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        低滲液固定液對外周血淋巴細(xì)胞染色體制作質(zhì)量影響的分析

        2011-08-02 00:56:02黃金林陳碧艷
        健康必讀·下旬刊 2011年7期
        關(guān)鍵詞:冰乙酸滲液氯化鉀

        黃金林 陳碧艷

        【中圖分類號】R245.81 【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】B 【文章編號】1672-3783(2011)07-0020-02

        外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)染色體具有時間短、技術(shù)簡便、可重復(fù)取材等優(yōu)點(diǎn),已在臨床染色體檢查中廣泛使用。成為許多細(xì)胞遺傳室檢查染色體基本項目,而且量也越來越大。然而,在基層單位,由于人們的意識不足和宣傳不夠廣泛,要求做染色體的患者不多,使染色體檢查往往得不到連續(xù)性和常態(tài)化,從而造成染色體培養(yǎng)制作的質(zhì)量不是很穩(wěn)定,時好時壞,主要表現(xiàn)在染色體分散不好、形態(tài)及著色較差的現(xiàn)象。在實(shí)際工作中,我們發(fā)現(xiàn)造成這種原因可能與低滲液、固定液有關(guān)。由于平時標(biāo)本量不多,有時一個星期只有一個標(biāo)本,一個月也才有3~5個,因此造成配制的低滲液,冰乙酸、甲醇按1:3配制成固定液后,開啟的冰乙酸、甲醇一次性使用不完,在室內(nèi)放置留下一次培養(yǎng)制作時用。為了探討低滲液,冰乙酸、甲醇開啟后放置時間的長短是否對染色體培養(yǎng)制作的質(zhì)量有影響,分別做檢測。

        資料與方法

        低滲液是指稱取5.59g的氯化鉀加入1000ml去離子水即成0.075MOL/L氯化鉀低滲液。固定液是指冰乙酸、甲醇按1:3配制而成,通常是現(xiàn)配現(xiàn)用。本文所檢測主要是指開啟的冰乙酸、甲醇及配制0.075MOL/L氯化鉀一次性使用不完,在室內(nèi)放置時間10天內(nèi)、30天以上各為一組,每組檢測5個標(biāo)本。

        使用同一批號的培養(yǎng)基,在確定培養(yǎng)效果良好,加秋水仙堿量及作用時間,低滲時間,現(xiàn)配現(xiàn)用固定液,固定三次,每標(biāo)本滴片兩張,每片一滴,在油鏡下進(jìn)行染色體核型分析。

        每組各計染色體分裂相500個,選擇分裂相形態(tài)好,條帶在300以上,著色均勻的核型進(jìn)行分析。結(jié)果見表1

        討論

        外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)染色體制作包括培養(yǎng)基,外周血標(biāo)本,秋水仙素,低滲,固定,滴片,烤片,顯帶,染色等一系列過程。每個環(huán)節(jié)緊密相關(guān),是獲得高質(zhì)量染色體片的根本。高質(zhì)量染色體片應(yīng)該是染色體長度適中,分散均勻,相互纏繞、重疊少,無扭曲、形態(tài)好,著色均勻,深淺帶界線分明。這其中與低滲技術(shù)處理是否得當(dāng),低滲液、固定液的品質(zhì)起關(guān)鍵作用。細(xì)胞培養(yǎng)低滲技術(shù)1952年美籍華人徐道覺首先建立的。經(jīng)過應(yīng)用0.075MOL/L氯化鉀低滲處理分裂細(xì)胞時,可使細(xì)胞膜膨脹,擴(kuò)大細(xì)胞的空間,改善細(xì)胞內(nèi)染色體相互纏繞、重疊現(xiàn)象,有利于染色體的準(zhǔn)確辨認(rèn)和計數(shù),具有使染色體輪廓清楚,染色性增強(qiáng),帶型特征更清楚的優(yōu)點(diǎn)。固定液是由冰乙酸、甲醇按1:3配制而成,固定液質(zhì)量的好壞直接影響染色體形態(tài)和著色,固定液能使細(xì)胞分散良好,形態(tài)清晰而易識別,因而強(qiáng)調(diào)固定液現(xiàn)配現(xiàn)用。由于冰乙酸成分較重容易沉淀,同時反復(fù)開啟冰乙酸及甲醇容易揮發(fā)和吸收空氣中的水分使其中成分改變,從而影響固定液質(zhì)量。由于我室標(biāo)本量少,使用配制好的低滲液及反復(fù)開啟冰乙酸、甲醇放置的時間長,反復(fù)重復(fù)使用,而出現(xiàn)染色體片質(zhì)量不穩(wěn)定的現(xiàn)象。從表1中的兩組對比表明,在10天內(nèi)使用制作染色體可分析核型明顯高于30天以上使用制作染色體可分析核型,為了確保制作染色體片質(zhì)量的穩(wěn)定,應(yīng)用新配制的低滲液、固定液。

        作者單位:533000 廣西百色市婦幼保健院

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