亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        心腦通絡(luò)液預(yù)處理聯(lián)合針刺后處理對(duì)缺血再灌注大鼠心肌細(xì)胞凋亡的影響

        2011-06-04 02:33:36李書霖林誠(chéng)祥李延田偉
        中醫(yī)藥信息 2011年4期
        關(guān)鍵詞:后處理針刺

        李書霖,林誠(chéng)祥,李延,田偉

        (1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第二醫(yī)院,黑龍江 哈爾濱 150001;2.香港施隆寶藥業(yè)行,香港;3.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院,黑龍江 哈爾濱 150040;4.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué),黑龍江 哈爾濱 150040)

        目前認(rèn)為,細(xì)胞凋亡是缺血再灌注損傷發(fā)生機(jī)制中的一個(gè)重要環(huán)節(jié)[1]。本研究擬觀察心腦通絡(luò)液預(yù)處理聯(lián)合針刺后處理對(duì)缺血再灌注心肌細(xì)胞凋亡的影響。

        1 材料

        1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康雄性Wistar大鼠36只,體質(zhì)量(250±30)g,購(gòu)于黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

        1.2 實(shí)驗(yàn)試劑 TUNEL凋亡檢測(cè)試劑盒;戊巴比妥鈉;肝素鈉注射液;磷酸緩沖液;10%緩沖中性甲醛溶液。

        1.3 主要儀器 J0-020型小動(dòng)物呼吸機(jī);Mplso16型導(dǎo)電生理記錄儀;GL-16G臺(tái)式高速離心機(jī);電子分析天平;全自動(dòng)生化分析儀等。

        2 方法

        2.1 缺血再灌注模型的制備[2]

        采用穿線結(jié)扎法結(jié)扎大鼠左冠狀動(dòng)脈前降支30min,造成心肌缺血,松開結(jié)扎導(dǎo)致再灌注120min建立缺血再灌注損傷模型。常規(guī)心電圖監(jiān)測(cè)心肌缺血變化,以結(jié)扎后ST段下降1/3以上者以及ST段抬高(或心電圖QRS波突然增高、增寬或T波高聳)為合格模型。

        2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組

        正常組:大鼠正常飼養(yǎng),不作任何手術(shù)處理。

        假手術(shù)組:大鼠預(yù)先灌服生理鹽水10ml/kg 7天,開胸后在冠狀動(dòng)脈左前降支(LAD)下穿線,不結(jié)扎。

        缺血再灌注組:大鼠預(yù)先灌服生理鹽水10ml/kg 7天,結(jié)扎LAD造成缺血30min,再灌注120min。

        心腦通絡(luò)液預(yù)處理組:大鼠預(yù)先灌服心腦通絡(luò)液10ml/kg 7天,然后結(jié)扎LAD造成缺血30min,再灌注120min。

        針刺后處理組:結(jié)扎LAD造成缺血30min,再灌注120min,再灌注的同時(shí)采用全能脈沖電療儀,對(duì)大鼠內(nèi)關(guān)穴進(jìn)行電針針刺30min,頻率為1Hz,電壓為2V,強(qiáng)度以肢體輕微抖動(dòng)為度。

        心腦通絡(luò)液預(yù)處理組+針刺后處理組:大鼠預(yù)先灌服心腦通絡(luò)液10ml/kg 7天,然后結(jié)扎LAD造成缺血30min,再灌注120min。再灌注的同時(shí)采用全能脈沖電療儀,對(duì)大鼠內(nèi)關(guān)穴進(jìn)行電針針刺30min,頻率為1Hz,電壓為2V,強(qiáng)度以肢體輕微抖動(dòng)為度。

        2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)定 取結(jié)扎線以下?lián)p傷心肌組織,沖洗并吸干水分,立即置于10%中性甲醛溶液固定,然后常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片(所用玻片預(yù)先經(jīng)多聚賴氨酸處理)、常規(guī)脫蠟水化。將切片置入稀釋的含1%蛋白激酶K溶液中消化8min,PBS洗滌2min×3次。雙蒸水洗2min×3次。加標(biāo)記緩沖液,以保持切片濕潤(rùn)。取lml封閉液加SABC 10ul,混勻后加至切片上。37℃,2h。PBS洗片,5min×4次。再用DAB顯色10~20min,雙蒸水洗2min×3次。再用蘇木素復(fù)染,PBS及雙蒸水洗2min×3次。脫水、透明、封片。以PBS代替 TdT反應(yīng)液,余操作相同,為陰性對(duì)照。經(jīng)TUNEL法染色的切片在光學(xué)顯微鏡下,顯微攝像,經(jīng)圖象分析系統(tǒng)檢測(cè)分析。檢測(cè)心肌細(xì)胞凋亡陽(yáng)性細(xì)胞的個(gè)數(shù)和陰性細(xì)胞的個(gè)數(shù),以心肌凋亡陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)占總心肌細(xì)胞數(shù)的百分比作為心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)。

        3 結(jié)果

        經(jīng)TUNEL法染色后,光鏡觀察:以細(xì)胞核著棕黃色顆粒為陽(yáng)性,無(wú)棕黃色顆粒者為陰性。正常組、假手術(shù)組僅可見(jiàn)少量棕黃色顆粒;缺血再灌注組心肌細(xì)胞凋亡個(gè)數(shù)較其他組為多,心腦通絡(luò)液預(yù)處理組、針刺后處理組、心腦通絡(luò)液預(yù)處理+針刺后處理組與缺血再灌注組比較凋亡細(xì)胞個(gè)數(shù)明顯減少,AI明顯減小,具有顯著性差異(P<0.01),其中心腦通絡(luò)液預(yù)處理+針刺后處理組與心腦通絡(luò)液預(yù)處理組、針刺后處理組比較,具有顯著性差異(P<0.05)。各組心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)的變化見(jiàn)表1、圖1。

        表1 各組大鼠心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)的比較(±s)

        表1 各組大鼠心肌細(xì)胞凋亡指數(shù)的比較(±s)

        注:與I/R組比較,★P<0.01;與心腦通絡(luò)液預(yù)處理組、針刺后處理組比較,▲P<0.05。

        Normal組6 3.3 ±0.6 Sham 組 6 3.9 ±0.5 I/R 組 6 25.9 ±5.4心腦通絡(luò)液預(yù)處理組 6 14.4 ±3.9★針刺后處理組 6 13.6 ±3.4★心腦通絡(luò)液預(yù)處理+針刺后處理組 6 10.8±3.6★▲

        4 討論

        心細(xì)胞凋亡是缺血再灌注損傷的特征性改變,細(xì)胞凋亡的發(fā)現(xiàn)對(duì)缺血再灌注損傷的預(yù)后判斷具有重要意義。從而提示我們可以從細(xì)胞凋亡角度對(duì)缺血/再灌注后心功能的恢復(fù)及心肌保護(hù)進(jìn)行研究。大量證據(jù)已表明,在心肌缺血/再灌注損傷中,凋亡是細(xì)胞數(shù)量減少的原因之一[3]。本研究結(jié)果亦證實(shí):缺血再灌注組大鼠心肌組織受損程度嚴(yán)重,TUNEL法檢測(cè)所見(jiàn)凋亡細(xì)胞明顯增多,心腦通絡(luò)液預(yù)處理組、針刺后處理組、心腦通絡(luò)液預(yù)處理+針刺后處理組與缺血再灌注組比較凋亡細(xì)胞個(gè)數(shù)明顯減少。從而進(jìn)一步證實(shí):心肌缺血再灌注損傷可導(dǎo)致細(xì)胞凋亡;心腦通絡(luò)液預(yù)處理、針刺后處理可明顯抑制缺血再灌注損傷引起的心肌細(xì)胞凋亡,降低缺血再灌注損傷的程度,對(duì)心肌有良好的保護(hù)作用。

        圖1 各組大鼠心肌細(xì)胞凋亡圖

        [1]胡錦心.抗栓沖劑治療冠心病心絞痛309例療效觀察[J].北京中醫(yī)雜志,2006,(6):223.

        [2]趙宇輝,孫忠人,魏運(yùn)芳.針灸預(yù)處理對(duì)缺血再灌注大鼠心肌Bcl-2mRNA和BaxmRNA基因表達(dá)的影響[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2009,37(1):16-18.

        [3]張卓然,李鴻珠,高君,等.丹參注射液抑制大鼠心肌缺血-再灌注損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡[J].中醫(yī)藥學(xué)報(bào),2009,37(1):14-17.

        猜你喜歡
        后處理針刺
        車身接附點(diǎn)動(dòng)剛度后處理方法對(duì)比
        談針刺“針刺之要,氣至而有效”
        治療眶上神經(jīng)痛首選針刺
        果樹防凍措施及凍后處理
        乏燃料后處理的大廠夢(mèng)
        能源(2018年10期)2018-12-08 08:02:48
        乏燃料后處理困局
        能源(2016年10期)2016-02-28 11:33:30
        基于柴油機(jī)排氣后處理的排放控制技術(shù)應(yīng)用研究
        針刺聯(lián)合拔罐治療痤瘡50例
        針刺治療糖尿病前期32例
        針刺結(jié)合聰耳息鳴湯治療耳鳴80例
        亚洲福利网站在线一区不卡| 成人无码区免费a片www| 综合精品欧美日韩国产在线| 精品亚洲一区二区视频| 久久综合国产精品一区二区| 日本少妇春药特殊按摩3| 毛茸茸的中国女bbw| 亚洲精品一区网站在线观看| 亚洲成人av在线播放不卡| 日本丰满少妇xxxx| 午夜福利麻豆国产精品| 91精品国产91| 精品亚洲一区二区在线观看| 在线视频夫妻内射| 人人玩人人添人人澡| 欧美在线成人免费国产| 精品福利一区二区三区| 亚洲精品美女久久777777| 大地资源中文在线观看官网第二页| 亚洲va成无码人在线观看| 亚洲成人精品在线一区二区| 亚洲热线99精品视频| 欧美一级三级在线观看| 二区三区视频在线观看| 天堂视频在线观看一二区| 国产av无码专区亚洲awww| 国产亚洲欧美精品一区| 老岳肥屁熟女四五十路| 深夜福利啪啪片| 日本强好片久久久久久aaa| 午夜天堂精品一区二区| 亚洲国产性夜夜综合另类| 大肉大捧一进一出好爽视频| 久久无码精品精品古装毛片| 久久2020精品免费网站| 精品av熟女一区二区偷窥海滩| 97久久久久人妻精品专区| 国产精品国产三级国产一地| 日本一区二区三区视频网站| 越猛烈欧美xx00动态图| 久久国产精品免费一区六九堂|