梁 侃 侯 峰

（1 鐵嶺衛(wèi)生職業(yè)學院，遼寧 鐵嶺 112008；2 遼寧省食品藥品檢驗所，遼寧 沈陽 110023）

“虛寒胃痛膠囊”是遼寧本溪三藥有限公司生產的獨家品種，原收載于《中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第十六冊，由白芍、黨參等八味中藥材精制而成，具有溫胃止痛，健脾益氣。用于脾虛胃弱，胃脘隱痛，喜溫喜按，遇冷或空腹加重，十二指腸球部潰瘍，慢性萎縮性胃炎等癥。原標準中質量控制項目單一，無含量測定項。本實驗建立了對處方中白芍的芍藥苷含量測定方法，更為科學合理有效地控制了藥品質量，提高了藥品質量標準。

1 儀器與試劑

1.1 試驗儀器

島津2010CHT高效液相色譜儀，島津2010紫外檢測器。

1.2 試驗試劑

甲醇為色譜純，水為二次重蒸餾水，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 對照品溶液的制備

取芍藥苷對照品12.55mg，精密稱定，加甲醇制成每1mL含50.20μg的溶液，即得。

2.2 供試品溶液制備方法考察

2.2.1 提取溶劑選擇

A：參考《中國藥典》2005年版一部所收載的“虛寒胃痛顆?！焙繙y定方法[1]，制定：取10粒本品內容物，混勻，研細，取約0.6g，精密稱定，置100mL量瓶中，加水80mL，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）30min，放冷，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。B：參考《中國藥典》2005年版一部所收載的“白芍”含量測定方法，制定：取10粒本品內容物，混勻，研細，取約0.6g，精密稱定，置100mL量瓶中，加50%乙醇80mL，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）30min，放冷，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。結果見表1。

表1 提取溶劑考察結果

測定結果表明，試驗方法A與B提取效果相近，而且試驗方法A較試驗方法B所用的試劑更加便宜、環(huán)保，因此確定選用試驗方法A為虛寒胃痛膠囊含量測定供試品溶液制備方法。

2.2.2 提取時間考察

本試驗選用超聲處理法制備供試品溶液，對不同提取時間和超聲處理條件進行了考察，考察結果見表2。

表2 超聲處理時間考察結果

測定結果提示，超聲提取30min，樣品中芍藥苷已基本提取完全，故確立超聲處理時間為30min。

2.3 測定波長的選擇

圖1 芍藥苷對照品HPLC圖譜

圖2 芍藥苷陰性HPLC圖譜

圖3 芍藥苷供試品HPLC圖譜

表7 芍藥苷回收率試驗測定結果

經參考有關文獻，并經繪制紫外圖譜，確定測定波長為230nm。紫外圖譜測定條件為：溶劑為甲醇，掃描速度為中速，掃描區(qū)間400～200nm。

2.4 方法系統適用性試驗考察

色譜柱：資生堂C18（150×4.6mm，5μm）；檢測波長為230nm；流速為1.0mL/min；流動相為甲醇-0.02mol/L磷酸二氫鉀溶液（28∶72）；理論板數按芍藥苷峰計算不低于5000；按上述色譜條件，分別取供試品溶液、對照品溶液及陰性液各進樣10μL，記錄色譜圖（見圖1、圖2、圖3）。結果表明在芍藥苷對照品色譜相應的位置上，供試品溶液具有相同保留時間的色譜峰，陰性對照溶液在此峰位無吸收，對本品中芍藥苷含量測定無干擾，芍藥苷峰與其它組分峰分離完全。

2.5 線性范圍考察

精密稱芍藥苷對照品0.00868g，置50mL量瓶中，加入甲醇使溶解，并稀釋至刻度。作為對照品溶液A，濃度為C1=0.1703mg/mL，分別進樣5μL、10μL、15μL；精密量取15mL，加甲醇定容至50mL，搖勻。作為對照品溶液B，濃度為C2=0.05109mg/mL，分別進樣1μL、5μL、10μL；分別注入液相色譜儀中，測定峰面積，進樣量與峰面積關系見表3。

表3 芍藥苷線性范圍考察結果

以進樣量為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，經線性回歸，回歸方程為：Y=1404714.6X-4827.7，r=0.9999。由測定結果表明，芍藥苷對照品進樣量在0.05109～2.5545μg范圍內線性關系良好。

2.6 精密度試驗考察

取本品（批號20080501），精密稱取0.6g，按[含量測定]項下方法制備供試液。精密吸取10μL，連續(xù)進樣6次，測定色譜峰面積，測定結果見表4。

表4 精密度試驗考察結果

2.7 穩(wěn)定性試驗考察

取本品（批號20080501），精密稱取0.6g，按[含量測定]項下制備供試液，精密吸取10μL，按0、2、4、6、8h時間間隔，分別進樣分析，測定色譜峰面積，測定結果見表5。

表5 穩(wěn)定性試驗考察結果

2.8 重復性試驗

取本品（批號20080501），精密稱取0.6g，共稱取6份，分別按[含量測定]項下方法制備供試液。精密吸取10μL，測定色譜峰面積，計算含量。測定結果見表6。

表6 重復性試驗測定結果

2.9 回收率試驗

取已知含量的本品（批號200800501，芍藥苷含量9.354mg/g），精密稱取0.3g，共稱取6份，分別精密加入芍藥苷對照品溶液（C=0.2960mg/mL）10mL，再加水80mL置100mL容量瓶中，再按[含量測定]項下方法制備供試液。精密吸取10μL，注入液相色譜儀，測定色譜峰面積，計算回收率，即得。測定結果見表7。

測定結果提示：本方法回收率在95.26%～97.75%，RSD為0.88%，符合有關規(guī)定。

2.10 樣品含量測定數據

經采用本文2.2項下方法，測定3批樣品中芍藥苷含量，測定結果見表8。

表8 3批樣品芍藥苷含量測定結果

根據上述測定結果，參考《中國藥典》2005年版一部所收載的“虛寒胃痛顆?！焙肯薅燃胺昧空鬯?，本品含量限度定為：本品每粒含白芍以芍藥苷（C23H28O11）計，不得少于1.3mg。

3 討 論

與傳統的紫外比色法及薄層色譜掃描法相比較，本方法操作簡便，定量準確，重現性好，可以更有效的控制虛寒胃痛膠囊中君藥白芍的含量。

[1]中國藥典(一部)[M].2005版.北京:化學工業(yè)出版社,2005.