趙宏，張宇，舒尊鵬

(1.黑龍江省教育廳生物藥制劑重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，佳木斯大學(xué)，黑龍江 佳木斯 154002;2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)，黑龍江 哈爾濱 150040)

糖槭(Acer saccharum)，槭樹(shù)科槭屬落葉喬木。原產(chǎn)北美洲，據(jù)資料記載，在我國(guó)糖槭為引進(jìn)栽培種［1－2］。目前，國(guó)內(nèi)關(guān)于糖槭的藥用研究少見(jiàn)，初步證實(shí)其中含有黃酮、皂苷、多糖、鞣質(zhì)等［3］。本實(shí)驗(yàn)在糖槭葉有效成分的系統(tǒng)預(yù)試結(jié)果基礎(chǔ)上，分別對(duì)其醇提液和多糖進(jìn)行體內(nèi)、體外的抗氧化研究，均取得理想效果。

1 材料與方法

1.1 材料

糖槭葉采自黑龍江省佳木斯市。

KQ－500DE型數(shù)控超聲波提取器(昆山);RE－52系列旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海);SHB－Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵(鄭州);UV757CRT紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海);DZF－150型數(shù)顯小型真空干燥箱(鄭州);80－2離心機(jī)(上海);電子自旋共振譜儀(日本);SOD活性測(cè)定試劑盒(南京);MDA含量測(cè)定試劑盒(南京);生理鹽水;冰醋酸;95%乙醇;無(wú)水乙醇;乙醚;正丁醇。

1.2 體內(nèi)抗氧化實(shí)驗(yàn)供試液的制備

取500g陰干糖槭葉粉碎并置于5 000ml的錐形瓶中，90%乙醇溶液浸泡過(guò)夜，60℃超聲提取2次，30min/次，合并提取液，減壓濃縮成浸膏。用蒸餾水制得小劑量供試液(2g/mL)和大劑量供試液(4g/mL)，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3 氧化模型造模

1.4 糖槭葉對(duì)血清中SOD活性的測(cè)定

按試劑盒說(shuō)明程序進(jìn)行，用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在550nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度并記錄，按下式計(jì)算SOD活力，用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

1.5 糖槭葉對(duì)血清中MDA含量測(cè)定

按試劑盒說(shuō)明程序進(jìn)行，用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在535nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度并記錄，按下式計(jì)算MDA含量，用t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。

1.6 糖槭葉多糖的提取

1.7 抗氧化活性測(cè)定

送樣于日本高知大學(xué)，采用SOD Assay Kit－WST(Dojindo Molecular Technologies，INC)測(cè)定SOD活性;Griess法在540nm下測(cè)定溶液中的NO－2和NO－3的總量;ESR法測(cè)定DPPH消去能力，同時(shí)與黃芪和女貞子的多糖抗氧化活性進(jìn)行比較。

2 結(jié)果

2.1 糖槭葉體內(nèi)抗氧化活性

糖槭葉提取液能夠明顯增強(qiáng)D－半乳糖致衰老模型小鼠血清中SOD活性(P＜0.01)和MDA含量(P＜0.05)，結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

表1 糖槭葉對(duì)小鼠血清中SOD活性的影響(s)

表1 糖槭葉對(duì)小鼠血清中SOD活性的影響(s)

序號(hào) 組別 n SOD(U/ml)1 空白對(duì)照組12 16.20 ±3.00 2 模型組 12 9.72±0.69 3 小劑量給藥組 11 39.70±8.57 4 大劑量給藥組10 22.56 ±3.08

表2 糖槭葉對(duì)小鼠血清中MDA含量的影響(s)

表2 糖槭葉對(duì)小鼠血清中MDA含量的影響(s)

序號(hào) 組別 n MDA(nmol/ml)1 空白對(duì)照組12 27.43 ±2.28 2 模型組 12 35.96±5.08 3 小劑量給藥組 11 15.29±4.02 4 大劑量給藥組10 17.70 ±8.14

2.2 糖槭葉多糖體外抗氧化能力

在日本高知大學(xué)檢測(cè)糖槭葉中多糖的SOD活性、對(duì)NO和DPPH的消去能力，結(jié)果詳見(jiàn)圖1、圖2、圖3。

圖1 SOD樣活性作用

圖2 NO消去率

圖3 DPPH消去性

3 討論

大劑量給藥組和小劑量給藥組小鼠血液中的MDA的含量均低于空白對(duì)照組中的含量，但其中小劑量給藥組的測(cè)定情況好于大劑量給藥組;大劑量組和小劑量組小鼠血清中SOD活性均顯著上升，其中仍是小劑量給藥組的抗氧化能力強(qiáng)于大劑量給藥組，分析原因是糖槭葉中含有大量的香豆素等毒性成分，大劑量給藥組的劑量較大，造成小鼠慢性中毒反應(yīng)而導(dǎo)致加速衰老。糖槭葉多糖的體外抗氧化活性低于黃芪多糖，卻高于女貞子多糖。

糖槭因含有大量的糖類(lèi)化合物而得名，其中單糖可用于食品生產(chǎn)，多糖則是近年天然藥物化學(xué)界研究的熱點(diǎn)活性成分，本研究發(fā)現(xiàn)，其具有明顯的抗氧化活性，所以糖槭可以作為藥用資源加以利用，具有一定開(kāi)發(fā)價(jià)值。

［1］張宏達(dá).種子植物系統(tǒng)學(xué)［M］.北京:科學(xué)出版社，2004:317－318.

［2］周以良.黑龍江省樹(shù)木志［M］.哈爾濱:黑龍江科學(xué)技術(shù)出版社，1986:406.

［3］張宇，趙宏.糖槭夏果與越冬果的化學(xué)成分比較［J］.黑龍江醫(yī)藥科學(xué)，2006，29(6):21 －22.