趙偉霞 胡俊明 王曉華

（1 中國疾病預防控制中心環(huán)境與健康相關(guān)產(chǎn)品安全所，北京 100021；2 鄭州煙草研究院，河南 鄭州450001）

近些年來，一些傳染性疾病的增多及臨床上醫(yī)院內(nèi)感染的嚴重性[1]，對手消毒要求也日益嚴峻。因此，一些對手消毒有效而又無毒性的消毒劑的需求旺盛。選擇安全有效的手部消毒劑是提高醫(yī)務人員手部衛(wèi)生的有效措施之一。本文對常見的醇類及季銨鹽類消毒劑對其殺菌效果和毒性進行了試驗，其結(jié)果如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 4 種免洗手消毒劑：第1種消毒劑主要殺菌成分為64.1%的乙醇，第2種主要成分為65.25%的乙醇，第3種為3.08%雙氯苯雙胍己烷葡萄糖酸鹽，第4種為0.496%雙氯苯雙胍己烷葡萄糖酸鹽。4種消毒劑均為復方消毒劑。

1.1.2 實驗菌株：金黃色葡萄球菌ATCC6538、大腸桿菌8099、銅綠假單孢菌ATCC15442、白色念珠菌ATCC10231。

1.1.3 現(xiàn)場受試人：隨機選定受試者30人次。

1.1.4 ICR種清潔級小鼠：由中國藥品生物制品檢定所實驗動物中心提供。

1.1.5 新西蘭家兔：由北京科宇動物養(yǎng)殖中心提供.

1.2 方法

1.2.1 染菌用菌懸液制備：將試驗菌用TBS營養(yǎng)肉湯配制成108cfu/mL，取10μL滴加于載體布片上，使其最終濃度達到5×105～5×106cfu/片。

1.2.2 手消毒劑作用液的配制：用無菌硬水配制成所需作用濃度后置于（20±1）℃水浴備用。

1.2.3 中和劑鑒定試驗：兩種乙醇消毒劑用0.3%卵磷脂、3%吐溫80的0.03mol/L PBS作為中和劑，兩種季銨鹽類的消毒劑用1%卵磷脂、5%吐溫80的0.03mol/L PBS，試驗菌株為金黃色葡萄球菌和白色念珠菌，試驗用水浴溫度控制在（20±1）℃。平行試驗6組。要求第1組無菌生長或者極少數(shù)試驗菌落生長，第2組有較第1組為多但較第3、4組少，或第2組與第1組菌落數(shù)相近都無菌生長，第3、4、5組有相似量試驗菌生長但組間菌落數(shù)誤差率不超過15%，第6組無菌生長。連續(xù)3次試驗合格則表明中和劑適宜。

1.2.4 載體浸泡定量殺菌試驗：取無菌平皿，按每片5.0mL的量，吸取相應濃度消毒劑注入平皿，置于（20±1）℃水浴中5min后，用無菌鑷子分別放入預先制備的菌片3片，使之浸透于消毒液中，作用至預定時間，用無菌鑷子將菌片取出分別移入含5.0mL中和劑試管中，用電動混合器混合20s，使菌片上的細菌倍洗脫進入中和液中，再放置5min以上，進一步混勻后吸取1.0mL直接接種平皿，每管接種2個平皿，計活菌數(shù)，同時用稀釋液代替消毒液，進行平行試驗，作為陽性對照。所有試驗樣本均在37℃恒溫箱中培養(yǎng)，金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單孢菌培養(yǎng)48h觀察結(jié)果，白色念珠菌培養(yǎng)72h觀察結(jié)果。試驗重復3次，計算殺滅對數(shù)值。

1.2.5 隨機選擇30人次志愿者，在受試者雙手充分搓擦后，受試者左手指并攏于曲面用無菌棉拭從指尖至指跟往返涂擦2遍，將棉拭采樣端剪入中和劑試管內(nèi)，作為陽性對照。然后根據(jù)說明書使用方法把消毒劑加于右手上，作用1min，以同樣的方法采樣，作為試驗樣本。

1.2.6 急性經(jīng)口毒性試驗：采用Horn氏法，選用ICR種小鼠，清潔級，體質(zhì)量18～22g。設2150、4640、10000和21500mg/kg體質(zhì)量4個劑量組，每個劑量組10只動物，雌雄各半。用樣品原液經(jīng)口灌胃染毒。經(jīng)口灌胃的量0.2mL/10g體質(zhì)量。連續(xù)觀察14d，記錄動物中毒表現(xiàn)及思維情況，計算LD50。

1.2.7 皮膚多次刺激試驗：選取4只新西蘭種家兔，雄性，體質(zhì)量為2.5～3.0kg。試驗前24h把家兔脊柱兩側(cè)被毛剪掉，去毛范圍左右各約3cm×3cm。正式試驗時，將受試物原液0.5mL涂抹在側(cè)皮膚上，右側(cè)皮膚作為對照。在涂抹后4h，除去殘留受試物。每天涂抹一次連續(xù)14d。在每次涂抹24h觀察涂抹部位并進行皮膚刺激反應評分，評價皮膚刺激強度。

表1 4種消毒劑中和劑鑒定試驗結(jié)果

表2 4種消毒劑中和劑鑒定（和原液稀釋后）試驗結(jié)果

表3 4種消毒劑對細菌的殺滅效果及陽性對照結(jié)果

2 結(jié) 果

2.1 中和劑試驗結(jié)果

經(jīng)試驗篩選，各組中和劑可有效中和手消毒劑對試驗菌的殘留作用，并且中和劑對培養(yǎng)基和相應作用細菌均無不良影響（表1）。4種消毒劑中和劑鑒定（和原液稀釋后）試驗結(jié)果見表2。

2.2 殺菌試驗結(jié)果

結(jié)果表明，這幾種手消毒劑樣品原液的作用液在0.5、1.0、1.5min的作用時間下，殺滅對數(shù)值均達到了3以上，符合殺菌要求（表3）。

2.3 手現(xiàn)場試驗

每種消毒劑進行30人次的手現(xiàn)場試驗，其自然菌的降低對數(shù)值均＞1。結(jié)果見表4。

表4 4種手消毒劑的手現(xiàn)場試驗結(jié)果

2.4 急性經(jīng)口毒性試驗結(jié)果

在觀察期內(nèi)，各計量組均未出現(xiàn)出現(xiàn)明顯的中毒癥狀，無動物死亡。該4種消毒劑對雌雄性小鼠經(jīng)口毒性LD50＞5000mg/kg體質(zhì)量，屬于實際無毒級。

2.5 皮膚多次刺激試驗結(jié)果

受試動物局部皮膚在觀察期內(nèi)無紅斑、水腫出現(xiàn)，對動物皮膚刺激指數(shù)為0，刺激強度級別為無刺激性。

3 討 論

大量流行病學調(diào)查證實，手是醫(yī)院感染的重要途徑[2]。據(jù)調(diào)查顯示，醫(yī)務人員因洗手不徹底，導致細菌傳播而造成感染者占醫(yī)院感染發(fā)生率的30%[3]。因此，醫(yī)務人員的手在預防醫(yī)院內(nèi)感染的地位已越來越受業(yè)內(nèi)人士的關(guān)注，若不注意手部衛(wèi)生會造成醫(yī)院內(nèi)感染[1]。如醫(yī)務人員每天堅持高質(zhì)量的洗手則可使手部的細菌減少60%～90%[4]，并使醫(yī)院感染發(fā)生率降低25%～50%[5]。雖然多數(shù)護理人員知道洗手指征和原則，但能始終堅持正確洗手的較少，常常在完成整個病區(qū)護理操作后才洗手，經(jīng)常忽略在兩名患者治療護理之間洗手，原因可能是工作緊張、洗手設施不足或不方便、對洗手的意義認識不足，也存在怕?lián)p傷皮膚的問題。

調(diào)查發(fā)現(xiàn)，含植物殺菌成分的洗手液抑菌效果比較差，現(xiàn)場洗手消毒試驗結(jié)果對手上自然菌平均消除對數(shù)指僅為0.84，達不到消毒效果。本次研究的免洗手消毒劑，消毒效果好，殺滅速度快，可用在無水的情況下直接涂擦起到洗手和手部消毒的效果，動物試驗屬無毒并且無刺激性。上述消毒劑更適合無水情況下洗手消毒，為洗手不便或設施不健全的醫(yī)療機構(gòu)的首選。

[1] 任淑華.手部衛(wèi)生與醫(yī)院內(nèi)感染的預防[J].中國預防醫(yī)學雜志,2006,7(5):487-489.

[2] 姜樸,桑海軍,唐非.醫(yī)院抗菌洗手液使用狀況及抑菌效果觀察[J].中國消毒學雜志,2008,25(5):479.

[3] 田小風,雷國華,趙希鵬,等.醫(yī)院感染管理的調(diào)查及對策[J].中華醫(yī)院感染學雜志,1995,5(2):108.

[4] 尚少梅,王宜芝,鄭修霞,等.促進護理人員洗手行為一次性研究[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2003,13(6):507-510.

[5] 尚少梅,黃慶,府偉靈,等.手衛(wèi)生所致醫(yī)院感染的預防和控制措施的探討[J].中華醫(yī)院感染學雜志,2005,15(4):426-428.