫、濕度變化及空氣的刺激產(chǎn)卵。因此，蟯蟲多經(jīng)肛門—手—口的方式導(dǎo)致體外感染，也可經(jīng)被污染的食物、玩具或吸入被污染的空氣而導(dǎo)致交叉感染。蟯蟲卵標本的制作，多采用從雌蟲子宮內(nèi)取出蟲卵或宿主睡眠后在其肛周收集蟲卵。在實驗教學中，將收集到的蟯蟲卵采用3種不同方法制作成玻片標本，觀察卵的外形、大小和完好率并應(yīng)用于課堂教學。

1 材料與方法

1.1 蟯蟲卵玻片標本制作方法

（1）透明膠紙法[1]。在宿主熟睡后，將透明膠帶粘在宿主肛門周圍，之后將粘有蟯蟲卵的膠帶平整地附在玻片上鏡檢。該法簡便易行，效果好。（2）單蓋片法[2]。在透明膠紙法的基礎(chǔ)上，取下附著蟯蟲卵的透明膠紙條，用剪刀剪去兩頭，留取含有蟯蟲卵的中間部分，長約1.5～2.0cm，貼于玻片上，滴中性樹膠2～3滴，覆以蓋玻片1張（2.4cm×2.4cm），平放，溫箱內(nèi)烘干。（3）雙蓋片法。用棉簽拭子法收集蟲卵[3]，將收集的蟯蟲卵放入5%福爾馬林固定的多種蠕蟲卵中，即為混合蟲卵。用孔徑0.15mm毛細吸管吸取混合蟲卵一滴，置于載玻片中央，然后，用細玻棒挑取甘油明膠1滴，置于載玻片中央，立即覆以蓋玻片1張（1.8cm×1.8cm），待凝固后，滴加中性樹膠2～3滴，然后，再覆以蓋玻片1張（2.4cm×2.4cm），封固后，平放，溫箱內(nèi)烘干。

1.2 蟯蟲卵觀察方法

將3種不同方法制作的玻片標本分別置于低、高倍鏡下，觀察蟯蟲卵的外形、大小以及蟲卵內(nèi)容物外滲情況。

2 結(jié)果

2.1 3種方法制作的蟯蟲卵外形、大小及完好率

蟯蟲卵的外形，一般教科書多描述為橢圓形，兩側(cè)不對稱，一側(cè)較扁平，一側(cè)稍凸出[2]，從不同方向投視同一蟯蟲卵時，蟲卵外形輪廓不同，側(cè)面視呈不對稱長橢圓形，兩極不等大，背面或腹面視呈對稱長橢圓形。我們在光鏡下觀察了3種方法制作的蟯蟲卵標本外形。透明膠紙法制作的蟲卵標本呈不對稱的長橢圓形，兩極不等大占96.21%（938/975），呈對稱長橢圓形占3.79%（37/975）；單蓋片法制作的蟲卵標本呈不對稱形占92.15%（963/1 045），對稱形占7.85%（82/1 045）；雙蓋片法制作的蟲卵標本全部呈對稱形。觀察發(fā)現(xiàn)，采用不同方法制作的蟯蟲卵標本鏡下觀察時，其外形有差異。

將3種方法制作的蟯蟲卵標本分別在高倍鏡下隨機測量60個，計算蟲卵平均大小。透明膠紙法制作的蟲卵標本平均大小為（51.94±1.71）μm×（25.13±0.30）μm；單蓋片法制作的蟲卵標本平均大小為（54.30±0.36）μm×（25.64±0.16）μm；雙蓋片法制作的蟲卵標本平均大小為（55.31±0.36）μm×（24.69±0.27）μm。結(jié)果提示，不同方法制作的蟯蟲卵標本鏡下觀察時，其大小無顯著性差異。

在高倍鏡下觀察蟯蟲卵的完好率。透明膠紙法收集制作的蟲卵標本500枚，單蓋片法收集制作的蟲卵標本800枚，無一枚外滲、破裂。雙蓋片法收集制作的蟲卵標本200枚中蟲卵內(nèi)容物外滲57枚，占觀察總數(shù)的3.80%。但未見蟲卵卵殼破裂，提示蟯蟲卵卵殼較厚。

2.2 制作方法比較

經(jīng)過觀察與比較，發(fā)現(xiàn)3種方法中，以透明膠紙法最為簡便易行，但取材后的膠紙貼回原玻片時，易出現(xiàn)空隙，鏡下觀察有空隙處的蟲卵呈現(xiàn)暗色折光，同時，蟯蟲卵的水分也有可能揮發(fā)，不易長時間保存。單蓋片法是在透明膠紙法的基礎(chǔ)上用中性樹膠封制而成，可彌補透明膠紙法的不足，操作過程也比較簡便，易長時間保存。雙蓋片法則是將蟯蟲卵保存在液體中，制作過程較前2種復(fù)雜，蟲卵外形均呈對稱長橢圓形，蟲卵內(nèi)容物外滲現(xiàn)象隨時間延長增多。用上述3種方法制作的蟯蟲卵玻片標本，用于課堂教學10余年，效果較好，其中尤以單蓋片法具有制作簡便、效果理想、可長期保存的優(yōu)點。

[1]徐元章.寄生蟲學及檢驗技術(shù)[M].第3版.濟南：山東科學技術(shù)出版社，2000.

[2]陳佩惠．人體寄生蟲學實驗技術(shù)[M]．北京：科學出版社，1988．

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1671-1246（2011）03-0148-01